203368. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hisztidin vagy di-, illetve tripeptidek N-heterociklusos alkoholszármazékai és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203368B csökkentett nyomáson besűrítjük, így 384 mg amin - dihidroklorid sót kapunk. A kapott aminsó 306 mg-ját (0,8 millimól) feloldjuk 6 ml száraz tetrahidrofuránban, és hozzáadunk 442 mg (0,8 millimól) N-{N-[(l,l-dimetiletoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-r-[(fenil-metoxi) -metil]-L-hisztidint, majd 122 mg (0,8 millimól) 1- hidroxi-benztriazol-hidrátot, és 160 mg (1,6 millimól) N-metil-morfolint. Az elegyet jeges vízfürdőn hűtjük, majd diciklohexil-karbodiimidet adunk hozzá, hidegen keverjük 15 percig, ezt követően bedugaszolva hűtőszekrényben tartjuk egy éjszakán át. Az oldatból kivált szilárd anyagot szűréssel nyerjük ki, miután az elegyet éterrel 45 ml térfogatúra hígítottuk, a szűrletet vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát fölött szárítjuk, és csökkentett nyomáson besűrítjük, így 587 mg viszkózus olaj marad vissza. Ezt a maradékot 3 g Baker szilikagélen előabszorbeáljuk, és 90 gLPS-1 szilikagélen pillanatkromatografáljuk kloroform, metanol és tömény ammónium-hidroxid oldat 30:2:0,05 arányú elegyével eluálva, így a terméket két frakcióban (333 mg szennyezett és 70 mg tiszta frakció) kapjuk. A szennyezett frakciót a fenti módon újra kromatografáljuk, így 206 mg terméket kapunk, amelyet egyesítünk a 70 mg-os frakcióval és a fenti módon újra kromatografáljuk, így 255 mg cím szerinti terméket kapunk üveges szilárd anyag formájában, amelynek olvadáspontja 74-77 °C (fokozatosan olvad); [a]D- -24,3° (c= 1, metanol). Vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, kloroform, metanol és tömény ammónium-hidroxid oldat 30:2:0,05 arányú elegyével futtatva Rf- 0,17. f) Na-{N-[( 1,1 -dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenilalanil}-N-{(lS)-2-ciklohexil-l-[(S)-hidroxi-lH-im idazol-2-il-metil]-etil}-L-hisztidinamid monoacetátsója 242 mg (0,28 millimól) e) lépés szerinti termék és 85 mg 20%-os szénhordozós palládium-hidroxid katalizátor 6 ml metanollal, 0,61 ml vízzel és 0,62 ml (0,62 millimól) 1 n sósavoldattal készített elegyét szobahőmérsékleten hidrogénatmosztérában (ballon) keverjük 60 órát. Az elegyhez további 100 mg katalizátort és 4 ml metanolt adunk és hidrogénatmoszférában keverjük 20 órát. Celite-en szűrjük, a szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk, így 200 mg üvegszerű szilárd maradékot kapunk. Ezt a maradékot 40 g LPS-1 szilikagélen pillanatkromatografáljuk kloroform, metanol, víz és ecetsav 90:20:2,5:1 arányú elegyével eluálva, így 120 mg üvegszerű szilárd anyagot kapunk, amelyet 3%-os ecetsavoldatból liofilizálva 120 mg amorf fehér szilárd anyagot nyerünk. Ezt a szilárd anyagot 16 g LPS-1 szilikagélen újra kromatografáljuk kloroform, metanol, víz és ecetsav 90:20:2,5:1 arányú elegyével eluálva, így 69,4 mg cím szerinti monoacetát sót kapunk, amelynek olvadáspontja 162 °C (fokozatosan olvad, 110 °C-on zsugorodik); [u]d= -36,5° (5 mg/ml, metanol). Vékonyréretkromatográfia: szilikagélen, n-butanol, piridin, ecetsav és víz 4:1:1:1 arányú elegyével futtatva Rf = 0,61. 