203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 203 894 B

2

A szilikagél-rétegen metanol és metilén-diklorid 5:95 arányú elegyével kifejlesztett kromatogramon a tennék Rf-értéke 0,22.

Infravörös színkép (CCU): 2955, 2917, 2853, 1450, 1259,1240,1184,1166,1064,1039,845,822,781 cm'1.

1 H-NMR-spektrum (CDCI3): 5,14 (m, 3H); 3,81 (d, 6H, J-ll Hz); 3,77 (d, 3H, J-10,5 Hz); 2,40 (dd, 2H, J-21,1,16,3 Hz); 2,30 (m, 2H); 2,01 (m, 10H); 1,68 (s, 3H); 1,63 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm.

Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N20, +ionok): m/e 393 (M+C3H5), 381 (M+C2H5), 353 (M+H).

E) (E,E)-{[Hidroxi-(4,8,12-trimetil-3,7,ll-tridekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav trikáliumsója

1,475 g (3,51 mmól) D) pont szerinti vegyületet feloldunk 20 ml metilén-dikloridban, majd argongáz-atmoszférában, 0 'C-on, mintegy 10 perc alatt 0,93 ml (7,02 mmól) 2,4,6-kollidint és 1,90 ml (14,4 mmól) (trimetilszilil)-bromidot adunk hozzá cseppenként. A reakcióelegyet 1 óra hosszáig 0 °C-on keveijük, majd hagyjuk felmelegedni szobahőmérsékletre és folytatjuk a keverést további 5,5 órán át. Ezután az oldószert elpárologtatjuk, a maradékot nagyvákuumban szívatjuk egy ideig, majd feloldjuk 20 ml metanolban és 20 percen át keverjük. Ismételten bepároljuk, a maradékot újból feloldjuk 20 ml metanoban és hozzáadunk 11,0ml (11,0mmól) 1 nkálium-hidroxid-oldatot. A metanolt ledesztilláljuk, és a vizes oldatot felvisszük egy 16,0 cm magas, 2,5 cm átmérőjű, HP-20 géllel töltött oszlopra. Az oszlopot a 30. frakcióig vízzel eluáljuk, majd attól kezdve 100% víztől 100% acetonitrilig változó koncentrációjú eleggyel gradienselúciót végzünk. Hozzávetőlegesen 10ml-es frakciókat szedünk 2 percenként. A18-32. frakciókat egyesítjük és liofilizáljuk, majd foszfor(V)-oxid felett, vákuumban megszárítjuk. Az így kapott piszkosfehér színű termék, amelynek tömege 1,12 g (65%), analízis alapján trikáliumsónak bizonyult, vízzel 9-9,5 pH-jú oldatot ad. Cellulózrétegen butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kromatografálva, Rr-0,54.

Infravörös színkép (KBr): 3415, 2968, 2858, 1660, 1449,1383,1161,1107,1077,1043,973,799 cm1.

'H-NMR-spektrum (CD30D-D20 1:1): 8 5,20,5,08,

5,06 (három t, egyenként 1H, J-7 Hz); 2,22 (m, 2H);

1,9-2,1 (m, 10H); 1,64 (s, 3H); 1,62 (s, 3H); 1,56 (s, 6H) ppm.

3‘P-NMR-spektrum (CD30D-D20 1:1): 8 43,9 (d, Jpp~8 Hz, CPC) 17,2 (d, JPp~8 Hz, CPO3) ppm.

Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 531 (M+K), 493 (M+H), 455 (M+2H- K).

