203581. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás optikailag aktív 3-fenil-glicidilsav-észterek előállítására
HU 203581 B A találmány tárgya űj eljárás optikailag aktív (2R,3.S)-3-fenil-glicidi!sav-észterek előállítására. Az optikailag aktív (2R,3S)-3-fenil-glicidilsavészterek fontos köztitermékei a koszorúér-tágító és egyéb gyógyászati hatású készítmények hatóanyagául szolgáló ditiazem-hidrogén-kiorid szintetikus előállításának. A korábbiakban az optikailag aktív 3-fenil-gliei(hlsav észterek előállítására egy olyan eljárás volt ismeretes, amelyben metil-transz-3-(4- metoxi-fenil)-glicidátot hidrolizálnak a megfelelő karbonsavvá, és a karbonsavat optikai rezolválással alakítják optikailag aktív aminná, majd ezt észterezik (ezt az eljárást a 13 775/1985 és 13776/1985 számú vizsgálat nélkül közzétett japán szabadalmi leírásokban ismertetik). A fenti eljárás azonban azzal a hátránnyal jár, hogy számos lépést foglal magában, ennek ellenére a kívánt optikailag foglal magában, ennek ellenére a kívánt optikailag aktív metil-transz-3-(4-metoxirenil)-glicidát csak kis tisztaságú olajként nyerhető ki Intenzív vizsgálatokat folytattunk ennek a hátránynak a megszüntetésére, és egy olyan eljárást találtunk, amellyel a kívánt optikailag aktív 3-fenilglicidilsav-észterek azonnal a racém-3-fenil-glicidilsav-észterek kristályos formájaként állíthatók elő. Közelebbről, a találmány szerint egy (1) általános képiem 2R,3S- és 2S,3R-izomerek elegyét tartalmazó 3-fenil-glicidilsav-észtert - a képletben az A gyűrű 1-7 szénatomos alkoxicsoporttal egyszeresen helyettesített fenücsoport, és R jelentése 1-7 szenatomos alkilcsoport -a) egy olyan enzimmel reagál tatjuk, amely a racénv 3-fenil-glicidilsav-észter észterkötésének sztereoszelektív hidrolizálására képes, ezáltal a 2S,3R- izomert sztereoszelektíven hidrolizáljuk, majd b) ennek antipódjáí elkülönítjük és kigyűjtjük a reakcióelegyből. Az 1. ábrán a metü-(2R,3S)-3-(4-metoxi-fenil)gl icidát ÍR abszorpciós spektrumát mutat juk be, a 2, ábrán ugyanennek a vegyületnek az NMR spektruma szerepel, míg a 3. ábrán ugyancsak ennek a vegyületnek a tömegspektrumát mutatjuk be. A találmány szerint racém-3-fenü-glicidilsavészterként nemcsak a (2S. 3R) izomert és a (2R, 3S) izomert azonos mennyiségben tartalmazó elegyek használhatók, hanem bármely olyan elegy, amely ezeket az optikailag aktív izomereket tartalmazza. A találmány szerinti eljárásban enzimként előnyösen bidroíázokhoz tartozó lipázok vagy észterázok használhatók. Ezek az enzimek származhatnak mikroorganizmusból vagy állati vagy növényi sejtekből. Használhatunk olyan enzimeket, amelyeket ezeket a hidrolázokat tartalmazó mikroorganizmus sejtekből, állati sejtekből, vagy növényi sejtekből ismert módon extraháltunk, vagy használhatunk kereskedelmi forgalomban kapható készítményeket is. A találmány szerinti eljárásban használható enzimek példájaként említjük a következőket: alkálikus lipáz (Achromobacter eredetű, gyártója: Waki Junyaku), lipáz (Chromobacterium viscosum eredetű, gyártója: Toyo Jozo), lipáz B (Pseudomonas fragi 22-39B eredetű, gyártója: Wako Junyaku), lipáz