203370. lajstromszámú szabadalom • Eljárás főleg nátriuretikus és diuretikus hatású peptidek és az azokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203370B os polietilén-iminbe helyezzük. Szűrés után a szűrön megkötött radioligandum mennyiségét gamma - szcintillációs számlálóval mérjük. A nem specifikus kötés 0,5 pmól/liter ül atriopeptin (H-Ser-Ser-Cys- Phe-Gly-Gly-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln- Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr-OH) jelenlétében meghatározott kötés, a radioligandumnak a receptorokból történő teljes kiszorításához elegendő mennyiség. Adatok kiértékelése Az ICso-értékek a vizsgált anyagnak azt a koncentrációját jelentik, amely ahhoz szükséges, hogy a radioligandumok kötését 50%-ban gátolják. Az értékeket Chen (1976) J. Theor. Bioi. 59,253-276- ban közölt középhatás egyenlete szerint mért értékekből mikroszámítógép segítségével határoztuk meg. Kötési adatok (Atriopeptin III-kiszorítás) 7 Példa ICso (nm) Anyag IC50 (nm) Atriopeptin ül 8 0,49 7,40 9 1,40 7,40 10 0,05 3,40 11 0,07 8,30 12 0,06 8,30 13 0,79 3,50 14 1,10 8,60 15 2,40 8,50 17 3,20 5,40 21 1,40 3,50 22 0,48 5,40 A találmány szerinti eljárással előállított peptidek érfalemyesztő hatását in vitro módon 25 mM kálium-kloriddal összehúzott tengeri malac aortákon vizsgáltuk. A diuretikus és natriuretikus hatást in vivo módon i.v. adagolással narkotizált patkányokon bizonyítottuk. Összehasonlításra Atriopeptin ni-at alkalmaztunk. A találmány tárgya egyúttal eljárás az (I) általános képletű peptideket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. Ezeket a gyógyszerkészítményeket előnyösen humán gyógyászatban alkalmazzuk. A találmány szerinti eljárással előállított új peptidek önmagukban vagy kombinációkban diuretikus, szalidiuretikus, érfalemyesztő és immunmoduláló hatásúak, vagy alkalmazhatják krónikus és/vagy akut veseelégtelenségnél, valamint vese védelmére a vesére toxikus anyagokkal szemben, így például ciklosporinnal szemben, különösen alkalmazhatják vese átültetésnél 10-20 000 picomól/kg dózisban (25 ng-50 |ig/kg). A peptideket parenterálisan (i.v., s.c., i.m. vagy infúzióval) fiziológiailag elfogadható közegben adagoljuk. Parenterális alkalmazásnál az aktív vegyületeket ' vagy ezek fiziológiailag elfogadható sóit, kívánt esetben az ilyen célra szokásosan alkalmazott anyagokkal, így oldásközvetítőkkel, emulgeátorokkal vagy egyéb segédanyagokkal oldatként, szuszpenzióként vagy emulzióként alkalmazzuk. Az új hatásos vegyületek és ezek megfelelő fizikailag elfogadható sóinak oldószereként alkalmazhatunk vizet, fiziológiás konyhasó oldatot vagy alkoholt, így etanolt, popándiolt vagy glicerint, ezenkívül cukoroldatokat, így glükózt vagy mannitoldatot vagy különböző, az említett oldószerekből készített keverékeket. A hatóanyagokat alkalmazhatjuk implantátokkal, így például polilaktid, poliglikolid, tej- és glikolsav kopolimerizátum vagy poli-3-hidroxi-vajsav felhasználával illetve intranazális készítményként. Intranazális alkalmazásnál a rossz felszívódás miatt a dózist meg kell tízszerezni. Ezenkívül a peptideket alkalmazhatjuk fiziológiailag elfogadható vagy fémsókomplexként is. Az (I) általános képletű vegyületek alkalmazhatók glaukóma kezelésére és/vagy emlősöknél a szem belső nyomásának csökkentésére, különösen előnyösen a találmány szerinti eljárással kapott készítményt a humán gyógyászatban alkalmazzuk helyi vagy szisztémás adagolással. A találmány szerinti eljárással kapott vegyületeket szemgyógyászati alkalmazásnál célszerűen a szokásos módon előállított szokásos adagolási formává, így oldattá, kenőccsé, emulzióvá és depot készítménnyé alakítjuk. A hatóanyag adott esetben mikrokapszulázott formában is előfordulhat. A készítmények tartalmazhatnak szerves vagy szervetlen kísérőanyagokat, például szuszpendálószert, oldószert, antibakteriális anyagokat, nedvesítőanyagokat, konzerválószert. Előnyösek a helyi alkalmazásra szánt készítmények. Alkalmazhatjuk a parenterális készítményeket is. Szisztémás alkalmazásnál 25 ng- 5 fxg/kg dózist egy- háromszor adagolunk naponta. Helyi alkalmazásnál előnyösen oldatot, kenőcsöt vagy szemészeti inzerteket (’’solid inserts”) használunk. A helyi alkalmazásra szánt formák 0,001-5 tömeg% hatóanyagot tartalmaznak. Ennél magasabb vagy alacsonyabb dózist is alkalmazhatunk, feltéve, ha csökkentik a szem belső nyomását. Humán esetben szemkezelésre előnyösen 0,01 mg- 1 mg hatóanyagot alkalmazunk. Szemnél helyi alkalmazásra előnyösen az (I) általános képletű vegyületeket fiziológiailag elfogadható vivőanyagokkal, így vizes metil-cellulózzal adagoljuk. A készítményt előállíthatjuk szuszpenzióként, oldatként, kenőcsként, emulzióként. Előnyösek azok a készítmények, amelyek a hatóanyagnak a szembe hatolását megkönnyítik. Másik előnyös helyi alkalmazási forma az (I) általános képletű vegyületnek egyéb vegyületekkel, így például benzalkónium-kloriddal alkotott kombinációja, amelyben a hatóanyaghoz adagolt vegyület a hatóanyagnak szembe hatolását megkönnyíti. Glaukómás betegségek kezelésére alkalmazhatjuk az (I) általános képletű vegyületeket egyéb glaukóma elleni hatású vegyületekkel kombinálva. A helyi alkalmazásra szánt készítményekben a vivőanyagok lehetnek szerves vagy szervetlen vegyületek. Jellegzetes, gyógyászatban alkalmazott vivőanyagok a vizes oldatok, így például pufferrendszerek vagy vízzel alkotott izotóniás elegyek, és vízzel elegyedő oldószerek, így például alkoholok 8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
