203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 894 B 2 tői védve, cseppenként hozzáadjuk 195 pl (2,05 mmól, 0,45 mólegyenérték) foszfor-tribrotnid 2 ml dietil-éterrel készült oldatát. Az elegyet egy óra hosszat 0 “C-on keverjük, majd vizet adunk hozzá, és elválasztjuk a két réteget. A szerves fázist mossuk 5 ml vízzel, 5 ml telített nátriumhidrogén-karbonát-oldattal és 5 ml sóoldattal, nátriumszulfáton szárítjuk, végül bepároljuk, aminek eredményeképpen 1,26 g (98%) nyers brómvegyületet kapunk, tiszta, világos olaj formájában. Szilikagél-rétegen etilacetát és hexán 2:8 arányú elegyével kromatografálva, Rf-0,69, az anyag bomlik. ‘H-NMR-spektrum (CDC13): 8 5,52 (t, 1H, J-8,5 Hz); 5,08 (m, 2H); 4,01 (d, 2H); 1,0-2,2 (m, 8H); 1,73 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. B) (E,E)-(4,8,12-Trimetil-3,7,11 -tridekatrienil)-foszfonsav-dimetil-észter 3,06 g (24,64 mmól) dimetil-(metil-foszfonát)-ot feloldunk 50 ml tetrahidrofuránban, és argongáz-atmoszférában, keverés közben, 14,6 ml (23,47 mmól) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot adunk hozzá mintegy 10 perc alatt. Fehér szuszpenzió képződik, amelyet 30 percen át -78 “C-on keverünk, majd hozzáadunk 6,36 g (22,32 mmól) az A) pontban leírtak szerint előállított brómvegyületet 14 ml tetrahidrofuránban oldva. Az adagolás mintegy 10 percet vesz igénybe, majd folytatjuk a keverést -78 “C-on 1 óra hosszat és 0 “C-on 45 percig. Ezután metanollal megbontjuk az elegyet, az oldószer főtömegét elpárologtatjuk, és a maradékot feloldjuk etil-acetátban, mossuk vízzel és sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk, végül bepároljuk, aminek eredményeképpen 7,35 g olajat kapunk. A nyersterméket flash-kromatográfiával tisztítjuk, amelyhez 350 g szilikagéllel töltünk meg egy oszlopot. Az oszlop készítéséhez 75:25, az eluáláshoz pedig 90:10 arányú etil-acetát-petroléter-elegyet használunk. 70 ml-es frakciókat szedve, a 23-tól 72-ig terjedő frakciókból 5,78 g (72%), a címben megnevezett vegyületet kapunk színtelen olajként. Szilikagélen etil-acetáttal kifejlesztve a vékonyréteg-kromatogramot, a termék foltja 0,21 Rf-értéknél jelentkezik. Infravörös színkép (CCU): 2967, 2952, 2918, 2852, 1449,1382,1250,1223,1185,1039,831 cm'1. ‘H-NMR-spektrum (CDCb): 5 5,10 (m, 3H); 3,73 (d, 6H, J-ll Hz); 2,28 (m, 2H); 2,03 (m, 8H); 1,77 (m, 2H); 1,68 (s, 3H); 1,62 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CHr-N20, +ionok): m/e 369 (M+C3H3); 357 (M+C2H3), 329 (M+H). C) (EJZ)-(4,8,12-Trimetil-3,7,11-tridekatrienil)-foszfonsav-monometil-észter 2,22 g (6,76 mmól), a B) pont szerint előállított vegyületet feloldunk 10 ml 1:1 arányú metanol-vízelegyben, amely 4,4 g (68,2 mmól) kálium-hidroxidot tartalmaz. Az elegyet 5,5 órán át 65-75 “C-on keverjük, majd elpárologtatjuk a metanolt, a maradékhoz metilén-dikloridot és vizet adunk, és 10 g szilárd kálium-hidrogén-szulfát beadagolásával megsavanyítjuk. A keverést addig folytatjuk, amíg a fázisok homogénné válnak, ezután a szerves fázist elválasztjuk és a vizes részt mossuk metilén- dikloriddal. Az egyesített szerves extraktumot mossuk sóoldat és víz 1:1 arányú elegyével, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az ilyen módon 100%-os kitermeléssel kapott monosav halványsárga olaj, amelynek tömege 2,13 g. A kovasavgél-rétegen, propanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 6:3:1 arányú elegyével kifejlesztett kromatogramon a termék foltja 0,62 Rpértékkel vándorol. Infravörös színkép (CCU): 2918, 2853, 1449, 1229, 1193,1056,987 cm1. ‘H-NMR-spektrum (CDC13): 8 12,22 (s, 1H); 5,10 (m, 3H); 3,72 (d, 3H, J-10,6 Hz); 2,30 (m, 2H); 2,02 (m, 8H); 1,77 (m, 2H); 1,68 (s, 3H); 1,62 (s, 3H); 1,59 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: H20, +ionok): m/w 315 (M+H), 179. D)(E,E)-{(Hidroxi-(4,8,12-trimetil-3,7,ll-tridekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav-trimetil-észter 2,05 g (6,50 mmól), a C) pontban leírtak szerint előállított monosavat feloldunk 20 ml benzolban, amely két csepp N,N-dimetil-formamidot is tartalmaz, majd keverés közben, szobahőmérsékleten, 10 perc alatt beadagolunk 1,7 ml (19,50 mmól) oxalil-dikloridot. 2,5 óra múlva az oldatot bepároljuk, a maradékot kétszer egymás után feloldjuk benzolban és mindkétszer bepároljuk, aminek eredményeképpen narancsvörös olaj formájában kapjuk a savkloridot. 1,80 g (14,50 mmól) dimetil-(metil-foszfonát)-ot feloldunk 30 ml tetrahidrofuránban, az oldatot -78 'C- ra hűtjük, és argongáz-atmoszférában, 5 perc alatt beadagolunk 8,7 ml (14,0 mmól) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot. A keletkezett fehér szuszpenziót még 15 percen át -78 “C-on kevertetjük, majd 5 perc alatt hozzáadjuk a fenti savkloridot 13 ml tetrahidrofuránban oldva. További 1 óra hosszat folytatjuk a keverést -78 “C-on, majd hagyjuk a reakcióelegyet 0 "C-ra melegedni, és újabb egy óra múltán dietil-éterrel meghígítjuk, végül 10%-os sósavval megbontjuk. A dietiléteres réteget elválaszjuk, mossuk vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és végül bepároljuk, aminek eredményeképpen a cím szerinti vegyületet kapjuk. A nyerstermék tömege 1,57 g. Az egyesített vizes részt metilén-dikloriddal extraháljuk, a szerves fázist mossuk sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és az oldószert elpárologtatjuk, amikor is további 1,10 g cím szerinti nyersterméket kapunk. A tisztítást flash-kromatográfiával végezzük, amelyhez az oszlopot 200 g, metanokmetilén-diklorid 2:98 arányú elegyben szuszpendált szilikagéllel töltjük meg. Az eluálást metanol és metilén-diklorid 4:96 arányú elegyével végezzük, amelynek során 565,1 mg (18%) kissé szennyezett, valamint 1,79 g (58%) tiszta terméket különítünk el. Az így kapott cím szerinti vegyület színtelen olaj. A kromatográfiás tisztítás során elkülönített szenynyezett frakciókból további 225,6 mg (8%) tiszta termékhez jutunk, ha azokat újból kromatografáljuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