ivi „Amain ” 10 (Mucor javanicus eredet, gyár1 tója: Ámano Seiyaku), KI típusú lipáz (Rhizopus arrhizus eredetű, gyártója: Sigrna, USA), talipáz (Rhizopus delemar eredetű, gyártója: Tanabe Seiyaku), lipáz NK-116 (Rhizopus japonicus eredetű, gyártója: Nagase Sangyo), lipáz N (Rhizopus niveus eredetű, gyártója: Amano Seiyaku), VII típusú lipáz (Candida cylindracea eredetű, gyártója: Sigma, USA), lipáz (sertés-pankreász eredetű, gyártója: Waku Junyaku), észteráz (sertés-máj eredetű, gyártója: Sigma, USA), koleszterin észteráz (Candida rugósa eredetű, gyártója: Nagase Sangyo), stb. A találmány szerinti eljárásban felhasználható az előbbi enzimeket termelő mikroorganizmusok fermentleve, a fenti fermentléből kigyűjtött mikroorganizmus sejtek, valamint a mikroorganizmus sejtekből nyert feldolgozott készítmény is enzimfonásként. A találmány szerinti eljárásban alkalmazható mikroorganizmusok azok, amelyek képesek az előzőekben említett hidrolázok termelésére, például olyan mikroorganizmusok, mint penészgombák, baktériumok, élesztők és aktinomiceták. A találmány szerinti eljáráshoz alkalmazható penészgombák között különösen az Absidia, Aspergillus, Fusarium, Gibberella, Mucor, Neurospora, Trichoderma vagy a Rhizopus nemzetséghez tartozókat, a baktériumok közül az Achromobacter, Alcaligenes, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Providencia, Pseudomonas vagy a Serratia nemzetséghez tartozókat, és az élesztők közül a Candida vagy Saccharomycopis nemzetséghez tartozókat, az aktinomiceták közül a Nocardia nemzetséghez tartozókat említjük meg. A fenti nemzetségekbe tartozó mikroorganizmusok példáiként hozzuk fe a következőket: Absidia corymifera IFO 4009 (NRRL 2982), EFO 4010, Aspergillus ochraceus EFO 4346, Aspergülus terreus IFO 6123 (ATCC 10020), Fusarium oxysporum EFO 5942 és ATCC 659, Fusarium solnai IFO 5232, Gibberella funikuroi IFO 5268, Mucor angulimacrosporus IÁM 6149, Mucor circinelloides EFO 6746 (ATCC 42258), Mucor flavus IÁM 6143, Mucor fragilis EFO 6449, Mucor genevensis IÁM 6091, Mucor globosus EFO 6745, Mucor hiemalis OUT 1045 és OUT 1047, Mucor janssenii OUT 4572 és IFO 5382, Mucor javanicus EF04569, EFO 4570, IFO 4572 és IFO 5382, Mucor lamprosporus EFO 6337, Mucor petrinsularis IFO 6751, Mucor plumbeus IÁM 6117, Mucor praini IÁM 6120, Mucor pusillus IÁM 6122, Mucor racemosus IFO 4581, Mucor ramannianus IÁM 6128, Mucor recurvus IÁM 6129, Mucor silvaticus IFO 6753, Mucor spinescens IÁM 6071, Mucor subtulissimus IFO 6338, Neurospora crassa IFO 6068 (ATCC 10336), Rhizopus arrhizus EFO 5780 (ATCC 11145), Rhizopus delemar ATCC 34612, Rhizopus japonicus EFO 4758, Trichoderma viride OUT 4208 és IFO 4847, Achromobacter cycloclastes IÁM 1013, Alcaligenes faecalis OUT 8030 (ACC 106), Baxiilus sphaericus IFO 3525 (ATCC 10208), Bacillus substilis OUT 8104 és OUT 8106, Brevibacterium ketoglutamicum ATCC 15588, Corynebacterium alkanolyticum ..ATCC 21511, Corynebacterium hydrocarboclastum ATCC 15592, Corynebacterium primorioxydans ATCC 31015, Providencia alcalifaciens JMC 1673 (ATCC 9886), Pseudomonas 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
