203563. lajstromszámú szabadalom • Eljárás opioid-polipeptidek és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203563B juk az 5. lépés cím szerinti vegyületét, olvadáspont: 130-135 °C (bomlás közben). VRK: R-értéke 0,61 (kifejlesztés metanol/kloroform 1:7 arányú elegyével). [a]D - 40,7° (c= 1, metanol) Elemanalízis a C75H102N14O16S2CI2.2CH3OH összegképlet alapján: számított: C: 55,89, H: 6,70, N: 11,85%, talált: C: 55,95, H: 6,42, N: 11,78%. 6. lépés: CfibTyr- Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-DAla-OH előállítása 200 mg 5. lépésben készült vegyület és 10 ml hidrogén-fluorid oldatát -5 'C hőmérsékleten 0,2 ml anizol jelenlétében, zárt, hidrogén-fluoridnak ellenálló edényben 1 órán át keverünk, majd a hidrogén-fluoridot a reakciórendszerből kidesztilláljuk. A maradékot éterrel mossuk, majd vízben oldjuk, és az oldatot Amberlit IRA-93 (ecetsav-típusú) ioncserélő gyantával való kezeié sután liofüizáljuk. Az így kapott 120 mg nyers peptidet magas nyomású folyadékkromatográfiával tisztítjuk (Nucleosü 5C 18,2 0 x 25 cm, az eluálást 0,05% sósavat tartalmazó 92:8 arányú víz-acetonitrü eleggyel végezzük). LiofÜizálás után a 6. lépés cím szerinti termékét 60 mg hozammal kapjuk. VRK: Rf-értéke 0,54 (kifejlesztés butanol/ecetsav/piridin/víz 15:5:5:8 arányú elegyével) [a]D -35,1' (c- 0,4,0,01 n sósav) Tömegszínképi jellemzője (FAB): 967 (/M+H/+) Az aminosav-elemzés eredményei: Gly 1,95(2); Leu 1,00(1); Phe 1,00(1); Arg 0,99(1); Alá 1,01(1). (A CH3Tyr-nak és CEUArg-nak megifelelő csúcsokat nem számítottuk ki.) 31. példa CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-CH3A la-OH előállítása 1. lépés: Z-CH3Arg(Tos)-CH3Ala-OBut előállítása 4,508 g Z-CH3Arg(Tos)OH, 1,683 g HCl.CH3Ala-Obut, 1,533 g N-hidroxi-benzotriazol és 1,04 ml N-metü-morfolin 10 ml dimetil-formamiddal készült oldatához jéghűtés közben 2,144 g diciklohexil-karbodiimidet adunk, s az oldatot éjszakán át hűtőszekrényben keverjük. Az így képződött csapadékot kiszűrjük, a szűrletet betöményítjük, a maradékot etü-acetátban oldjuk, és előbb vizes citromsavoldattal, utána vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, végül vízzel mossuk. A szerves oldatot szárazra párolva üvegszerű termék alakjában, 4,24 g hozammal kapjuk az 1. lépés cím szerinti vegyületét. VRK: Rf-értéke 0,61 (kifejlesztés metanol/kloroform 1:7 arányú elegyével) [ch]d -57,8° (c=l, metanol) Elemanalízis a C30H43N5O7S összegképlet alapján: számított: C: 58,33, H: 7,02, N: 11,33%, talált: C:58,11,H:6,88,N: 11,41%. 2. lépés: Z-Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)-CH3Ala-OBut előállítása 2,90 g CH3Arg(Tos)-CH3Ala-Obut (amelyet az 1. lépésben készült vegyület csontszenes palládium23 katalizátor jelenlétében végzett hidrogénezésével állítottunk elő), 3,329 g Z-Arg(Tos)OH és 1,166g N- hidroxi-benzotriazol 10 ml dimetil-formamiddal készült, jéggel hűtött oldatához 1,359 g diciklohexil-karbodiimidet adunk, az oldatot 2 napon át hűtőszekrényben keverjük, majd a csapadékot kiszűrjük, és a szűrletet betöményítjük. A maradékot szilikagél-oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluáláshoz metanol és kloroform 1:15 arányú elegyét használjuk. így 2,1 g hozammal, üvegszerű tennék alakjában kapjuk a 2. lépés cím szerinti vegyületét. VRK: Rf-értéke 0,46 (kifejlesztés metanol/kloroform 1:7 arányú elegyével) [a]D -57,1° (c= 1, metanol) Elemanalízis a C43H61N9O10S2.3/2 H2O összegképlet alapján: számított: C: 54,07, H: 6,75, N: 13,20%, talált: C: 54,10, H: 6,35, N: 13,18%. 3. lépés: Z-Leu-Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)-CH3Ala-OBut előállítása 247 g Z-Leu-OH 10 ml dimetil-formamiddal készült, -20 °C-ra hűtött oldatához 0,102 ml N-metümorfolin és 0,089 ml etü-(klór-formiát)-ot adunk, az elegyet 5 percig állni hagyjuk, s utána hozzáadjuk 700 mg HCl.H-Arg(Tos)-CH3Ala-OBut (amelyet a 2. lépésben készült vegyület csontszenes palládiumkatalizátor jelenlétében végzett hidrogénezésével állítottunk elő), 0,139 ml N-metü-morfolin és 10 ml dimetü-formamid oldatát, majd -5 °C körüli hőmérsékleten 2 órán át keverjük. A betöményítés után kapott maradékot etü-acetátban oldjuk, előbb vizes nátrium-hidogén-karbonát oldattal, majd vízzel mossuk, utána a szerves fázisból az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékhoz étert adunk. A dekán tálás után kapott maradékot szárazra pároljuk, és így üvegszerű termék alakjában, 0,86g hozammal jutunk a 3. lépés cím szerinti vegyületéhez. VRK- Rf-értéke 0,48 (kifejlesztés metanol/kloroform 1:7 arányú elegyével). [a]D -60,3 (c= 1, metanol) Elemanalízis a C49H72N10O11S2 . C2H5OC2H5 összegképlet alapján: számított: C: 57,07, H: 7,41, N: 12,55%, talált: C: 56,83, H: 7,0”, N: 12,64%. 4. lépés: Z- Phe-Leu-Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)-CH3Ala- OBut előáüítása 224 mg Z-Phe-OH 7 ml dimetü-formamiddal készült, -20 °C-ra hűtött oldatához 0,082 ml N-metümorfolint és 0,071 ml etü-(klór-formiát)-ot adunk, az oldatot 5 percig állni hagyjuk, s utána hozzáadjuk 640 mg HCl.H-Leu-Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)CBUAla-OBut (amelyet a 3. lépésben készült vegyület csontszenes palládium-katalizátor jelenlétében végzett hidrogénezésével áhítottunk elő) és 0,112 ml N-metü-morfolin 7 ml dimetü-formamiddal készült oldatát, s utána az elegyet -5 °C körüli hőmérsékleten 2 órán át keverjük. A betöményítés után kapott maradékot etü-acetátban oldjuk, vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd vízzel mossuk, a szerves fázisból az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékhoz étert adunk. A dekán tálás után kapott maradékot szárazra párolva 770 mg hozammal, üvegszerű termpék formájában kapjuk a 4. 24 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 13
