203897. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aktív karbonilcsoportot tartalmazó szialinsavszármazékok előállítására
1 HU 203 897 B 2 12. példa N-[Metil-(5-acetamido-3,5-didezoxi-a-D-glicero-D-galakto-2-nonulo-piranozid-onát)-oxi-acetil]-L-alanin-metil- észter [(12) képlett! vegyület, ahol R4 - -CONH-CH(CH3)-C02CH3-csoport] előállítása 1. módszer 100 mg (262 pmól) 3. példában előállított vegyület, 25,4 mg (262 pmol) L-alanin-metil-észter-hidroldorid, 41,8 mg (314 pmól) WSC és 32,4 mg (262 pmól) HONB 10 ml dimetil-formamlddal készült oldatához 18,4 mg (262 pmól) N-metil-morfolint adunk keverés és vízhűtés közben, majd az elegyet egész napon át és utána másnapig szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet bepároljuk, és a maradékot 20 g C-300 szilikagélből készült oszlopon kromatografáljuk. Az eluálást kloroform és metanol 5:1 arányú elegyével végezzük, és az így kapott terméket Dowex 50W-X8 gyanta alkalmazásával tovább tisztítjuk. így 75 mg (61,4%) hozammal jutunk a cím szerinti vegyülethez, amelynek Rr értéke 0,55 (szilikagélvékonyrétegen, a kifejlesztést butanol/etanol/víz 2:1:1 arányú elegyével végezve). 2. módszer 50 mg (1,1 mmól) 15. példa 1. módszerével előállított termék és 0,5 ml dimetil-szulfoxid oldatához feleslegben metil-jodidot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 90 percig keverjük. A reakcióelegyet 10 g C-300 szilikagélből készült oszlopon kromatografáljuk, az eluáláshoz kloroform és metanol 5:1 arányú elegyét alkalmazzuk. Összegyűjtjük azokat a frakciókat, amelyek Rf-értéke 0,27-0,17 (VRK-elemzés szerint, szilikagél-vékonyrétegen, a kifejlesztést kloroform és metanol 5:1 arányú elegyével végezve), majd a frakciókból a kívánt, 0,17 Rr értékű frakciókat elkülönítjük, s így kapjuk a cím szerinti vegyületet, amelynek ‘H-NMR színképe (500 MHz, CDC13, TMS) egyezésben van az e példában 1. módszer szerint előállított termék színképével. A vegyület jellemzői a következők: DUffi cm1: 3400 (-NH-, - OH), 1740 (-COOCH3), 1660 (-CONH-), 1540 (-CONH, amid-II) lH-NMfifc (CD3OD, TMS) 1,414 (3H, d, J-7,3 Hz, -CH3), 1,850 (1H, dd, J—11,3, 12,8 Hz, H3„), 2,008 (3H, s, -NHCOCH3), 2,742 (3H, dd, J-4,7,12,9 Hz, H3eq), 3,731 (3H, s, -COOCH3, alanin), 3,832 (3H, s, 2-COOCH3), 4,117 (1H, d, J—15,4 Hz, -O-CH-CONH-), H 4,286 (1H, d, J—15,4 Hz, -O-CH-CONH-), H 4,448 (1H, q, J-7,3 Hz, -CH-ÍH3). 13. példa N-{Metil-[5-acetamido-4,7,8,9-tetra(0-acetil)-3,5--didezoxi-a-D-glicero-D-galakto-2-nonulo--piranozil-onát]-oxi-acetil>-D-alanin-metil-észter [(15) képletű vegyület, ahol R4 - -CONH-CH(CH3)-C02CH3-csoport] előáUítása 200 mg (364 pmól) 2. példa szerint előállított vegyület, 50,6 mg (364 pmól) L-alanin-metil-észter-hidroklorid, 107 mg (466 pmól) WSC és 83 mg (466 pmól) HONB 5 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 47 mg (466 pmól) N-metil-morfolint adunk, majd az elegyet másnapig szobahőmérsékleten keverjük. A bepárlás után kapott maradékot 30 g C-300 szilikagélből készült oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként kloroform és metanol 20:1 arányú elegyét alkalmazzuk. így 125 mg (54%) hozammal kapjuk a cím szerinti vegyületet, amelynek Rrértéke a VRK- elemzés szerint 0,79 (szilikagélen, a kifejlesztést kloroform és metanol 10:1 arányú elegyével végezve). A termékjellemzői a következők: ‘H-NMR^mh: (CDC13i TMS) 1,460 (3H, d, J-7,3 Hz, -CH-Ofc), 1,895 (3H, s, -NHCOCH3), 2,039; 2,041; 2,123; 2,129 (12H, mind s, -OCOCH3*4), 2,680 (1H, dd, J-4,8,12,8 Hz, H^, 3,760 (3H, s, -COOCH3, alanin), 3,825 (3H, s,2-COOCH3), H 3,995 (2H, d, J-15,4 Hz, -OcTh-CONH-), H 4,177 (2H, d, J-15,4 Hz, -OCH-CONH-), CH3 4,641 (1H, m, -CH-), 4,946 (1H, m, 4H), 5,378 (1H, m, 8H). 14. példa Metil-[(N-szukcinimidil-oxi-karbonil)-metil-5- -acetamido-3,5-didezoxi-4,7,8,9-tetra(0-acetil)-a-D-glicero-D-galakto-2-nonulo-piranozid-onát][(16) képletű vegyület] előállítása 101,4 mg (185 pmól) 2. példa szerint előállított vegyület és 232 mg (896 pmól) N,N’-diszukcinimido-karbonát (a továbbiakban: DSC) 15 ml acetonitrillel készült oldatához 320 ml vízmentes piridint adunk, majd az elegyet másnapig szobahőmérsékleten keverjük, utána bepároljuk, és a maradékhoz etilacetátot adunk. Az etil-acetátos fázist előbb vízzel, majd telített konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk, s utána az oldószert ledesztilláljuk. így 200 mg cím szerinti vegyületet kapunk, amelynek Rf-értéke a VRK-elemzés szerint 0,477 (szilikagélen, a kifejlesztést kloroform és metanol 10:1 arányú elegyével végezve). A termékjellemzői a következők: ‘H-NMRSBW (CDC13, TMS) 1,885; 2,035; 2,049; 2,147; 2,162 (15H, mind s, -OCOCH3*5), 2,708 (1H, dd, J-4,6,13,0 Hz, H^, 2,824-2,869 (4H, m, -CO-CH2-CH2-CO-), 3,816 (3H, s, -COCH3), 4,993 (1H, m, 4H), 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
