Szemészet, 1963 (100. évfolyam, 1-4. szám)
1963-03-01 / 1. szám
a fixált kenetre egy csepp testetlen savót cseppentettünk, 20 percig nedves kamrában tartottuk majd lemostuk, megszárítottuk és fluoresceinisothiocyanattal conjugált humán antiglobulinnal 15 percig festettük nedves kamrában. Ezt ismét mosás és szárítás követte. A festett keneteket Leitz rendszerű fluorescens mikroszkópban bíráltuk el 250—400-szoros nagyítással. A megvilágításhoz kék fényt használtunk megfelelő szűrőkkel. A fent leírt módszerrel 15 keratoconjunctivitis epidemicás betegtől vett kaparékot és 5 más kötőhártyagyulladásból vett kaparékot vizsgáltunk meg. Azokban a kénetekben, melyeknek Giemsával festett párjában zárványokat találtunk, egyes sejtekben, a sejtek plasmájában a zárványokkal azonos nagyságú és elhelyezkedésű, intenzíven fluoreszkáló képletek voltak, melyek mellett a sejtmag széle gyakran benyomottnak látszott (3. és 4. ábra). Számuk körülbelül megegyezett a Giemsával festett kenetek zárványszámával. Direkt és indirekt festési módszerrel egyaránt megtaláltuk őket. Direkt, Rhodaminos festés esetén élénk narancsvöröses szín jelenti a specifikus kötődést, ilyen színűek voltak a sejtplasmában látható fluoreszkáló képletek. Indirekt, fluoresceinisothiocyanatos festéssel pedig élénk zöldes színben fluoreszkáltak. A sejtek többi részei csak igen halványan látszottak sárgás- és zöldesszürke színben. A kontrollként megvizsgált, más kötőhártyagyulladásokból származó 5 kaparékban a specifikus kötődést jelző intenzív fluoreszkálással nem találkoztunk. A hámsejtek plasmájában talált élénken fluoreszkáló képletek alakja, nagysága, elhelyezkedése és gyakorisága igazolja, hogy azonosak a keratoconjunctivitis epidemicás zárvánnyal. Más kötőhártyagyulladásokból származó és zárvány-negatív kénetekben nem láthatóak. Az immunofluorescens módszer fajlagossága bizonyítja a zárványok antigén természetét és azt, hogy a keratoconjunctivitis epidemicás reconvalescens serumban ennek megfelelő specifikus ellenanyagok találhatók. Az antigén természetű zárványok vagy vírushalmazok, vagy a vírus és a megtámadott sejt egymásrahatásából származó antigén tulajdonságú termékek. Eredményeink alapján az előbbit tartjuk valószínűnek és ennek eldöntésére nyúlban termelt specifikus immunsavóval további vizsgálatokat tervezünk. összefoglalás A keratoconjunctivitis epidemicában található zárvány természetének tisztázására a Coons és Kaplan által leírt fluorescens módszert alkalmaztuk. Specifikus immunsavó hiányában a fluorochromot reconvalescens savó globulin fractiójához kapcsoltuk. Azokban az ezzel festett kénetekben, melyeknek Giemsával festett párja zárvány pozitív volt, egyes sejtek plasmájában élénk fluoreszkáló képleteket találtunk. Ezek alakja, nagysága, elhelyezkedése és száma igazolja, hogy azonosak a zárvánnyal. A festés fajlagossága a zárvány antigén természetét bizonyítja és azt, hogy a keratoconjunctivitis epidemicás reconvalescens savóban ennek megfelelő ellenanyagok találhatók. Vizsgálataink valószínűsítik, hogy a zárványok vírustelepekkel azonosak, de ennek végleges eldöntésére specifikus immunsavóval további vizsgálatokat tervezünk. Irodalom Chadwick, C. S., McEntegart, M. G., Nairn, R. G.: Immunology 1958, 315, 1. — Coons, A. В., Kaplan, M. H.: J. Exp. Med. 1950, 1—13, 91. ■— Geck, P., Rózsa Szántó : Acta Microbiol. 1961, 423—425, 8. — Hofmann, H. : Klin. МЫ. A. 1955, 438—465, 127. — Imre, Gy., Korchmáros, I., Opauszki, A. : Közlés alatt. — Kaufmann, H. E. : Arch, of О. 1960, 382—384, 64.— Lepri : cit.: Hofmann. — Maumenee, A. E., Hayes, G. S., Hartmann, T. L. : Am. J. O. 1945, 823, 28.— Nécsei, P. : Szóbeli közlés 1962. — 27