203278. lajstromszámú szabadalom • Eljárás liposzóma készítmények előállítására
HU 203278B a liposzóma fázis transzformációja végbement (a gél folyadékkristályos szerkezetté alakul). A termikus felszabadulás kezdeti hőmérsékletét és a fázis átmeneti hőmérsékletet, amelyet a termikus felszabadulás görbéjéből állapítottunk meg, a 2. táblázatban foglaljuk össze. A fázis átmeneti hőmérsékleteket termikus analizáló rendszerrel mértük (Seiko I and E, SSC 5000 tip. 2 °C/perc). A két hőmérsékletérték szorosan összefügg. 2. táblázat A liposzóma membrán fázis átmeneti hőmérséklete (°C) és a 6-CF liposzómából való felszabadulásának kezdeti hőmérséklete (°C) 11 Liposzóma készítmény Fázis átmeneti hőmérséklet Felszabadulás kezdeti hőmérséklete 1.példa 42,3 36,1 ó.példa 43,7 39,3 lO.példa felületaktív 42,8 36,3 anyag nélkül 41,9 37,9 21. példa Az 1. példa szerint járunk el, csaka 6-CF helyett 500 pg cisplatint (CDDP) alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 23,5% CDDP-t tartalmaz, fázis átmeneti hőmérséklet 42,7 °C. CDDP-tartalom meghatározása liposzómában 0,1 ml liposzómát 5 ml fiziológiás sóoldatban szuszpendálunk, 2,5 ml így kapott szuszpenziót fagyasztva szárítunk, majd melegítjük, a kapott oldatot, amely a megbontott liposzómát tartalmazza Centrisalt-on szűrjük és 0,1 mlszűrlethez2ml0,l n NaOH-ot adunk, amely 10% dietil-ditio-karbamidot (DDTC) tartalmazott és a kapott keveréket szobahőmérsékleten 30 percig tartjuk. A kapott adduktumot 5 ml n-hexánnal extraháljuk és az extraktumot HPLC-vel analizáljuk (Zorbax CN, n-hexán/izopropil-alkohol- 8/2, UV« 250 nm) a CDDT tartalom meghatározására. A visszamaradó fiziológiás liposzóma oldatot (körülbelül 2,5 ml) Centrisalt-on szűrjük és a szabad, nem kötött CDDP mennyiségét a fentiek szerint meghatározzuk. 22. példa A 2. példában leírtak szerint járunk el, csak 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 21,4% CDDP-t tartalmaz. 23. példa A 3. példában leírtak szerint járunk el, csak 500 |xg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban a 6-CF helyett. A liposzóma 25,8% CDDP-t tartalmaz. 24. példa Az 5. példában leírtak szerin t járunk el, csak a 6- CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 24% CDDP-t tartalmaz. 25. példa A 6. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6- CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 21,8% CDDP-t tartalmaz, a fázis átmeneti hőmérséklet 43,9 °C. 26. példa A 7. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6- CF helyettt 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 21,9% CDDP-t tartalmaz. 27. példa A 8. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6- CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 24,9% CDDP-t tartalmaz. 28. példa A 10. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 jxg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 23,3% CDDP-t tartalmaz. 29. példa All. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 27,7% CDDP-t tartalmaz, a fázis átmeneti hőmérséklet 41,9%. 30. példa A 12. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 24% CDDP-t tartalmaz. 31. példa A 13. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 24,5% CDDP-t tartalmaz, a fázis átmeneti hőmérséklet 42,5 °C. 32. példa A 14. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 25% CDDP-t tartalmaz. 33. példa A 15. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 4,8% CDDP-t tartalmaz. 34. példa A16. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6- CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 5% CDDP-t tartalmaz. 35. példa A 17. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 5,2% CDDP-t tartalmaz. 36. példa A 18. példában leírtak szerint járunk el, csak a 6-CF helyett 500 pg CDDP-t alkalmazunk fiziológiás sóoldatban. A liposzóma 43% CDDP-t tartalmaz. 12 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
