203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 894 B 2 Infravörös színkép (CCL): 2970, 2950, 2931, 2917, 2851, 1640,1588,1448,1383,1253,1238,1185,1104, 1061, 1036,986, 869, 831, 555,541, 495 cm'1. ‘H-NMR-spektrum (CDC13): 5 7,39 (ddd, 1H, J-21,0, 17,0, 11,5 Hz); 5,97 (d, 1H, J-11,5 Hz); 5,52 (dd, 1H, J-20,0, 17,0 Hz); 5,07 (br, 1H); 3,72 (d, 6H, J-ll Hz); 2,14 (m, 4H); 1,88 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 3H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH<-N20, +ionok): m/e 299 (M+C3H5), 287 (M+C2H5), 259 (M+H), 277 (M+H-CH3OH). C) (E£)-(4,8-Dimetil-1,3,7-nonatrienil)-fos2fonsav-monometil-észter 2,20 g (8,52 mmól) B) pont szerinti diésztert feloldunk 50 ml metanolban, nitrogéngáz alatt hozzáadunk 34 ml (34 mmól, 4,0 mólegyenérték) 1 n kálium-hidroxid-oldatot és 4 órán át 65 °C-on keverjük. Lehűlés után az elegy pH-ját 10%-os sósavval 7-re állítjuk, és a metanolt elpárologtatjuk. A visszamaradó vizes oldatot kétszer 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az egyesitett szerves fázist mossuk 50 ml vízzel és 50 ml sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 2,087 g (100%), a címben megnevezett vegyületet kapunk halványsárga olaj formájában. A termék vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke 0,47, szilikagélen butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kromatografálva. Infravörös színkép (CCL): 2970, 2949, 2929, 2917, 2815, 2333, 1640, 1590, 1448, 1239, 1206, 1052, 984, 870 cm1. ‘H-NMR-spektrum (CDCb): 8 11,52 (s, 1H); 7,33 (ddd, 1H, J-21,0, 16,5, 11,0 Hz); 5,94 (d, 1H, J-11,0 Hz); 5,60 (dd, 1H, J-21,0, 16,5 Hz); 5,07 (br, 1H); 3,69 (d, 3H, J-11,5 Hz); 2,12 (m, 4H); 1,86 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 3H) ppm. D) (E£)-{[Hidroxi-(4,8-dimetil-l $,7-nonatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav-trimetil-észter 1,99 g (8,15 mmól), a C) pont szerinti foszfonsav 25 ml vízmentes metilén-dikloriddal készült oldatához szobahőmérsékleten, aigongáz alatt, 3,10 ml (16,3 mmól, 2,0 mólegyenérték) dietil- (trimetil-szilil)-amint adunk és két óra hosszat keverjük. Ezután az oldatot bepároljuk, a visszamaradó sárga olajat kétszer egymás után benzolban oldjuk és újra bepároljuk, végül fél órán át vákuumban szárítjuk. A fenti szilil-észtert feloldjuk 25 ml vízmentes metilén- dikloridban, két csepp N,N-dimetil-formamidot adunk hozzá, és 0 °C-on, aigongáz-atmoszférában, 0,5 óra alatt beadagolunk 1,28 ml (14,7 mmól, 1,8 mólegyenérték) oxalil-dikloridot. Az elegyet 1 óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, elpárologtatjuk az oldószert, és a maradékról kétszer egymás után benzolt desztillálunk, majd végül a kapott sötétbarna olajat fél órán át vákuumban szárítjuk. 