203469. lajstromszámú szabadalom • Eljárás májelégtelenség kezelésére alkalmas dibenzociklooktadiént tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására
1 HU 203 469 B 2 Vegyület Dózis (mg/kg) Túlélési arány (%) Gomisin A 10 80 y-Schizandrin 50 60 Wuweizisu C 20 70 2. kísérlet Hatás a szérum GOT-ra (glutamin oxálecetsav transzamin áz) akut májelégtelenségben szenvedd patkányoknál Három csoport hím Wistar patkányt használtunk. Minden csoportban 45 patkány volt. Mindegyik csoport valamennyi patkánya P. acnes-t kapott injekcióban, 10 mg/patkány mennyiségben. Négy nappal ezután a 3. előállítási példa szerint előállított gomisin A 100 mg/kg és 50 mg/kg mennyiségeit 2 % Tween 80-at tartalmazó sóoldatban szuszpendáltunk és a három csoport közül kettőnek i.p. beadtuk. A harmadik csoport mint kontrollcsoport csak oldószert (2 % Tween 80/sóoldat) kapott i.p. Hét nappal a P. acnes injekció után valamennyi patkány 50 pg/patkány mennyiségben lipopoliszacharidot (LPS) kapott injekcióban. Az LPS injekció után 24 órával a túlélő patkányokból szívpunkcióval vérmintákat vettünk, és a szérum- GOT-aktivitásokat megmértük. A GOT egyike a májsejtekben található aminosav-transzferázoknak. A nagy szérum-GOT-aktivitás nagyszámú elhalt májsejtre utal. Az eredmények azt mutatják, hogy míg a kontrollcsoport túlélési aránya 8,8 % volt, addig a két, gomisin A-val (100 mg/kg és 50 mg/kg) kezelt csoport túlélési aránya 100 %, illetve 83,3 %. Míg a kontrollcsoportban a túlélő patkányok átlagos szérum-GOT-aktivitása 7000 NE (nemzetközi egység) volt, addig a 100 mg/kg mennyiségi gomisin A-val kezelt csoport szérum-GOT-aktivitása 140 NE-re csökkent. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az előállított gyógyszerek hatásosak májelégtelenségre. Az 1-5. előállítási példák szerint előállított vegyületek LD50-értékét ddY egerekben a 2. táblázat szemlélteti. Ugyancsak a 2. táblázat mutatja a találmány szerinti gyógyszerek számított klinikai dózisait májelégtelenségben szenvedő betegek részére. 2. táblázat A vegyületek LD^-értéke egereknek p.o. beadva és számított klinikai dózisok betegek részére Vegyület (mg/kg) Klinikai napi dózis (mg/kg) p.o. i.v. Dezoxischizandrin 2000 45-100 7,5-10 Gomizin N 2000 30-60 3-6 Schizandrin 1448 45-100 15-30 Gomizin A 777 15-30 5-10 y-Schizandrin 2000 45-100 2,5-5 Wuweizisu C 2000 30-60 2,5-5 A fenti hatóanyagokat tartalmazó gyógyszerek igen különböző formákban elkészíthetők, így lehetnek folyadékok, porok, granulált porok, pirulák, tabletták, bélben oldódó tabletták és kapszulák. A gyógyszerkészítmények a szokásos módokon előállíthatók, egy találmány szerint előállított vegyületet megfelelő oldószerekkel, kötőanyagokkal, adjuvánsokkal és hasonlókkal együtt alkalmazva. A fenti gyógyszerkészítmények előírás esetén keverve lehetnek más gyógyhatású komponensekkel. Orális beadásra a gyógyszerek lehetnek folyadék, por, granulált por, pirula, tabletta, bélben oldódó tabletta vagy kapszula alakjában és előírás szerint ezekhez legalább egy kötőanyagot, így keményítőt, laktózt, szacharózt, mannitot vagy karboximetil-cellulózt használunk. A fenti gyógyszereket elkészíthetjük síkosítószerek, így magnézium-sztearát, nátrium-laurát vagy talkum, kötőanyagok, így dextrin, kristályos cellulóz, polivinilpirrolidon, gumiarábikum, gabonakeményítő vagy zselatin, és a szétesést elősegítő szerek, így burgonyakeményítő vagy karboximetil-cellulóz alkalmazásával. A találmány szerinti vegyületek beadhatók szuszpenzió,? emulzió, szirup vagy elixir alakjában, amelyek egy vagy több íz-, és szagjavító anyagot és színezéket tartalmazhatnak. Injektálható gyógyszerkészítmények előállítása ese- '• tében hígítókat, így injekcióhoz alkalmas desztillált^ vizet, fiziológiás sóoldatot, dextrózoldatot, injektálható*? növényi olajat, propilénglikolt vagy polietilénglikolt * használhatunk. Szükség esetén vagy kívánt esetben a*? készítményekhez izotóniás szeretet, stabilizátorokat, ? antiszeptikumokat vagy fájdalomcsillapítókat is adha- * tunk. Az injekciós célra szolgáló gyógyszereket elő- “ nyösen sterilizált injekciós közegben oldjuk fel. Az (I) általános képletí vegyületek előállítását az ' alábbi kiviteli példákkal szemléltetjük. 1. példa Dezoxischizandrin előállítása A Schizandra chinensis Baill. 9,34 kg szárított porát 24 Éter petrol-éterrel 36 °C-on 6 órán át visszafolyatással forralva extraháljuk. Az extraktumot a maradék eltávolítása céljából megszűrjük. A maradékot a fenti módon még kétszer extraháljuk. A három extraktumot egyesítjük és csökkentett nyomáson bepárolva a petrolétert eltávolítjuk, így 1,15 kg száraz extraktumot kapunk. Az 1,15 kg száraz extraktumot kovasavgél-oszlopon (Kieselgel 60,70-230 mesh, Merck) kromatografáljuk, növekvő mennyiségben acetont tartalmazó benzollal kifejlesztve. A 92:8 arányú benzol-aceton keverékkel eluált frakciót (5 liter) bepárolva az oldószert eltávolítjuk, s így 129,8 g nyers dezoxischizandrin frakciót kapunk. A fenti nyers frakcióból 25,4 g száraz extraktumot preparatív vékonyréteg-kromatográfíának alávetünk (Kieselgel PF254 lemez, Merck) a kifejlszető oldószerkeverék benzol-éter (5:1). A kifejlesztés után a 254 nm ultraibolya fényben abszorpciót mutató zónát (Rj-0,71) kloro-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3