2. példa

(E,E)-{Difluor-[hidroxi-(4,8,12-trimetil-3,7,11 --tridekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav

trikáliumsója

A) (Difluor-metil)-foszfonsav-dietil-észter

L. Z. Soborovski eljárását [J. Gen. Chem. USSR, 29: 1115 (1959)] módosítottuk az alábbiak szerint.

6,82 g (171 mmól) 60%-os, ásványolajban szuszpendált nátrium- hidridet kétszer 30 ml petroléterrel

megmosunk és argongáz alatt 130 ml tetrahidrofuránban felszuszpendáljuk a tiszta hidridet Ezután mintegy 45 perc alatt cseppenként beadagolunk 22 ml (171 mmól) dietil-foszfitot, miközben az exoterm reakciót vízfürdővel szabályozzuk. Az adagolást követően még egy óra hosszat keverjük az elegyet, majd 4,5 óra alatt átbuborékoltatunk rajta 42 g (490 mmól) difluorklór-metánt. Ezalatt a belső hőmérsékletet 25 és 35 °C között tartjuk hideg vízfürdő segítségével. A képződött fehér szuszpenziót éjszakán át keveredni hagyjuk, hexánnal meghígítjuk, majd celiten átszűrjük. A szűrletet bepárolva 27,6 g halványsárga színű folyadék formájában kapjuk a nyersterméket, amelyet frakcionált desztillálóval tisztítunk. A frakcionálás eredményeképpen 5,21 g (16%) szennyezett terméket kapunk, amelynek forráspontja 1,33 kPa-on 82-84 'C, továbbá 20,66 g (64%) olyan frakciót szedünk, amelynek forráspontja

1,33 kPa-on 84-86 °C, és a színtelen folyadék csak nyomokban tartalmaz szennyezéseket.

‘H-NMR-spektrum (CDCfe): 8 5,93 (td, 1H,

Jhp-27 Hz, Jhf-49 Hz), 4,29 (quint, 4H, J-7,5 Hz);

1,39 (t, 6H, J-7,5 Hz) ppm.

13C-NMR-spektrum (CDCI3): 8 109,2 (td,

Jcp-214 Hz, Jcf-257 Hz); 63,9 (d, Ja-7,5 Hz), 15,7 (d, Jcp-3,8 Hz) ppm.

Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4-N20, +ionok): m/e 217 (M+C2H3), 206 (M+NH0, 189 (M+H), 163,135.

B)(E,E)-{Difluor-[metoxi-(4,8,12-trimetil-3,7,ll-tridekatrienil )-fos7finil]-metil}-foszfonsav-dietil-észter

1,02 g (3,23 mmól), az 1. példa C) pontjában leírtak szerint előállított monosavat feloldunk 15 ml benzolban, és keverés közben, 5 perc alatt 0,85 ml (9,69 mmól) oxalil-dikloridot adunk hozzá. Az adagolás alatt intenzív gázfejlődést tapasztalunk. 40 perc múlva 1 csepp N,N-dimetil-formamidot adunk az elegyhez, amelyet további gázfejlődés követ, majd újabb 1 óra múlva még egy csepp N,N-dimetil-formamidot adunk hozzá, amikor is már gázfejlődést nem tapasztalunk. Az oldatot ezután bepároljuk, majd a maradékot kétszer egymás után benzolban oldjuk és újra bepároljuk. Végül a párlási maradékot felhasználásig nagyvákuumban hagyjuk állni.

0,54 ml (3,88 mmól) diizopropil-amin és 6 ml tetrahidrofurán elegyéhez -78 "C-on, 10 perc alatt, 2,2 ml (3,55 mmól) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot adunk. A reakcióelegyet 0 ‘C-ra hagyjuk melegedni, majd 10 perc múlva visszahűtjük -78 'C-ra és 640 mg (3,40 mmól), az A) pontban leírtak szerint előállított foszfonsav-észter 4 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát adjuk hozzá mintegy 5 perc alatt. A képződött sárga anionokat tartalmazó oldatot -78 ‘C-on hagyjuk 30 percig keveredni, majd 5 perc alatt hozzáadagoljuk a fenti savkloridot 5 ml tetrahidrofuránban oldva. Ezután a reakcióelegyet 2 óra hosszáig -78 'C-on keverjük, majd mélyhűtőben, -85 'C-on, 16 órát állni hagyjuk. Ezt követően előbb 0,2 ml (3,50 mmól) ecetsav és 4 ml dietil-éter elegyét adjuk hozzá, majd dietil-éterrel meg5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

6