203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 203 894 B

2

így kapott sűrű, fehér szuszpenziót 30 percig keverjük, majd hozzácsepegtetjük gyors ütemben a fenti savkloridot, amelyet 5 ml tetrahidrofuránban oldunk. Az oldatot -78 °C-on keverjük 2 óra hosszáig, 10 ml telített ammónium-klorid-oldatot és 5 ml vizet adunk az elegyhez, majd extraháljuk négyszer 75 ml metilén-dikloriddal. Az egyesített szerves fázist 75 ml sóoldattal mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 2,52 g sárga olajat kapunk.

A nyersterméket 250 g szilikagélen flash-kromatográfiával tisztítjuk, 2:98 arányú metanokmetilén-diklorid eleggyel végezve az eluálást. Ilyen módon színtelen olajként kapjuk a címben nevezett vegyületet, amelynek tömege 1,23 g (67%). A termék vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke 0,21, szilikagélen metanol és metilén-diklorid 2:98 arányú elegyével kromatografálva.

Infravörös színkép (CCU): 2955, 2929, 854, 1449, 1384, 1368, 1259, 1234, 1184, 1164, 1063, 1037,955, 843,81,780,753,499 cm'1.

‘H-NMR-spektrum (CDC13): 8 5,20 (m, 3H); 4,13 (m, 2H); 3,80 (d, 6H, Jhp-10,5 Hz); 2,29 (dd, 2H, Jhp-16,0, 21,0 Hz); 1,8-2,1 (m, 12H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 9H); 1,34 (t, 3H, J-7,0 Hz) ppm.

Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH4, +ionok): m/e 447 (M+C2H3), 449 (M+H), 417 (M+H-CH3OH).

E) (E,E)-{[Hidroxi-(5,9,13-trimetil-4,8,12--tetradekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav

trinátriumsója

196,4 mg (0,44 mmól), a D) pont szerint előállított triészter és 87 p.1 (0,66 mmól, 1,5 mólegyenérték)

2,4,6-kollidin 1,0 ml vízmentes metilén-dikloriddal készült oldatához szobahőmérsékleten, nitrogéngáz alatt, 260 pl (1,98 mmól, 4,5 mólegyenérték) (trimetil-szilil)-bromidot adunk, és 6 óra hosszat keverjük az elegyet. Az oldószert azután elpárologtatjuk, a maradékhoz 2,00 ml (2,00 mmól, 4,5 mólegyenérték) 1 n nátrium-hidroxid-oldatot adunk, 15 percig keverjük, majd éjszakán át liofilizáljuk. Másnap a nyersterméket feloldjuk 2 ml vízben, és egy 2,5 cm átmérőjű, 12 cm magas, HP-20 gél vizes szuszpenziójával töltött oszlopra visszük. Az oszlopot a 20. frakcióig vízzel, majd ezt követően acetonitril és víz elegyével, koncentrációgradienst alkalmazva eluáljuk. Kétpercenként mintegy 10 ml-es frakciókat szedünk, és ilyen körülmények között a kívánt terméket a 36-39. frakciókban találjuk. Ezeket az oldatokat egyesítjük és liofilizáljuk, majd a üofilizátumot éjszakán át vákuumban szívatva szárítjuk, aminek eredményeképpen 143,0 mg (71%) cím szerinti vegyületet kapunk. A termék 1,0 tömeg%-os vizes oldatának pH-ja 7,35. Vékonyréteg-kromatográfiás Rrértéke 0,56, cellulózrétegen, butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kromatografálva.

Infravörös színkép (KBr): 3500, 2966, 2926, 2858, 1449, 1380, 1155,1094, 1062,976, 896, 829, 795,

443 cm-1.

'H-NMR-spektrum (D20-CD30D 1:1): 8 5,19 (t, 1H, J-6,5 Hz); 5,09 (m, 2H); 1,9-2,2 (m, 12H); 1,66 (s, 3H); 1,60 (s, 3H); 1,58 (s, 6H) ppm.