7. példa N -{N -[(l,l-dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenil-17 alanil}-N-{(lS)-2-ciklohexil-l-[(R)-hidroxi-lH-i midazol-2-il-metil]-etil}-L-hisztidinamid monoacetátsója a) Na-{N-[( 1,1 -dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-N-{(1S)-1 -[(R)-hidroxi-( 1 -/(fenil-meto xi)-metil/-lH-imidazol-2-il)-metü]-2-ciklohexü-e til}-3’-[(fenil-metoxi)-metil]-L-hisztidinamid 476 mg (1,05 millimól) 6d) példa szerinti lassan mozgó izomer 25 ml etil-aceáttal készített oldatát argonatmoszférában jeges vizes fürdőn lehűtjük és gázhalmazállapotú hidrogén-kloriddal telítjük. A reakcióelegyet bedugaszolt lombikban hidegen tartjuk 1 óra hosszat, majd csökkentett nyomáson besűrítjük, így 467 mg amin-dihidroklorid sót kapunk. A kapott aminsó 374 mg-ját (0,84 millimól) továbbá 439 mg (0,84 millimól) N-{N-[(l,l-dimetiletoxi)-karbonil ]-L-fenil-alanil}-1 ’-[(fenü-metoxi) -metil]-L-hisztidint és 128 mg (0,84 millimól) 1- hidroxi-benztriazol-hidrátot feloldunk 6 ml dimetil-formamidban. Az elegyet argonatmoszférában jeges vizes fürdőn lehűtjük és 170 mg (1,68 mülimól N-metil-morfolinnal, majd 173 mg (0,84 millimól) dicildohexil-karbodiimiddel kezeljük. A reakcióelegyet bedugaszolt lombikban hűtőszekrényben tartjuk egy éjszakán át, majd szűrjük és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves oldatot vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, vízzel, majd konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnéziumszulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson besűrítjük, így 730 mg nyersterméket kapunk. A terméket 70 g LPS-1 szilikagélen pillanatkromatografáljuk, kloroform, metanol és tömény ammóniumhidroxid 30.20:0,05 arányú elegyével eluálva, így 271 mg cím szerinti amidot kapunk; [a]D= -8,7° (c- 1, metanol). Vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, kloroform, metanol és tömény ammónium-hidroxid 30:2:0,05 arányú elegyében futtatva Rf- 0,14. b) Na-{N-[(l,l-dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-N-{(lS)-2-ciklohexil-l-[(R)-hidroxi-l H-imidazol-2-il-metil]-etil}-L-hisztidinamid monoacetátsója Az 1) lépésben kapott termék 265 mg-ját (0,312 millimól) feloldjuk 11,6 ml metanolban és hozzáadunk 2,2 ml vizet, majd 0,66 ml 1 n vizes sósavoldatot és 100 mg 20%-os szénhordozós palládium-hidroxid katalizátort. Az elegyet hidrogénatmoszférában (ballon) keverjük 17 órát, majd szűrjük és csökkentett nyomáson besűrítjük, így 250 mg nyersterméket kapunk. A nyersterméket 35 mg LPS-1 szilikagélen pillanatkromatografáljuk kloroform, metanol, desztillált csapvíz és ecetsav 90:20:2,5:1 arányú elegyével eluálva, majd a terméket tartalmazó frakciókat liof ilizáljuk, így 186 mg anyagot kapunk. Ezt az anyagot újra kromatografáljuk 20 g LPS-1 szilikagélen, kétszer desztillált vizet alkalmazva, a 90:20:2,5:1 arányú oldószerrendszerrel eluálva, így 95 mg cím szerinti monoacetát sót kapunk, amelynek olvadáspontja 193-197 °C (200 °C-on bomlik); [ű]d= -19° (c= 0,5, metanol). A vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, kloroform, metanol, víz és ecetsav 90:20:2,5:1 arányú elegyével futtatva Rf- 0,07. 18 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
