203094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás benzotiazin-dioxid-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
5 HU 203 094 B 6 Parenterális bevitelhez az ilyen oxikám prodrugok szezámolajjal, mogyoróolajjal vagy vizes propilén-glikollal készített oldatai alkalmazhatók. A vizes oldatokat szükség esetén megfelelően (pH 8 fölé) pufferolni kell és a folyékony hígítót előzetesen izotóniássá kell tenni. Ezek a vizes oldatok megfelelnek az intravénás injekciós célokra. Az olajos oldatok intraartikuláris, intramuszkuláris és szubkután injekciós célokra alkalmazhatók. Ezenkívül az előbbiekben említett oxikám-oxi-etil- származékokat helyileg is lehet alkalmazni, a bőr vagy a szem gyulladásos betegségeinek kezelésére és ez előnyösen krémek, zselék, pépek, kenőcsök, oldatok stb. segítségével történhet, a standard gyógyászati gyakorlat szerint A találmány szerinti vegyületek gyulladásgátló aktivitását az előbbiekben említett standard karragenin-indukált patkány talp-ödéma tesztben határozzuk meg. Ebben a vizsgálatban a gyulladásgátló aktivitást úgy határozzuk meg, mint hím albino patkányok (tömegük 150- 190 g) hátsó lábában a karragenin talpalatti injektálása nyomán fellépő ödéma-képződés%-os gátlását A karragenint 0,05 ml 1 %-os vizes szuszpenzió alakjában injektáljuk, fél órával a gyógyszer orális bevitele után, amelyet általában vizes oldat alakjában adagolunk be. Az ödéma-képződést úgy határozzuk meg, hogy mérjük a patkány-talp térfogatát a kísérlet megkezdésekor, valamint 3 órával a karragenin-injekció beadása után. Az egyedi választ a karragenin-injekciót követő 3 óra elteltével mérhető térfogat-növekedés jelenti. A vegyületeket akkor tekintjük aktívnak, ha szignifikáns a különbség a gyógyszerrel kezelt állatok (6 patkány/csoport) és egy kontroli-csoport reakciója között, amely utóbbi csoportok csak vivőanyagot kapott, összehasonlítva azokkal az eredményekkel, amelyeket egy standard vegyület - pl. fenil-butazon - 33 mg/kg mennyiségben, orális beviteli út alkalmazásával történő beadásakor érünk el. 1 1. példa A. Egy 1000 ml-es, négynyakú, mechanikus keverővei és visszafolyató hűtővel felszerelt gömblombikba bemérünk 32,1 g (0,096 mól) 4-hidroxi-2-metil-N-(2- -piridinil)-2H-1 ,2-benzotiazin-3 -karboxamid-1,1 -dioxidot, 100 g (0,58 mól) 2-jód-etanolt és 26,5 g (0,192 mól) vízmentes kálium-karbonátot és az elegyet 600 ml acetonban szuszpendálva alaposan kevertetjük. A kapott reakcióelegyet ezután kb. 7 napon át visszafolyató hűtő alatt forraljuk, szobahőmérsékletre (kb. 20 *C) hűtjük és szűrjük. A szerves szűrletet ezután vákuumban betöményítjük az oldószer eltávolításával, a visszamaradó anyagot 400 ml etilacetáttal eldörzsöljük és 300 ml vízzel mossuk. A sárga kristályokat - kitermelés 2,6 g -, amelyek akkor képződnek, amikor vizet adunk a szerves szűrlethez, szívatással szűrjük. A maradékot egy éjjelen (kb. 16 órán át) szobahőmérsékleten állni hagyjuk; így 1,46 g kristály képződik. A kristályfrakciókat egyesítjük. Az N-[l-(2-hidroxi-etil)-2-piridinium]-2-metil-2H-1,2-benzotiazin-3-karboxamid-1,1- -dioxid-4-enolát (op.: 207-208 *Q összkitermelése 4,06 g (A. frakció). B. A kristályok fenti leírt módon való eltávolítása után visszamaradó anyagot 120 g szilikagélt tartalmazó oszlopon kromatografáljuk, eluálószerként etil-acetátot alkalmazva. Az azonos anyagot tartalmazó frakciókat dietil-éterből kristályosítjuk. 