1,80 ml (16,3 mmól, 2,0 mólegyenérték) dimetil-(metil-foszfonát) és 35 ml tetrahidrofurán elegyéhez -78 ‘C- on, argongáz- atmoszférában, 10 perc alatt beadagolunk 11,5 ml (17,9 mmól, 2,2 mólegyenérték) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot, 30 percig keverjük, majd 10 perc alatt hozzáadjuk a fenti kloridot 10 ml tetrahidrofuránban oldva. Az elegyet 2 órán át -78 ‘C-on keverjük, majd telített ammónium-klorid-oldatot adunk hozzá és szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni. Extraháljuk négyszer 150 ml metilén-dikloriddal, az egyesített szerves fázist mossuk 75 ml víz és sóoldat 1:1 arányú elegyével, majd 75 ml sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az így kapott 3,28 g sárga olaj tisztítását 300 g szilikagélen flash-kromatográfiával végezzük, melynek során az oszlopot 3:97 arányú metanokmetilén-diklorid eleggyel eluáljuk. A kromatografálás eredményeképpen I, 149 g (40%) tiszta cím szerinti triésztert, valamint 545 mg (19%) csaknem tiszta terméket kapunk. Metanol és metilén-diklorid 5:95 arányú elegyével szilikagél-rétegen kromatografálva, a vegyület Rrértéke 0,17. Infravörös színkép (CCL): 2954, 1258, 1241, 1184, 1064,1037, 849,822 cm'1. 'H-NMR-spektrum (CDCI3): 8 7,47 (ddd, 1H, J-20, 17, 11 Hz); 6,02 (d, 1H, J-ll Hz); 5,79 (dd, 1H, J-17, 25 Hz); 5,07 (br, 1H); 3,80 (d, 3H, J-11,5 Hz); 3,77 (d, 3H, J-11,5 Hz); 2,48 (m, 2H); 2,15 (m, 4H); 1,89 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,61 (s, 3H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH*-N20, -(■ionok): m/e 391 (M+C3H5), 379 (M+C2H5), 351 (M+H), 319 (M+H-CH3OH). E) (EJZ)-{[Hidroxi-(4,8-dimetil-l,3,7-nonatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav trinátriumsója 400,3 mg (1,14 mmól), a D) pontban leírtak szerint előállított triészter, 225 fii (1,71 mmól, 1,5 mólegyenérték) 2,4,6-kollidin és 5 ml metilén-diklorid elegyéhez szobahőmérsékleten, argongáz alatt, cseppenként, 605 |xl (4,56 mmól, 4,0 mólegyenérték) (trimetil-szilil)-bromidot adunk. Az elegyet 5 óra hosszat keverjük, bepároljuk és vákuumban 0,5 órán át szárítjuk. A maradékot mintegy 3,45 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldattal 12-es pH-júra lúgosítjuk, 10 percen át keverjük, majd éjszakán át liofilizáljuk. A barna liofilizátumot feloldjuk 3 ml vízben, az oldatot felvisszük egy 2,5 cm átmérőjű, 16 cm magas, HP-20 vizes szuszpenziójával töltött oszlopra, és az oszlopot vízzel eluáljuk. 1,7 percenként, hozzávetőlegesen 10 ml-es frakciókat szedünk, és ilyen körülmények között a 13-19. frakciókat egyesítve és liofílizálva, majd vákuumban 24 órán át szárítva, 312,1 mg (73%) cím szerinti vegyületet kapunk, egy csöppet rózsaszínű, pelyhes liofilizátum formájában. A termék 1,0 tömeg%-os oldatánk pH-ja 9,45, cellulózrétegen butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kromatografálva, Rrértéke 0,42. Infravörös színkép (KBr): 3390, 2969, 2925, 2858, 1640,1380,1236,1152,1088,976,885, 862,790,722, 522 cm1. 1 H-NMR-spektrum (D20): 8 7,03 (td, 1H, J-17,0, II, 0 Hz); 6,03 (dd, 1H, J-17,0, 22,0 Hz); 6,01 (d, 1H, J-11,0 Hz); 5,16 (m, 1H); 2,13 (br, 4H); 1,95 (t, 2H, J-18,5 Hz); 1,82 (s, 3H); 1,65 (s, 3H); 1,60 (s, 3H) ppm. 3IP-NMR-spektrum (D20): 28,3 (d, J-4,8 Hz); 12,3 (d, J-4,8 Hz) ppm. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 13
