Öllős Géza: Vízellátás-csatornázás közegészségügyi ismeretei (VMLK, Budapest, 2001)

5. Víztisztítás - 5.3. Mutagén aktivitás az ivóvízellátásban

mas eljárás. Ezért a baktérium-assayn kívül egyéb „in vitro” és „in vivo” biológiai vizsgálati eljárásokra is szükség van (Kollár Gy„ Sujbert L., 1991; Sujbert L., 1991).

Az ivóvízben, vagy az ivóvíz kivonatban (extrakt) lévő anyagok mutagenitása például az Ames Salmonella (Ames) vizsgálattal mutatható ki (Ames et al., 1975).

Az Ames vizsgálattal kapott mutagén aktivitás túlnyomóan metabolikus aktivitást igényel, Bár számos hollandiai folyóból származó ivóvíz koncentrátumával végzett Ames vizsgálatok során a mutagén aktivitást metabolikus aktiválás nélkül lehetett leginkább kimutatni (Kool et ah, 1982). Ezen vizsgálatok azt is kimutatták, hogy a bakteriális mutagenitás a víztisztítás közben változott. A mutagén aktivitás típusa, ill. a különböző Salmonella törzsek válasza (response) vizsgálatról vizsgálatra változik.

Az Ames-féle vizsgálati eljárást tehát kezdeti szűrővizsgálati eljárásként használják. Ebben a mutagenitási vizsgálati eljárásban a hisztidin szintézisre képtelen Salmonella typhimurium baktériumtörzseknek a mutagének hatására létrejött hisztidin szintézisre képes Salmonella typhimurium baktériumtörzsekké történő visszamutálódását használják a genetikai károsodás kimutatására. A hisztidin- igényes, de hisztidin szintézisre képtelen mutáns baktériumokat a vizsgálati mintával exponálják és „minimál agar” (hisztidin szegény) - táptalajon tenyésztik. A hisztidin igényes baktériumok visszamutálódását (reverz mutáció) az inkubálás ideje alatt a „minimál agar” táptalajon tenyésző baktériumok formájában szemlélhetjük. A hisztidin-igényes törzseket TA betűkkel és számokkal jelölik, pl. TA 97, TA 98, TA 100, TA 1537, TA 1538. Ezek a törzsek a „frameshift” (kereteltolódást okozó mutagének) kimutatására szolgálnak. Például a TA 92, TA 100, TA 102, TA 1535 a bázispárcserét (bázispár szubsztitúciót) indukáló mutagének kimutatására valók. A direkt mutagének aktiválás nélkül idézhetnek elő mutációt. A promutagének (indirekt mutagének) a mutációt patkánymáj mikroszóma sejtfrakció (S9) jelenlétében indukálják.

Egyes vegyületeket, mielőtt azok mutagénekké vagy rákkeltőkké (carcinogenic) válnak, elektrofilekké kell transzformálni. Ez a transzformáció a sejtekben és a szövetekben (tissue) valósul meg a citokróm P-450 és a kapcsolódó enzimek segítségével. Minthogy a szükséges citokróm P-450 molekulák és a kapcsolódó enzimek a legtöbb mikroorganizmusban nincsenek jelen, ezért az Ames vizsgálatban az un. S 9 patkánymáj mikroszóma sejtfrakció adagolása szükséges (Mailing, 1971).

Az Ames-teszt lemez a 248. ábrán értelmezhető (Hűek et ah, 1988). Az ábrán a Petri-táplemez felületén fehér színű baktériumok (revertánsok) jól észlelhetők, számuk a lemezen megszámolható.

491