203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 203 894 B

2

hígítjuk és 10%-os sósavval megsavanyítjuk az elegyet. Az elválasztott dietil-éteres fázist sóoldattal mossuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 1,56 g sárga folyadék marad vissza.

A nyersterméket 70 g szilikagélen flash-kromatográfiával tisztítjuk, eluensként etil-acetát és hexán 40:60 arányú elegyét használva. Az így kapott 698,1 mg (45%) színtelen olaj az NMR- spektrum szerint 17 mólszázalék A) pont szerinti vegyületet tartalmaz, így a kitermelés csak 42%.

A vékonyréteg-kromatográfiás Rrérték 0,34, ha szilikagélen etil-acetáttal fejlesztjük ki a kromatogramot.

Infravörös színkép (CCU): 2983, 2963, 2931, 2918, 2857,1444,1272,1254,1049,985 cm’1.

‘II-NMR-spektrum (CDCb): 8 5,10 (m, 3H); 4,36 (m, 4H); 3,92 (d, 3H, J-10,6 Hz); 2,36 (m, 2H); 2,03 (m, 10H); 1,68 (s, 3H); 1,63 (s, 3H); 1,60 (s, 6H); 1,41 (t, 6H, J-7 Hz) ppm.

Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N2O, +ionok): m/e 514 (M+C2HS), 485 (M+H).

C) (EJL)-{Difluor-[hidroxi-(4,8,12-trimetil-3,7,11--tridekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav

trikáliumsója

565 mg (1,17 mmól), a B) pont szerint előállított vegyületet feloldunk 8 ml vízmentes metilén-dikloridban, és aigongáz-atmoszférában hozzáadunk 0,62 ml (2,33 mmól) NJ4-bisz(trimetil-szilil)-trifluor-acetamidot, majd fénytől védve 10 percig keverjük az elegyet. Ezt követően az aranysárga oldatot 0 *C-ra hütjük, 0,67 ml (4,70 mmól) (trimetil-szilil)-jodidot adunk hozzá, és 0 °C-on folytatjuk a keverést 80 percen át. Az oldószert ezután elpárologtatjuk, a maradékot benzolban feloldjuk és bepároljuk, majd a kapott narancsvörös olajat nagyvákuumban megszárítjuk, és hozzáadjuk 1,0 ml (7,0 mmól) trietil-amin és 9 ml metanol elegyét. A kapott színtelen oldatot 15 perc múlva bepároljuk, a maradékot 4 ml vízben oldjuk, és 4,7 ml 1 n kálium-hidroxid-oldattal meglúgosítjuk. Az oldatot ezután mintegy 4 ml-re bepároljuk, és HP-20 gélen, víz-acetonitril-eleggyel gradienselúciót alkalmazva, flash-kromatografáljuk a terméket. Az így kapott 574 mg szennyezett anyagot ismételten kromatografáljuk egy HP-20 géllel töltött, 20 cm hosszú és 2,5 cm átmérőjű oszlopon, amelyet először vízzel eluálunk, majd a 20. frakciótól kezdve 600 ml metanol és 500 ml víz felhasználásával gradienselúciót végzünk, 20 ml-enként gyűjtve az eluátumot. A 49-64. frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk, amelynek eredményeként 508 mg (82%) fehér por formájában kapjuk a címben nevezett vegyületet. A tennék higroszkópos, vízzel különbözőmolekulavegyületeket alkot, 1% tömegkoncentrációjú vizes oldatának pH-ja 7,8. Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke szilikagélen, butanol, tömény ammóniumhidroxid és víz 6:3:1 arányú elegyével kromatografálva 0,31, cellulózrétegen a fenti oldószerek 7:2:1 arányú elegyével fejlesztve ki a kromatogramot 0,64.

Infravörös színkép (KBr): 3500, 3200, 2968, 2924, 1215,1132,1102,1051,999,954 cm1.

