203098. lajstromszámú szabadalom • Eljárás policiklusos kinolin-, naftiridin- és pirazino-piridin-származékok, valamint az ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
11 HU 203 098 B 12 ti-marha szérumalbumint (IgG frakció, Cappel Laboratories) steril desztillált vízben szuszpendáltuk és felhasználás előtt hideg, pirogén anyagoktól mentes sóoldattal (PFS) hígítottuk. Az an ti-marha szérumalbumin végső koncentrációja a pirogén anyagoktól mentes sóoldatban 0,5 mg/ml volt. Mind a marha szérumalbumin, mind az anti-marha szérumalbumin oldatait a használat során jegeltük. A gyógyszereket közvetlenül a felhasználás előtt vizes metil-cellulóz-oldatban homogenizátorral szuszpendáltuk vagy szolubilizáltunk. Az állatok csoportjainak (6/csoport) a marha szérumalbum innal végzett szenzibilizálás előtt 1 órával gyomorszondán át beadtuk a metil-cellulózban oldott gyógyszert. A kontrollok csak metil-cellulózt kaptak, és valamennyi kísérletben használtunk egy standard gyógyszert ellenőrzés céljából. A gyógyszereket úgy készítettük el, hogy a megfelelő dózist adják egy 200 g tömegű állatnál, ami ekvivalens a kísérlethez használt mg/kg dózissal. így mindegyik patkány körülbelül 2 ml térfogatú orális dózist kapott A dózis beadása után 1 órával az állatokat éterrel kissé narkotizáltuk, és 0,2 ml pirogén anyagoktól mentes sóoldatban 1,0 mg marha szérumalbumint az állatok péniszvénájába injekciózva azokat szenzibilizáltuk. Egy óra múlva az állatok egyik hátsó lábának talprészébe 0,1 ml pirogén anyagoktól mentes sóoldatban 0,1 mg anti-marha szérumalbumint injekcióztunk. Közvetlenül a szubplantáris injekció után az injekciózott hátsó lábat pletizmográf higany tartályába merítettük (a külső bokáig). A kiszorított higany térfogatát átszámoltuk tömegre és feljegyeztük. Ezt az értéket tekintettük az állat kontroll lábtérfogatának. A lábtérfogatokat pletizmográffal mértük a gyulladás kifejlődése alatt, 2-4 órával a kiváltó dózis beadása után is. A B., C. és D. vegyületek EDjo-értéke körülbelül 0,4, 0,1, illetve 0,4 mg/kg volt p. o. ebben az eljárásban. Egy másik eljárás akut gyulladás elleni hatásvizsgálatára méri a „Reversed passive Arthus” reakciót patkányok mellhártyaüregében, amint azt Myers és munkatársai ismertették [Inflammation, 9, (No.l), 91-98 (1985)]. A B. és C. vegyület EDjo-értéke körülbelül 0,4 mg/kg, illetve 0,1 mg/kg volt p. o. ebben az eljárásban. A találmány szerint előállított vegyületek gyomorfekélyek kezelésére is használhatók. A vegyületek kemoterápiás hatást mutatnak, ami lehetővé teszi, hogy a gyomorfekély megbetegedések és a stressz által előidézett fekélyesedés szimptómáit enyhítsék és a gyomorés/vagy nyombélfekélyek gyógyulását elősegítsék. A vegyületek alkalmazhatók továbbá mint kapcsolt terápiás szerek, más gyulladásgátló vagy fájdalomcsillapító szerekkel együtt beadva. Ilyen szerek például az aszpirin, indometacin, fenilbutazon, ibuprofen, naproxen, tolmetin és más szerek. A találmány szerint előállított vegyületek megakadályozzák, hogy ezek a szerek a gyomor-bél rendszerben izgató mellékhatásokat és kárt okozzanak. A találmány szerint előállított vegyületek fekély elleni hatását kísérletek igazolják. A találmány szerint előállított vegyületek fekély elleni hatásainak jellemzőit azzal az eljárással értékelhetjük ki, amely patkányokban méri a sejtvédő hatást, például Chiu és munkatársai eljárásával [Archives Internationales de Pharmacodynamie et de Therapie, 270,128-140 (1984)]. Az