203563. lajstromszámú szabadalom • Eljárás opioid-polipeptidek és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203563B lépés cím szerinti vegyületét. VRK: Rf-értéke 0,54 (kifejlesztés metanol/kloroform 1:7 arányú elegyével). [a]D -59,6° (c= 1, metanol) Elemanalízis a C58H81N11O12S2 . C2H5OC2H5 összegképlet alapján: számított: C: 58,98, H: 7,26, N: 12,20%, talált: C: 58,68, H: 6,91, N: 12,24%. 5. lépes* Boc- CH3Tyr(Cl2Bzl)-Gly-Gly-Phe-Leu- 10 Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)-CH3Ala-OBut előállítása 350 mg Boc-CH3Tyr(Cl2Bzl)-Gly-Gly-OH 5 ml dimetil-formamiddal készült, -20 °C-ra hűtött oldatához 0,068 ml N-metü-morfolint és 0,059 ml etü-(klór-formiát)-ot adunk, az oldatot 5 percig áll- 15 ni hagyjuk, utána hozzáadjuk 610 mg HC1.H-Phe- Leu-Arg(Tos)-CH3Arg(Tos)-CH3Ala-OBut (amelyet a 4. lépésben készült vegyület csontszenes palládium-katalizátor jelenlétében végzett hidrogénezésével állítottunk elő), és 0,092 ml N-metü-morfolin 20 6 ml dimetil-formamiddal készült oldatát, s utána 5 °C körüli hőmérsékleten 2 órán át keverjük. A betöményítés után kapott maradékot etil-acetátban oldjuk, vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd vízzel mossuk, utána a szerves fázist betörné- 25 nyítjük, és a maradékot metanol és éter elegyével kezeljük. így 760 mg hozammal, szilárd alakban kapjuk az 5. lépés cím szerinti vegyületét, olvadáspont: 125-133 °C (bomlás közben). VRK: Rf-értéke 0,55 (kifejlesztés metanol/klo- 30 roform 1:7 arányú elegyével). [ce]D -56,4° (c= 1, metanol) Elemanalízis a C76H104N14O16S2CI2 I/2C2H5OC2H5 összegképlet alapján: számított: C: 57,06, H: 6,69, N: 11,94%, 35 talált: C: 56,71, H: 6,46, N: 11,49%. 6. lépés: CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-ArgCH3Arg-CH3A la-OH előállítása 210 mg 5. lépésben készült vegyületet 10 ml hid- 40 rogén-fluoridban oldva 0,2 ml anizol jelenlétében - 5 “C-ra hűtünk, zárt rendszerben, hidrogén-fluorid hatásának ellenálló edényben. Az oldatot 1 órán át keverjük, utána a reakciórendszerből a hidrogénfluoridot kidesztilláljuk, a maradékot éterrel mos- 45 25 suk és vízben oldjuk. Az oldatot Amberlit IRA-93 (ecetsav-típusú ioncserélő gyantával kezeljük, majd liofüizáljuk. így 130 mg nyers peptidet kapunk, amelyet magas nyomású folyadékkromatográfiával 5 tisztítunk (Nucleosü 5 C18,2 0 x 25 cm; az eluálást 0,05% sósavat tartalmazó, 91:9 arányú víz-acetonitril eleggyel végezzük). Liofüizálás után a 6. lépés cím szerinti termékét, azaz a 31. példa cím szerinti termékét 50 mg hozammal kapjuk. VRK: Rf-értéke 0,54 (kifejlesztés butanol/ecetsav/piridin/víz 15:5:5:8 arányú elegyével). [a]D -64,7° (c= 0,4,0,01 n sósav) Tömegszínképi jellemzője (FAB): 981 (/M+H/ ) Az aminosav-elemzés eredményei: Gly 1,92(2); Leu 1,0!(1); Phe 1,00(1); Arg 0,986(1). (A CH3Tyrnak, CH3Arg-nak és CH3Ala-nak megfelelő csúcsokat nem számítottuk ki.) 32-41. példák A 7. táblázatban bemutatott vegyületeket ugyanazzal a folyadék fázisú eljárással állítottuk elő, mint a 30. és 31. példákban leírt vegyületeket. E kísérletek során 1 -3 helyzetben (Tyr-Gly-Gly), 4-8 helyzetben (Phe-Leu-Arg-Arg He), 4-9 helyzetben (Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg) és 4-10 helyzetben (Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro) módosított dinorfin-származékokat állítottunk elő a lépésenként eljárás alkalmazásával, minden egyes peptid esetében a C-terminális oldaláról kiindulóan. Ezt követően az 1 -3 helyzetben módosított származékokat a 4-8, illetve 4-9, illetve 4-10 helyzetben módosított származékokkal kondenzáltuk diciklohexü-karbodiimid és hidroxi-benzotriazol alkalmazásával vagy a vegyes anhidrid módszerrel. Az összes védőcsoportokat eltávolítottuk hidrogén-fluoriddal, és az így kapott terméket magas nyomású folyadékkromatográfia segítségével tisztítottuk fordított vivőfázis alkalmazásával. A megfelelő, védett peptidek szintézise során követett reakciósorokat a 6-8. ábrák mutatják be. A 8. táblázatban foglaltuk össze az így ^állított peptidek optikai forgatóképességének [a] D-értékeit, a VRK-vizsgálat során kapott Rf-értékeket, valamint az aminosav-elemzés értékeit: 26 7. táblázat A példa A vegyület sorszáma 32. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Uu-Arg-CH3Arg-Ile-OH 33. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-Asp-OH 34. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-D-Leu-OH 35. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-D-Glu-OH 36. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-CH3lle-OH 37. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-Sar-OH 38. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-ß-Ala-OH 39. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-D-Leu-Asp-OH 40. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-D-Leu-Phe-OH 41. CH3Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-CH3Arg-D-Leu-Arg-D-Glu-OH 14