'H-NMR-spektrum (D20): 8 5,24 (t, 1H, J-6 Hz); 5,16, 5,18 (két átfedő t, 2H teljes J-7 Hz); 2,22 (m,

2H); 1,98, 2,06 (m, 8H); 1,77 (m, 2H); 1,64 (s, 3H);

1,61 (s, 3H); 1,57 (s, 6H)ppm.

19F-NMR-spektkrum (D20): 8 120,3 (t, Jpf-75 Hz) ppm.

31P-NMR-spektrum (D20): 8 32,8 (td, Jpf-75 Hz, Jpp-46 Hz) 4,07 (td, Jpf-75 Hz, Jpp-46 Hz) ppm.

Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 567 (M+K), 529 (M+H), 429 (M+2H-K).

3. példa

(E,EM)-{[Hidroxi-(4,8,12-trimetil-l j ,7,11--tridekatetraenil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav di- és

trikáliumsójának elegye

A) EJZ-farnezal

2$ ml (28,7 mmól) frissen desztillált oxalil-diklorid és 50 ml vízmentes metilén-diklorid elegyéhez -60 “C-on, 6 perc alatt beadagoljuk 4,2 ml (58,5 mmól) NJí-dimetilformamid és 10 ml metilén-diklorid elegyét Az adagolás alatt erős gázfejlődést tapasztalunk. 7 perc múlva, a hőmérsékletet továbbra is -60 *C- on tartva, mintegy 15 perc alatt becsepegtetjük 5,0 g (22,50 mmól) E,E-famezol 14 ml metUén-dikloríddal készült oldatát. A képződött sűrű, fehér szuszpenziót 20 percen át -65 *C-on keverjük, majd 7 perc alatt hozzáadunk 19 ml (136 mmól) trietilamint, és további 5 perc múlva eltávolítjuk a hűtőfürdőt, hagyva, hogy az elegy szobahőmérsékletre melegedjék. Újabb 50 perc múlva az elegyet 400 ml dietil-éterreí, meghígítjuk, mossuk kétszer 50 ml vízzel és kétszer 50 ml sóoldattal, magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A maradékot felvesszük dietil-éterben, az oldhatatlan anyagokat kiszűrjük és az oldatot ismételten, bepároljuk, aminek eredményeképpen 5,06 g (100%) kevés 2Z-izomerrel szennyezett, nyers E,E-famezált ka-, punk. A termék Rrértéke a szilikagélen etil-acetát és hexán 20:80 arányú elegyével kifejlesztett kromatogramon 0,38.

‘H-NMR-spektrum (CDCI3): 8 10,00 (d, 1H, J-8 Hz); 5,88 (d, 1H, J-8 Hz); 5,09 (m, 2H); 2,24 (m, 4H); 2,17 (s, 3H); 2,01 (m, 4H); 1,68 (s, 3H); 1,62 (s, 6H) ppm.

B) (EJEJE)-(4,8,12-Trimetil-l J,7,U --tridekatetraenil)-foszfonsav-dimetil-észter

1,0 g (25,0 mmól) 60%-os, ásványolajban szuszpendált nátrium- hidridet 20-20 ml pentánban kétszer megmossuk, 50 ml tetrahidrofuránban szuszpenziót készítünk belőle, és 0 *C-on, 15 perc alatt, 5,80 g (25,0 mmól) tetrametil-(metilén-bisz- foszfonát) (Lancaster Synthesis 5847) 12 ml tetrahidrofurános oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, amikor is 20 perc múlva egy világos, tiszta oldatot kapunk. Az oldathoz adagoljuk 10 perc alatt 4,97 g (22,5 mmól), az A) pont szerint előállított aldehid 14 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát, és 1,5 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk keveredni. Ezután dietil-éterrel meghígítjuk az elegyet, és mossuk kétszer vízzel, majd egyszer sóoldattal, magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. Az így kapott 7,05 g sárga olaj a kívánt termék mellett szennyezésként lE,3Z-izomert, vagyis (lE,3Z,7E,llE)-(4,8,12-trimetil-l,3,7,11-5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

7