203790. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dipeptidek előállítására enzimatikus úton
1 HU 203 790 B 2 Szubsztrát (50 mmól/1) Termék Hozam (%) fenilalanin-izopropil-észter Phe-Met-OH 23 szerin-izopropil-észterb) Ser-Met-OH 21 5 triptofán-metil-észter Trp-Met-OH 26 tirozin-benzil-észtei,!) Tyr-Met-OH 19 l) 5 mmól/1 b) reakcióidó>20 óra c) 30% DMSO 10 3. példa L,L-Dipeptidek karboxipeptidáz Y katalizálta szintézise szubsztrátkomponenskéntL-tirozinnal és nuklepfilkomponensként L-aminosavamidokkal 5 vagy észterekkel Enzim: 20 pmól/1, EDTA: 1 mmól/1 Szubsztrát Nukleofil Konc. (mól/1) Oldószer PH Termék Hozam (%) Tyr-OEt leucinamid 0,2 30% DMSO 9,5 Tyr-Leu-NH2*> 42 TVr-Leu-OH 4 Tyr-OEt lizinamid 0,3 víz 9,5 lyr-Lys-NHi 20 Tyr-Lys-OH 22 Tyr-OEt aigininamid 0,2 víz 9,0 Tyr-Aig NH2 50 Tyr-OEt valinamid 0,3 víz 9,0 Tyr-Val-NH2 77 Tyr-OEt leucin-metil-0,2 30% DMSO 9,0 Tyr-Leu-OH 6-észter *> reakcióid<5>20 óra, 50% szubsztrát alakul át 4. példa LX-Homodipeptidek karboxipeptidáz Y katalizálta szintézise egyetlen kiindulási vegyidéiből, vízben, pH 5,5 értéken Enzim: 10 pmól/1, EDTA: 1 mmól/1 _____________________________________________ 35 Szubsztrát Konc. Termék Hozam (mól/1) (%) metionin-metil-észter O^'X» Met-Met-OH 14 metionin-etil-észter 04 Met-Met-OH 16 40 metionin-izopropil-észter 04 Met-Met-OH 14 tirozin-metil-észter 0^ Tyr-Tyr-OHb) 1 tirozin-etil-észter 0,2 Tyr-Tyr-OHb) 1 fenilalanin-etil-észter 0^'X» Phe-Phe-OH 2 alaninamid 0,2e)c) Ala-Ala-NH2 (a) 45 polimerizáció b) kicsapódás c) pH 9,0 d) 30% DMSO 50 e> 50 pmól/1 CPD-Y, 1 mól/1 EDTA 5. példa üX-Dipeptidek karboxipeptidáz Y katalizálta szin- 55 tézise D-tirozin-etil-észter szubsztráttal, és szabad L-aminosav nukelofilkomponensekkel, vízben Enzim: 10 pmól/1, EDTA: 1 mmól/1 60 Nukleofil Konc. (mól/1) pH Termék Hozam (%) arginin 1 9,0 tyr-Arg-OH 75 cisztein 1 8,0 tyr-Cys-OH 86 LJD-cisztein 2 8,0 tyr-Cys-OH (DL) 45 leucin 0,2 8,0 tyr-Leu-OH 22 metionin 1 9,0 tyr-Met-OH 65 penicillamin 1*> 8,0 tyr-Pen-OH 27 *> reakcióidő>20 óra 6. példa DJL-Dipeptidek karboxipeptidáz Y katalizálta szintézise L-metionin nukleofilkomponenssel, vízben, pH 9,0 értéken Enzim: 15 pmól/1 EDTA: 1 mmól/1 L-metionin: 0,3 mól/1 D-szubsztrát (50 mmól/1) Termék Hozam (%) leucin-metil-észter leu-Met-OH 50 leucin-izopropil-észter leu-Met-OH 71 metionin-etil-iészter met-Met-OH 68 fenilalanin-etil-észter phe-Met-OH 71 fenilalanin-izopropil-észter phe-Mct-OH 72 szerin-izopropil-észter ser-Met-OH*’ 46 triptofán-etil-észter trp-Met-OH 72 *’ reakcióidé 5 nap 7
