202927. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán monoklonális antitestek előállítására gram-negatív baktériumok szerotípusos lipopoliszacharid-determinánsai ellen
1 HU 202 927 B 2 homológ antitestek és szérum- komponensek, pl. komplementekkel való közvetlen kölcsönhatás elpusztítja. Ezekről a mechanizmusokról ismert, hogy kritikus fontosságúak az ilyen organizmusok kiküszöbölésében. Az olyan bakteriális szerkezetek, mint pl. a tokok, burkok és nyálkarétegek, amelyek leszűkítik vagy meggátolják a közvetlen „hozzáférhetőség”-et az LPS molekulákhoz, előre láthatóan csökkentik ennek a találmánynak a felhasználási lehetőségeit azoknál a baktériumoknál, amelyek ilyen szerkezetet tartalmaznak, például a tokkal rendelkező Klebsiella fajok és a burokkal rendelkező Escherichia coli. Anélkül, hogy a jelen találmány oltalmi körét korlátozni szándékoznánk, megnevezünk számos gramnegatív baktérium törzset és fajt, amelyek különösen érdekesek kóroktani szempontból súlyos emberi betegségek előidézésében. Ezek nagyjából a gram-negatív organizmusok három nagy családjában esnek, mégpedig az Enterobacteriaceae, Bacteroidaceae és a Pseudomonadaceae családokba. Az Enterobacteriaceae család képviselői pl. az Escherichia coli, a Klebsiella-fajok, mint pl. a K. pneumoniae, K. azaeanea és K. Phinoscleromatis; az Enterobacter-fajok, mint pl. az E. aerogenes, E. cloacea, E. hafniae és E. agglomarans; Serratia marcescens; Proteus-fajok, mint pl. P. vulgáris, P. mirabilis, P. rettgeri és P. morganii; Providencia stuartii; és Citrobacter-fajok (Sonnenwirth, fentebb idézett munkák, McCaba, fentebb idézett munkák, és Kreger és munkatársai, fentebb idézett munkák, ezek referenciaként épülnek be a találmányba). A Bacteroidaceae család képviselői pl. a Bacteroides-fajok, mint pl. a B. fragilis, és Fusobacterium-fajok (Sonnenwirth, fentebb idézett munka, ez referenciaként épül be a találmányba). A Pseudomonadaceae család képviselői pl. a P. aeruginosa, P. pseudomallei, P. mallei, P. fluorescens, P. putida, P. cepacia, P. strutzeri, P. maltophilia (lásd Gilardi, G.L.: Pseudomonas Species in Clinical Microbiology/ Pseudomonas-fajok a klinikai mikrobiológiában). Mt. Sinai. J. Med. (1976), 43, 710— 726, ez referenciaként épül be a találmányba. Más, hasonló organizmusok elleni védelmet is el lehet érni ezzel a találmánnyal. A fentebb felsorolt Pseudomonas fajok a jelen találmány előnyös alkalmazási területét képviselik, ezen belül a P. aeruginosa még előnyösebb alkalmazási területet képvisel. Ismeretes, hogy a gram-negatív baktériumok szóban forgó fajain belül immunológiailag megkülönböztethető törzsek vagy típusok sokasága található. Sok esetben a törzsek vagy típusok közti különbségek az LPS molekulák antigén-szerkezetében való változásokra vonatkoznak, különösen az LPS molekulák O-fajlagos oldalláncain belüli változásokra (lásd 1. ábra). így szerkezetileg különböző O-fajlagos oldalláncok különböző antigénszerkezeteket mutatnak. Az ilyen antigénváltozatok immunológiai felismerése az adott antigénvariánshoz fajlagos antitestek létrehozását eredményezi. Amikor ilyen antitesteket alkalmazunk szerológiai (azaz pl. agglutinációt, ELISA-t, stb. alkalmazó) megkülönböztetésre az egyik vagy másik antigén-variáns között, az így felismert antigén-variánsokat nevezzük szerotípusoknak és ezekről mondjuk, hogy szerotípusos determinánsokat mutatnak. így pl. a LPS molekulák O-fajlagos oldalláncai szerotípusos antigén determinánsokat jelentenek. Akik a szakterületen jártasak, méltányolni tudják, hogy mivel a jelen találmány humán monoklonális antitesteket szolgáltat az LPS molekulákon levő szerotípusos determinánsok ellen, ez olyan antitesteket szolgáltat, amelyek fajtaspecifikusak, ami azt jelenti, hogy egy fajtán belül egy bizonyos típusú LPS molekula ellen fajlagosak. A különböző szerotípusok megtárgyalásában rendszerezési sémákat lehet hasznosan alkalmazni. Az ilyen rendszerezési sémák illusztrálására alkalmasak a P. aeruginosa rendszerezési sémái. A Fisher féle rendszerezési szisztéma P. aeruginosához jól ismert, és részletesen le van írva a következő irodalmi helyen: Fisher és munkatársai: New Immunotype Scheme for Pseudomonas aeruginosa Based on Protective Antigens (Új, a védőhatású antigéneken alapuló immun-renszerezési séma Pseudomonas aeruginosához). J. Bacteriol. (1969), 98, 835-836; ezt az irodalmi helyet referenciaként beépítettük ebbe a találmányba. Ez a rendszer az ismert P. aeruginosa törzsek többségét hét csoportba osztályozza: Fisher-féle 1. immun-típus; Fisher-féle 2. immun-típus; Fisher féle 3. immun-típus; Fisher-féle 4. immun-típus; Fisher-féle 5. immun-típus; Fisher-féle 6. immun-típus; Fisher-féle 7. immun- típus. Hasonlóképpen az International Antigenic Typing Scheme (Nemzetközi antigén-rendszerezési séma) (IATS) szisztémája P. aeruginosához (lásd Brokopp, C.D. és Farmer, J.J., III: Typing Methods for Pseudomonas aeruginosa/ Rendszerezési módszerek Pseudomonas aeruginosához), Pseudomonas aeruginosa: Clinical Manifestations of Infection and Current Therapy, 89-133 oldal, szerkesztő: Daggert, R.G., kiadó: Academic Press (1979) 17 különböző szerotípust különböztet meg, amelyeket LATS 1. típusnak, IATS 2. típusnak, stb. neveznek. Mind a Fisher-féle (Hanessian, S. és munkatársai: Isolation and Characterization of Antigenic Components of a New Heptavalent Pseudomonas Vaccine/ Egy új, hét-értékű Pseudomonas vakcina antigén-komponenseinek izolálása és jellemzése), Nature, (1971), 229, 209-210, mind a IATS szerinti (Brokopp és munkatársai, fentebb idézett munka) rendszerezési szisztémánál mindkét szerotípusos sémára vonatkozó antigéndeterminánsokról kimutatták, hogy jelen vannak az LPS molekulán. A két renszerezési szisztéma összehasonlítását és összefüggéseit az 1. táblázat adja meg. I. táblázat A két P. aeruginosa rendszerezési szisztéma összehasonlítása. LATS (szerotípus) Fisher (immun-típus) 1 4 2 3,7 3 4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 4
