203045. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyászatilag hatásos proteinek stabilizálására hidrogélekben
HU 203045B A találmány tárgyát helyileg alkalmazható hidrogclek új stabilizálási eljárása képezi, amelyek egy vagy több gyógyászatiig hatásos proteint, valamint szokásos adalékanyagokat tartalmaznak, és a készítményeket hidrofób anyag hozzáadásával stabilizáljuk. A gyógyászatiig hatásos proteinek helyi alkalmazásánál az egyik leglényegesebb követelmény ezek stabilizálása a gyógyszerkészítményekben. A stabilitást megfelelő hosszú időtartamon át biztosítani kell, mint a tárolás alatt hűtőszekrényben vagy szobahőmérsékleten, mind testhőmérsékleten, ezenkívül több órán át in situ. Tekintettel ezekre a követelményekre, tökéletesen kielégítő megoldást ezideig nem sikerült találni. Különböző anyagokat javasoltak már interferonok stabilizálására, amikor például hidroxi-etil-cellulózt használtak mint hordozóanyagot interferontartalmú gélek vagy kenőcsök előállítására. Ennél azonban a felhasználási körülmények között az interferonok hatáscsökkenése lépett fel, ami csak egy proteáz-inhibitor hozzáadásával volt csökkenthető (EP-A-142 345. számú európai szabadalmi bejelentés). Interferonok stabilizálására gélekben, kenőcsökben és hasonlókban javasoltak különböző cukoralkoholokat is, adott esetben cukorsavakkal vagy ezek sóival, enyhe redukálószerekkel, anionos tenzidekkel vagy ezen anyagok kombinációival együtt (EPA-80879. számú európai szabadalmi bejelentés). Proteinek és polipeptidek, így interferonok, elsősorban az IFN-gamma stabilizálására parenterális beadási formákban javasolták egy fizikailag és kémiailag módosított zselatin felhasználást, mindenekelőtt a humán szérumalbumin helyettesítése szempontjából (EP-A-162 332. számú európai szabadalmi bejelentés). A JP-A-61-277 633. számú nyilvánosságra hozott japán szabadalmi bejelentés interferonok stabilizálását ismerteti oldatban, bizonyos felületaktív anyagokkal. Az EP-A-135 171. számú európai szabadalmi bejelentésben olaj/víz mikroemulziókhoz a humán szérumalbumint javasolták megfelelő stabilizátorként. AzIFN-béta/9-(l,3-dihidroxi-2-propoxi-metil)guanin (DHPG) szinergetikus kombináció helyi alkalmazásához kenőcs alakjában az US-PS-4 606 917. számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerint stabilizátorokként albumint, dextrózt és pufferanyagokat javasoltak. A gyógyászatiig hatásos proteinek stabilizálására eddig javasolt anyagokkal stabilizáló hatást — elsősorban hidrogélekben — a szükséges mértékben nem tudtak elérni. A találmány feladata gyógyászatiig hatásos proteineknek helyileg alkalmazandó hidrogélekben, olyan stabilizátort rendelkezésre bocsátani, amely fiziológiás elviselhetősége mellett megfelel az összes követelményeknek, amelyeket az ilyen készítményektől elvárunk, mindenekelőtt a hatóanyag optimális felhasználhatóságát és aktivitásának meghatározását, valamint a lehetőség szerint kíméletes előállítási módot tekintve, amely a proteinek nyíróerők elleni érzékenységét számításba veszi. 1 Ebből a feladatból kiindulva az anyagok különböző osztályait vizsgáltuk meg, hogy mennyire alkalmasak ennek a feladatnak a megoldására. Meglepő módon azt találtuk, hogy hidrofób anyagok mint adalékanyagok a legfinomabb eloszlásban, elsősorban paraffinolajok, már igen kis mennyiségben stabilizáló hatást fejtenek ki a különböző, gyógyászatilag hatásos proteinekre, s ez a hatás az eddig javasolt anyagok hatását felülmúlja. Ez az eredmény annál meglepőbb, mivel a technika állásához tartozó, helyileg alkalmazható gyógyszerkészítmények, így a kenőcsök, amelyekben a hidrofób anyagok mint hordozók megfelelő nagy arányban vannak bekeverve, a stabilizátorok külön hozzáadását igénylik. A találmány a feladatot úgy oldja meg, hogy a helyi alkalmazásra szolgáló hidrogélekben, a gyógyászatilag hatásos proteinekstabilizálására fiziológiásán elviselhető hidrofób anyagokat, elsősorban paraffinolajokat használ. A stabilizáló mennyiségben alkalmazott, finomeloszlású formában lévő hidrofób anyagok hozzáadásával olyan gyógyszerkészítményeket kapunk, amelyek a felhasználási körülmények között a hatóanyagot hosszú időtartamon át aktív formában tartják. A találmány szerint előállított gyógyszerkészítményekben, 4-8 °C-on tárolva, a proteinek aktivitása legalább 12 hónap időtartamon át lényegüeg változatlan marad. A találmány egy további előnye az, hogy az ilyen készítményeknél kisebbek a követelmények a pH-érték pontos betartását illetően, mivel hidrofób anyagok stabilizáló hozzáadása a proteinek érzékenységét a pH- érték ingadozásai iránt csökkenti. Ez az előny mindenekelőtt akkor jön számításba, ha olyan alkalmazások vannak előirányozva, amelyek alacsonyabb pH-értéket igényelnek, példáula vagina területén történő alkalmazások. A találmány szerinti gyógyszerkészítmények — ha hidrogél formájában vannak jelen — még azt az előnyt is biztosítják, hogy alkalmazásuk igen kellemes. A hidrofób anyagok jelenléte által ugyanis a felhordott réteg a gél beszáradása után is megtartja simulékonyságát, ami mindenekelőtt az ajak területén kiváltképpen előnyös. A hidrofób anyagok előnyös stabilizáló hatása a proteinekre valószínűleg a hidrofób kölcsönhatásra vezethető vissza, amire eddig nem vagy túlságosan kis mértékben ügyeltek. A proteinek stabilizálásánál a technika állása szerint nyilvánvalóan a két következő funkciós elv alkalmazásából indultak ki: a) az anyag stabilizálása a proteinen komplex kötéssel, és ezáltal a proteinmolekula sztérikus rögzítése; b) a szabad víz (Bulkwasser) megkötése poláris anyagokkal, és így a protein stabilizálása hidrátburkának befolyásolásával. A jelen találmánynál valószínűleg számításba jövő hidrofób kölcsönhatások — ahogyan ezek a micelláris szerkezeteknél is fellépnek — ellenben feltehetően úgy fejtenek ki stabilizáló hatást, hogy a protein hidrofób részeit — amelyek a hidrofób és hidrofil amínosavcsoportok térbeli eloszlása alapján létrejönnek — az olaj/víz fázishatár-felületen fixálják úgy, hogy a hidrofób tartományok az olajcseppekbe, a hidrofil részek pedig a poláris fázisba kerülnek. A találmány tárgyát tehát a bevezetésben emlí-2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
