203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 894 B 2 tridekatetraenil)-foszfonsav-dimetil-észtert tartalmaz, amint azt az ‘H-NMR-spektrum mutatja. A nyersterméket először részlegesen tisztítjuk flashkromatográfiával, amelyet szilikagélen, eluensként etil-acetát: hexán 1:1 elegyet használva végzünk, majd a vegyes frakciókat újból kromatografáljuk. Ez alkalommal az eluálást etil-acetát és hexán 25:75 arányú elegyével kezdjük, majd 75:25 arányú elegyével folytatjuk. Ilyen módon 0,946 g (13%) lE,3Z-izomert és 5,29 g (72%) kívánt lE,3E-izomert kapunk. Szilikagélrétegen etil-acetáttal kromatografálva, a cím szerinti vegyület Rf értéke 0,28, míg az lE,3Z-izomer Rr-értéke 0,39. Infravörös színkép (CCL,): 2968, 2951, 2928, 2919, 2851,1640,1589,1448,1385,1254,1237,1185,1062, 1036,987, 867,832,792, 774,554 cm1. 1 H-NMR-spektrum (CDC13): 8 7,39 (ddd, 1H, J-21, 17, 11 Hz); 5,97 (d, 1H, J-ll Hz); 5,51 (dd, 1H, J-20, 17 Hz); 5,08 (m, 2H, H<); 3,72 (d, 6H, J-ll Hz); 2,15 (m, 4H); 2,00 (m, 4H); 1,88 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N2O, +ionok): m/e 367 (M+C3H5), 355 (M+CjHj), 327 (M+H). ' C) (EE,E)-(4,8,12-Trimetil-l ,3,7,11- -tridekatetraenil)-foszfonsav-monometil-észter 2,43 g (7,44 mmól), a B) pont alatt leírtak szerint előállított dimetil-észtert feloldunk 40 ml metanolban, az oldathoz 30 ml 1 n kálium-hidroxid-oldatot adunk és 5 órán át 65 °C-on tartjuk. A reakcióidő leteltével az oldat pH-ját 10%-os sósavval 7,5-re állítjuk, és a metanolt elpárogtatjuk. A vizes maradékot 10%-os sósavval erősen megsavanyítjuk és két részletben etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist mossuk vízzel és sóoldattal, magnézium-szulfát felett szárítjuk és végül bepároljuk, aminek eredményeképpen, sárga olaj formájában, 2,33 g (100%), a címben megnevezett terméket kapunk. A kovasavgélen, butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kifejlesztett vékonyréteg-kromatogramon a vegyület Rfértéke 0,46. Infravörös színkép (CCU): 2969, 2926, 2917, 2852, 1641,1591,1448,1240, Í206,1053,984 cm'1. 'H-NMR-spektrum (CDCI3): 8 11,91 (s, 1H); 7,33 (ddd, 1H, J-21,17,11 Hz); 5,94 (d, 1H, J-ll Hz); 5,59 (dd, 1H, J-20,5, 11 Hz); 3,69 (d, 3H, J-ll,6 Hz); 2,13 (m, 4H); 2,02 (m, 4H); 1,86 (s, 3H); 1,67 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N2O, +ionok): m/e 341 (M+C3H5), 313 (M+H). D) (EEJE)-{[Hidroxi-(4,8,12-trimetil-l J,7,ll - -tridekatetraenil)- oszfinil]-metil}-foszfonsav-trimetil-észter 2,41 g (7,72 mmól), a C) pont szerint előállított savat háromszor egymás után benzolban feloldunk és szárazra párolunk. Az így kapott maradékot 25 ml benzolban oldjuk, 30 pl (0,344 mmól) N,N-dietil-formamidot, majd ezt követően 10 perc alatt 2,10 ml (24,10 mmól) frissen desztillált oxalil-dikloridot adunk hozzá, amelynek következményeképpen intenzív gázfejlődés indul meg. 2,5 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet, és egy további csepp N,N-dimetilformamidot adunk hozzá, ami újabb gázfejlődést eredményez. Az oldatot ezután 30 percig keverjük, az oldószert elpárologtatjuk, és a maradékot kétszer egymás után benzollal pároljuk szárazra. Az így kapott narancsvörös olajat felhasználásig vákuumban szárítjuk. 2,10 g (16,98 mmól) dimetil-(metil-foszfonát) 30 ml tetrahidrofuránnal készült és -78 °C-ra hűtött oldatához, argongáz-atmoszférában, 10 perc alatt beadagolunk 10,4 ml (16,6 mmól) 1,6 M hexános butil-lítiumoldatot. A kapott fehér szuszpenziót 30 percig keverjük, majd 10 perc alatt hozzáadjuk a fenti savklorid 13 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát Folytatjuk a keverést -78 °C-on további 2 óra hosszat, majd telített ammónium-klorid-oldattal megbontjuk a reakcióelegyet és hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Ezt követően etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázist előbb víz és sóoldat 1:1 arányú elegyével, majd sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 3,54 g sárga olajat kapunk. A nyersterméket flash-kromatografáljuk, metanol és metilén-diklorid 2:98 arányú elegyével végezve az eluálást, amikor is 2,29 g (71%) halványsárga olajat különítünk el. Annak ellenére, hogy ez a termék vékonyréteg-kromatográfiásan egységesnek mutatkozik, a 13C-NMR-spektrum mutatja, hogy minimális menynyiségil szennyezést tartalmaz. A szennyezéstől ismételt kromatografálással szabadítjuk meg az anyagot, amelyet 200 g szilikagéllel töltött oszlopon, eluensként ismét metanokmetilén- diklorid 2:98 arányú elegyet használva végzünk. A kromatografálás során 40 ml-es frakciókat szedünk, és ilyen módon a 28-37. frakciókból 1,33 g olyan terméket nyerünk, amelyben a szenynyező anyag feldúsúlt, míg a 38-53. frakciókból nyert 0,725 g termék a címben megnevezett vegyület, és csak nyomokban tartalmaz szennyezést. A következő lépéshez ezt az utóbbi anyagot használjuk, amelynek vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke 0,15, ha a kromatogramot szilikagélen, metanol és metilén-diklorid 5:95 arányú elegyével fejlesztjük ki. Infravörös színkép (film): 2958, 2924, 2855, 1638, 1450,1384,1241,1186,1121,1108,1033,845, 819 cm'1. ■H-NMR-spektrum (CDC13): 8 7,47 (ddd, 1H, J-20, 17, 11 Hz); 6,02 (d, 1H, J-ll Hz); 5,78 (dd, 1H, J-25, 17 Hz); 5,09 (m, 2H); 3,81 (d, 3H, J-9,5 Hz); 3,77 (d, 3H, J-9 Hz); 3,75 (d, 3H, J-9 Hz); 2,48 (m, 2H); 2,15 (m, 4H); 2,02 (m, 4H); 1,90 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N2O, +ionok): m/e 447 (M+C2H3), 419 (M+H). E) (E,EJI)-{[Hidroxi-(4,8,12-trimetil-l,3,7,11-•tridekatetraenil)- oszfinil]-metil}-foszfonsav di- és trikáliumsójának elegye 725,5 mg (1,73 mmól) D) pont szerinti vegyület, 0,46 ml (3,48 mmól) 2,4,6-kollidin és 8 ml metiléndiklorid elegyéhez keverés közben, 0°C-on, 5 perc 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 8