A vegyület 10 mg/kg dózisban 82%-ban gátolta az indometac innal előidézett gyomorfekélyeket. A gyomorfekélyes megbetegedések kezelésére és valamely droggal előidézett gyomorfekélyesedés megelőzésére és kezelésére a találmány szerint előállított vegyületek beadhatók a szokásos egységdózis formákban, ezek lehetnek tabletták, kapszulák, pirulák, porok, granulátumok, steril parenterális oldatok vagy szuszpenziók, kúpok, mechanikus úton, például bőrön át ható eszközök, és hasonlók. A találmány szerint előállított vegyttleteket beadhatjuk körülbelül 03-30 mg/kg, előnyösen körülbelül 2-15 mg/kg testtömeg napi dózisokban. A teljes napi dózist előnyösen 2-4 részre elosztva adjuk be. A találmány szerint előállított vegyületek magas vérnyomás kezelésére is alkalmazható, a magas vérnyomást csökkentő szerek. A vegyületek hatásosan csökkentik a vérnyomást spontán hipertenzív patkányokban (SHR), ami állati modellje az ember eredeti magas vérnyomásának, anélkül, hogy a normális vémyomású patkányok vérnyomását befolyásolná. Ezt a hatást az alább ismertetett eljárás igazolja. Hím, spontán magas vémyomású patkányokat vagy normális vémyomású Sprague-Dawley patkányokat használtunk. A vérnyomást a szokásos eljárásokkal mértünk, amint azt Baum T. Sybertz E. J., Watkins R. W. és munkatársaik részletesen ismertették [Antihypertensive activity of SCH 31846, a non-sulfhydryl angiotensin-concerting enzyme inhibitor, J. Cardiovas. Pharmacol. 5,655-667 (1983)]. Az állatokat legalább 1,5-2 órán át hagytuk egyensúlyba jönni a kísérlet megkezdése előtt. A kísérleti gyógyszereket orálisan adtuk be metil-cellulóz oldószerben, 2 ml/kg térfogatban, és a vérnyomást a dózis beadását követően 4 óránként ellenőriztük. A fenti A vegyület 10 és 30 mg/kg dózisai a vérnyomást jelentősen, -21 ± 4, illetve -4,6 kPa értékkel csökkentették (a ± az átlag standard hibát jelenti) spontán magas vémyomású patkányokban. Ezzel ellentétben az A. vegyület nem csökkentette a vérnyomást a normális vémyomású Sprague Dawley patkányoknál. A B. és C. vegyületek 30 mg/kg orális dózisai a vérnyomást -2,5, illetve -3,2 kPa értékkel csökkentették a spontán magasvérnyomású patkányoknál és csak elhanyagolható változásokat okoztak a normális vémyomású Sprague Dawley patkányok vérnyomásában. A találmány szerinti magas vérnyomás elleni eljárás dózistartománya körülbelül 3-100 mg/kg, előnyösen 10- 30 mg/kg napi dózis, kívánt esetben osztott dózisokban. A dózis számos faktortól függőm változhat, beleértve többek között a kezelendő hipertenzív megbetegedést, a beteget, az alkalmazott speciális vegyület hatását stb. Az (I) általános képletű vegyületek a szokásos módokon beadhatók, így orálisan, intravénásán stb., az ilyen célokra alkalmas bármilyen szokásos formában, így oldatok, kapszulák, tabletták, pirulák, porok, steril parenterális oldatok vagy szuszpenziók, bőrön át ható készítmények vagy hasonlók alakjában. Az (I) általános képletű vegyületek használhatók túlburjánzással járó bőrbetegségek, például pikkelysömör kezelésére emlősökben, például emberekben, amit az alábbiakban ismertetett, arachidonsavval végzett, egérfül-teszt szemléltet. Arachidonsavval végzett egérfül-teszt Anyagok és eljárások Hat hetes, nőstény Charles River CD (SD) BR egereket nyolcasával ketrecekbe helyeztünk, és az állatokat 1-3 hétig hagytuk akklimatizálódni felhasználásuk előtt. Arachidonsavat reagens tisztaságú acetonban felol5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