8,8 g tiszta 4-(2-hidroxi-etoxi)-2-metil-N-(2-piridinil)-2H-1,2-benzotiazin-3- -karboxamid-l,l-dioxidot kapunk (op.: 131-134 °C), halványsárga kristályok alakjában. Az anyalúgból további 1,4 g terméket nyerünk ki; így az össz-kitermelés 10,2 g (28%). A tiszta terméket a továbbiakban NMR- adatok, tömegspektroszkópia, nagynyomású folyadékkromatográfía (HPLC), valamint elem-analízis segítségével jellemezzük. Elemzési eredmények: a Ci7H17N3OsS képletre: számított: C 54,39 H4,56 N 11,19%; talált: C 54,51 H4,32 N 11,08%. C. A további frakciókból, amelyeket az előbbi kromatográfiás lépés során kaptunk, 700 mg tiszta N-[l-(2- -hidroxi-etil)-2-piridinium] -2-metil-2H-1,2-benzotiazin-3-karboxamid-1,1 -dioxid-4-enolátot nyerünk ki (op.: 218-220 *C), sárga kristályrác alakjában (B. frakció). Ezt az anyagot egyesítjük a kromatográfiás lépés előtt kapott kristályos termékkel (4,06 g A. frakció), így az A. és a B. frakció egyesített kitermelése 4,76 g. Az egyesített anyagot friss hexánnal dörzsöljük el; így végül 4,72 g (15%) tiszta N-[l-(2-hidroxi-etil)-2-piridinium]-2-metil-2H- l,2-benzotiazin-3-karboxamid-1,1 -dioxid-4-enolátot kapunk, (op.: 207-208 *C). A tiszta terméket a továbbiakban NMR-adatok és nagynyomású folyadékkromagotráfia (HPLC) segítségével jellemezzük. Az elemanalízishez úgy készítünk elő egy mintát, hogy a terméket dimetil-acetamid/metanol elegyből átkristályosítjuk. Elemzési eredmények: a C17H17H305S képletre számított: C 53,50 H4.48 N 11,01%; talált: C 53,81 H4.44 N 11,05%. (a szervetlen anyagrácra vonatkozó 1,63 %-os korrekció mellett). 2. példa Lényegében az 1. példában leírt eljárást követjük, de kiinduíási anyagként (a 3 591 584 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint előállított) 4-hidroxi-2-metil-N-(6-metil-2-piridinil)-2H-1,2-benzotiazin-3-karboxamid-l,l-dioxidot alkalmazunk, 4-hidroxi-2-metil-N-(2-piridinil)-2H-1,2-benzotiazin-3-karboxamid-l,l-dioxid helyett Azonos mólarányokat alkalmazunk. Ebben a konkrét esetben az egyetlen, ténylegesen elkülönített megfelelő végtermék a 4-(2-hidroxi-etoxi)-2-metil-N-(6-metil-2-piridinil)-2H-1,2-benzotiazin-3-karboxamid-l,l-dioxid (op.: 180-182 *C). A tiszta termék kitermelése az elméleti érték 75%-ának felel meg. Elemzési eredmények: a CigH19N3OsS képletre számított: C 55,52 H4.56 N 10,79%; talált: C 55,31 H4.82 N 10,68%. 3. példa Az 1B., IC. és a 2. példa végtermékeit a gyulladásgátló aktivitás meghatározására patkányokban vizsgáljuk, a standard patkány talp-ödéma teszt alkalmazásával, annak az általános eljárásnak a segítségével, amelyet C. A. Winter és munkatársai írt le, először a Proc. Soc. Exp. Biol. Med. Vol. 111. p. 544,1962 helyen. A vegyületeket orálisan adagoljuk (gyomorszonda alkalmazásával), 32 mg/kg mennyiségben. A kapott eredményeket-amelyeket az alábbiakban mutatunk be - az egyes vizsgálandó vegyületek által okozott ödéma-képződés-gátlás%-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
