203553. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás oxetanocin G előállítására
1 HU 203 553 B 2 A találmány tárgya új eljárás oxetanocin G előállítására. Az oxetanocin G a 0292917 számon közzétett európai szabadalmi bejelentésből ismert vegyület, amely többek között várhatólag antivirális szerek hatóanyagaként használható. A fenti leírásban ismertetik az oxetanocin G előállítását is. Az ismert eljárás szerint vagy mikrobiológiai átalakítást használnak az oxetanocin A oxetanocin X-szé alakítására, majd kémiai szintézissel állítják elő a 2-amino-oxetanocin A-t, vagy minden lépést kémiai szintézissel végeznek, egészen a 2-amino-oxetanocin A előállításáig, és végül enzimatikus átalakítás segítségével kapják az oxetanocin G-t. A fenti ismert eljárás hátránya azonban, hogy mikrobiológiai átalakítás esetén nagy mennyiségű mikrobasejt szükséges, a reakcióidő hosszú stb. Másrészről, a teljes kémiai szintézis hozama alacsony, így egy ilyen eljárás nem alkalmas ipari megvalósításra. A fenti problémák kiküszöbölésére kidolgoztunk egy tömegtermelésre is alkalmas új eljárást az oxetanocin G előállítására. A találmány tehát az oxetanocin G (továbbiakban OXT-G) ipari előállítására alkalmas új eljárásra vonatkozik. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy az (I) általános képletű alkoxi-2-amino-OXT-A-t vagy annak sóját - a képletben Rj jelentése 1 -6 szénatomos alkilcsoport - hidrogcnizálva eltávolítjuk az alkoxicsoportot, majd a kapott (ül) képletű 2-amino-OXT-A vagy sója 6-os helyzetben lévő 5 C-NH2 csoportját ismert módon ^C=G csoporttá alakítjuk. A találmány szerinti eljárásban az OXT-G szintézisére használt (II) általános képletű oxetanocin-származékok - a képletben Y jelentése (a), (b) vagy (c) képletű csoport, ahol Rj jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport - újak. Az (I) általános képletű alkoxi-2-amino-OXT-A hidrogenolízisét oldószerben, katalitikus redukcióval végezhetjük. Oldószerként bármely olyan oldószer megfelel, amely nem gátolja a reakciót; általában azonban poláros oldószert, például egy poláros szerves oldószert, vizet, vagy a poláros szerves oldószer vízzel alkotott elegyét használjuk. Poláros szerves oldószerként előnyösen rövidszénláncú alkoholokat, mint metanolt, etanolt, stb. használhatunk. A katalizátort tekintve, a katalitikus redukcióra használható bármely katalizátor alkalmazható, például platina-katalizátorok, palládium-katalizátorok, nikkel-katalizátorok, kobalt-katalizátorok, stb. Általában egy palládium-katalizátort, például szénhordozós palládium-katalizátort, stb. használunk. A reakciót általában hidrogén jelenlétében, kb 0 °C és kb. 150 °C közötti hőmérsékleten, atmoszferikus nyomás és kb. 1 X 105 - 2 x 106 Pa közötti nyomáson játszatjuk le. A reakcióidő a katalizátor fajtájától és a reakcióhőmérséklettől függően változhat, és nem határozható meg pontosan, általában azonban 1-10 óra elegendő a reakció lejátszódásához. A 2-amino-OXT-A sóinak előállítására a következő eljárást alkalmazhatjuk. A 2-amino-OXT-A-t vízben szuszpendáljuk, és a szuszpenzióhoz egy savat adunk a 2-amino-OXT-A oldására. Az oldathoz ezután megfelelő oldószert adva kristályosítjuk a sót. A sóképzésre bármely sav alkalmazható, amely gyógyászatilag elfogadható sót képez A sav előnyösen hidrogén-klorid, kénsav, foszforsav, stb. lehet. Az (I) és (II) általános képletű vegyületben R j jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport 1-^6 szénatomos csoport, előnyösen 1-4 szénatomos csoport, például metü-, etil-, propü- vagy butücsoport lehet. A 6-os helyzetben lévő ^ C-NH2 csoport ]>C=0 csoporttá alakítását vagy kémiai, vagy enzimatikus eljárással végezhetjük, általában azonban enzimatikus eljárást alkalmazunk. Enzimként például adenozindezaminázt, adenilsav-dezaminázt vagy egyéb hasonló enzimet használhatunk. Ezek az enzimek kereskedelmi forgalomban vannak, ilyen például az EC 3.5.4.4. adenozin-dezamináz (Sigma Co.), vagy az adenüsav-dezamináz, 5’-adenilsav-dezamináz (katalógusszáma A-1907, gyártja a Sigma Co.), vagy a DEAMIZYME® (gyártja az Amano Pharmaceutical Co., Ltd.), stb. Ezek az enzimek lehetnek tiszták, azonban mikroorganizmus-tenyészetek, vagy azok kezelt formái, vagy állati szövetekből nyert anyagok is használhatók, amennyiben tartalmazzák ezeket az enzimeket. A 2-amino-OXT-A OXT-G-vé alakítására a fenti enzimek segítségével, a 2-amino-OXT-A-t egy fenti enzimmel vizes oldószerben, például vízben, vagy víz és egy poláros oldószer (például egy rövidszénláncú alkohol vagy egyéb hasonló oldószer) elegyében reagál tatjuk, kb. 5 és 9 közötti, előnyösen kb. 6 és 8 közötti pH-értéken, kb. 10 °C - kb. 70 °C, előnyösen kb. 20-50 °C, még előnyösebben kb. 20-40 °C hőmérsékleten. Oldószerként előnyösen pufferoldatot használunk, a pH-stabilizálást előnyösen foszfát-puff er ol’ dattal végezzük. Általában kb 0,05-2,5 mól/1, előnyösen kb. 0,1-2,0 mól/1 koncentrációjú foszfát-puffért használunk (pH kb. 5 - kb. 8). Az enzim mennyiségét általában nehéz meghatározni, mivel az az enzim tisztaságától és egyéb tényezőktől függ, de általában előnyös, ha például az A- 1907 enzimet (adenilsav-dczamináz, gyártja a Sigma Co.) kb. 10000 - kb. 50000 egység/ml mennyiségben használjuk, 1 mól 2-amino-OXT-A-ra számítva. Az optimális mennyiség közelítőleg 20000-30000 egység. Az EC 3.5.4.4 (adenozin-dezamináz, gyártja a Sigma Co.) esetén előnyösen 2000-200000 egység enzimet használunk 1 mól 2-amino-OXT-A-ra vonatkoztatva. Az optimálisan alkalmazott mennyiség kb. 25 000-50 000 egység/ml. Ebben az esetben az enzimatikus eljárást az A-0291917 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett módon hajthatjuk végre. A terméket a reakcióelegyből szokásos módon izo5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