3'P-NMR-spektrum (D20): 8 39,6 (d, J-5,0 Hz);

14,4 (d, J-5,0 Hz) ppm.

Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 481 (M+Na), 459 (M+H), 437, 419.

7. példa

(E£)-{[Hidroxi-(4,8-dimetil-l J ,7-nonatrienil)-joszfinil]-metilj-foszfonsav trinátriumsója

A) EJE-Geranial

3,75 ml (43,0 mmól, 1,25 mólegyenérték) oxalildikloridot feloldunk 80 ml vízmentes metilén-dikloridban, és keverés közben, -60 *C-on, 20 perc alatt beadagoljuk 6,35 ml (89,4 mmól, 2,6 mólegyenérték) dimetil-szulfoxid és 15 ml metilén-diklorid elegyét. Adagolás közben intenzív gázfejlődést tapasztalunk. A reakcióelegyet ezután 10 percig -60 "C-on keverjük, majd 30 perc alatt hozzáadunk 5,95 ml (34,3 mmól) geraniolt (Aldrich 16, 333-3) 15 ml metilén-dikloridban oldva. A fehér szuszpenziót további 20 percen át -60 °C-on keverjük, és utána 15 perc alatt hozzáadunk 29 ml (206 mmól, 6 mólegyenérték) trietil-amint. Lassan, 1 óra alatt hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni az elegyet, majd 350 ml dietil-éterrel meghígítjuk, mossuk 75 ml vízzel és kétszer 75 ml sóoldattal, magnézium-szulfáton szárítjuk, végül bepároljuk, aminek eredményeképpen 5,35 g (100%) nyers E^E-geranialt kapunk. Szilikagélen, 2:8 arányú etil-acetát:hexán elegygyel kifejlesztve a kromatogramot, Rf-0,37.

'H-NMR-spektrum (CDC13): 8 9,99 (d, 1H, J-8,0 Hz); 5,88 (d, 1H, J-8,5 Hz); 5,08 (m, 1H); 2,17 (m, 4H); 2,16 (s, 3H); 1,69 (s, 3H); 1,61 (s, 3H) ppm.

B) (E,E)-(4,8-Dimetil-l,3,7-nonatrienil)-fos7fonsav--dimetil-észter

1,53 g (3,82 mmól, 1,11 mólegyenérték) 60%-os, ásványolajban szuszpendált nátrium-hidridet háromszor 20 ml pentánnal leöblítünk, majd a hidridet 80 ml tetrahidrofuránban szuszpendáljuk. Szobahőmérsékleten, argongáz-atmoszférában, 20 perc alatt beadagoljuk 8,32 g (38,2 mmól, 1,11 mólegyenérték) tetrametil(metilén-biszfoszfonát) (Lancaster Synthesis 5848) 15 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát, aminek eredményeként tiszta oldat keletkezik. Ehhez az oldathoz adjuk 15 perc alatt az A) pont szerinti aldehid 20 ml tetrahidrofúrános oldatát, 1,5 órán át keveredni hagyjuk, majd vízzel megbontjuk a reakcióelegyet. Ezután 350 ml dietil-éterrel meghígítjuk, és az éteres oldatot kétszer 75 ml vízzel, majd 75 ml sóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. Az így kapott 8,24 g sárga olajat 800 g szilikagélen (Merck 9385) flash- kromatográfiával tisztítjuk, etil-acetát és petroléter 1:1 arányú elegyével eluálva az oszlopot. Ennek során 4,745 g (53%) kívánt lE,3E-izomert, valamint 217,7 mg (3%) lZ,3E-izomert, vagyis (1Z,3E)(4,8-dimetil-1,3,7-nonatrienil)-foszfonsav-dimetil- észtert különítünk el. Szilikagélen etil-acetáttal kifejlesztve a vékonyréteg-kromatogramot, a címben nevezett vegyület Rr értéke 0,36, a szennyező izomer Rrértéke 0,44. A címben megnevezett vegyület spektrometriás adatai:

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

12