203790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dipeptidek előállítására enzimatikus úton
1 HU 203 790 B 2 Nukleofil Konc. pH Oldószer Tennék Hozam (mól/1) (%) e-(trifluor- 0,1 *> 8,5 30% DMSO tyr-Lys(Tfa)OH 51-acetil)-lizin y-(terc-butil)- 0,1*' 8,0 30% DMSO tyr-Glu(OtBu)NHí 42-glutaminsavamid y-metil-glutaminsav 0,3 8,5 víz tyr-Glu(OMe)OH 75 y-etil-glutaminsav 0,3 8,5 víz tyr-Glu(OEt)OH 71 *' 25 mmól/1 szubsztrát, 20 pmól 11. példa Oldalláncban védett, N-terminális aminosavakat 15 Szubsztrát Tennék Hozam (%) tartalmazó L£-dipeptidek karboxipeptidâz Y katalizálta szintézise oldalláncban védett szubsztrát-L-aszparaginsav-Asp(OBzl)-Met-OH 65 komponensekből és L-metioninból, mint nukleofil-dibenzil-észter*’ komponensből, 30% DMSO-ban, pH 9,0 értéken L-glutaminsav-Glu(OBzl)-Met-OH 70 Enzim: 20 pmól/1, EDTA: 1 mmól/1, reakcióidó>20 óra 20-dibenzil-észter*1' *' 35% konverziónál b) 60% konverziónál Szubsztrát Nukleofil Konc. pH Tennék Hozam (mól/1 ) (%) tyr-OEt ß-alanin-metil-észter 03 83 tyr-BAla-OMe 51 tyr-OEt ß-alanin-metil-0,5 83 tyr-BAla-OMe 72-észter phe-OEt ß-alanin-metil-észter 03 9,0 phe-BAla-OMe 83 Phe-OEt ß-alanin-metil-észter 03 9,0 Phe-BAla-OMe 15 phe-OEt ß-alaninamid 03 9,0 phe-BAla-NHí 70 Phe-OEt ß-alaninamid 03 9,0 Phe-BAla-NH2 3 12. példa (ù-Aminosavakat tartalmazó dipeptid-észterek és ■amidok karboxipeptidâz Y katalizálta szintézise L- és D-aminosav-észter szubsztrátokból és $-alanin és $-alaninamid nukleofilkomponensekből, vízben 45 Enzim: 20 jimól/1 EDTA: 1 mm6I/l Szubsztrát: 50 mmól/1 13. példa 50 LJL- és DJj-dipeptidek karboxipeptidâz Y katalizálta szintézise L- és D-tirozin és L-fenilalanin-hidroxi-alkil-észter szubsztrátból és szabad L-metionin nukleofilkomponensből, víz-etilénglikol elegyben, pH 9,0 értéken 55 Enzim: 5 pmól/1 EDTA: 1 mmól/1 Szubsztrát: 50 mmól/1 Nukleofil: 03 mól/1 Szubsztrát Glikol (tf%) Termék Hozam (%) Tyr-OEtOH 0 Tyr-Met-OH 10 Tyr-OEtOH 40 Tyr-Met-OH 8 Tyr-OEtOH 60*' Tyr-Met-OH 5 tyr-OEtOH 0 tyr-Met-OH 56 Phe-OEtOH 0 Phe-Met-OH 16 *' enzim: 10 jimól/1, EDTA: 1 mmól/1 14. példa LX'-Dipeptidek árpából és búzából származó karboxipeptidázok katalizálta szintézis L-szubsztrát-észterekből ésL-aminosav vagy -amid nukleofilkomponensekből, vízben pH 8,0 értéken Szubsztrát kiindulási koncentrációja: 50 mmól/1 9
