Horváth László (szerk.): Halbiológia és haltenyésztés (Mezőgazda Kiadó, Budapest, 2000)
1. Biológiai alapismeretek - 1.4 Orbán László: Molekuláris eljárások alkalmazása a haltenyésztésben
1. Kettősszálú DNS templát 2. A DNS denaturálása és a primerek feltapadása 3. Lánchosszabbítás 4. A DNS denaturálása és a primerek feltapadása 5. Lánchosszabbítás 27. ábra. Apolimeráz láncreakció sematikus ábrázolása (Oste, C. Biotechniques 6: 162-167, 1988, 1. ábrájáról engedéllyel, módosított formában reprodukálva) A kettősszálú templát denaturációja révén két egyes szál keletkezik, melyhez a két primer (fekete és szürke téglalappal jelölve) a bázissorrendjüknek megfelelő (komplementer) régióban hibridizál. Az így keletkezett rövid kettősszálú DNS régióról a Taq DNS polimeráz enzim megindítja a másolást, mely révén a kiválasztott DNS szakasz (a két primer közötti rész) kópiaszáma az első ciklus végére megduplázódik. A második ciklus denaturációs lépését követően így már kétszer annyi templát áll rendelkezésre a további másoláshoz. Ezen templátok mindegyike általában jóval hosszabb a kiválasztott szakasznál, azonban a második ciklusban a másik primer kötődik hozzájuk, így a keletkező termékek fele már a kívánt hosszúságú egyes szálat eredményezi. A további ciklusok során ezen rövidebb szakaszok részaránya egyre nő, míg a reakció végére a hosszú DNS szálak aránya elenyészően kicsivé válik. A három lépésből (denaturálás, feltapadás és lánchosszabbítás) álló ciklust 25-30-szor megismételve a kiválasztott DNS szakasz több tíz-, esetleg százezerszeres mennyiségűre sokszorozható DNS templát 5’ 3’ 11 i ■ 1. >\-\ 1 r l 5’ 148