202912. lajstromszámú szabadalom • Eljárás baktériumok tenyésztésére alkalmas táptalajok előállítására vágóhidi hulladékanyagoknak, mint alapanyagoknak felhasználásával
1 HU 202 912 B 2 szívizom kivonat: 500 g, Bacto tripton: 10 g, NaCl: 1 g) és Brain Heart Infusion Broth-ból (katalógusszám B 37, összetétele: borjúagy infúzió: 200 g, szívizom kivonat 250 g, proteáz-pepton: 10 g, glükóz: 2 g, NaCl: 5 g, dinátrium-foszfát: 2,5 g) előírás szerint táptalajokat készítettünk az alábbiak szerint, amelyeket glükózzal és fenolvörössel egészítettünk ki: Bacto Heart Infusion Broth 2,5 g Glükóz 1,0 g Fenolvörös 1,0 ml Desztillált víz ad 100,0 ml keveréket készítünk. A pH-t 7,4 értékre állítjuk be. Az autoklávozást 15 percig, 121 °C-on végezzük. B) Azonos célra készült táptalajt az alábbiak szerint készítünk: Bacto Brain Heart Infusion 3,5 g Glükóz 1,0 g Fenolvörös (1%) 1,0 ml Desztillált víz ad 100,0 ml keveréket készítünk. A pH-t 7,4 értékre állítjuk be. Az autoklávozást 15 percig 121 “C-on végezzük. C) Azonos baktérium csoportok részére a találmányunk szerinti táptalaj anyagból három táptalajt állítunk eló: A szabadalom szerinti steril alaptápalaj (pH 7,4) 97,0 ml Glükóz (50%, steril) 2,0 ml Fenolvörös (1%, steril) 1,0 ml Mindhárom táptalajban különbőzé baktériumokat tenyésztünk úgy, hogy a táptalajokban baktérium tenyészetekből 10-es léptékű hígítást három ismétlésben készítünk (kb-1010), majd a beoltott táptalajokat 24 órán át 37 °C-on inkubáljuk, majd színváltozó egység alapján elbíráljuk a baktériumtörzseket. Törzsek Táptalajok és titerek BHIB BBHIB Találmány szerint Escherichia coli 1010 1010 1010 Salmonellal gallinarum 102 * * * * * 8 108 108 108 Staphylococcus aureus 109 109 108 108 Streptococcus agalactiae 10' 107 108 Sarcina lutea 10° Mindhárom táptalajban a baktérium törzsek azonos mértékeben szaporodnak. 2. példa A) Baktériumtörzsek részére alaptáptalajt készítünk gyárilag előállított MERCK Streptococcus Agalactiae Selektive Agar-ból (katalógusszám 8282, összetétele: Pepton: 10 g, húskivonat: 5 g, NaCl: 5 g eszkulin: 1 g, kristályibolya: 0,0013 g, talliumszulfát: 0,33 g, agar 13 g literenként): Merck Streptococcus Agalactiae Selective Agar 3,4 g Desztillált víz ad 92,0 ml A sterilizálást 15 percig 121 °C-on végezzük. 50 °C-ra való lehűtés után birka vörösvértestből 6,0 ml-t és Staphylococcus ß-toxinböl 2,0 ml-t keverünk be adalékanyagként. B) Azonos baktériumtörzsek részére a találmány szerinti táptalaj a következőképpen készül: A szabadalom szerinti steril alaptáptalaj (pH 7,4) 92,0 ml Oxoid agar No 2. 1,3 g A sterilizálást 15 percig 121 “C-on végezzük. 50 °C-ra való lehűtés után birka vörösvértestből 6,0 ml-t és Staphylococcus ß-toxinb01 2,0 ml-t keverünk be. A táptalajokat Petri-csészékbe öntjük ki. Mindkét táptalajon 3-3 ismétlésben Streptococcus agalactiae tenyészet 10-es léptékű hígításaiból (cc- 1010) 100-100 p. 1-t viszünk egy-egy lemezre. A lemezeket 48 óráig inkubáljuk 37 'C-on, majd lemezenként meghatározzuk a baktériumtelep számot. Az átlagos telepformáló egység Merck táptalajban 2,7-107, a találmány szerinti táptalajban 2,9* 107. 3. példa A) Gyárilag előállított Merc Clostridium Perfringens Selective Agárból (katalógusszám 10235, összetétel: pepton: 15 g, élesztő kivonat 10 g, vas (III)-. citrát: 0,5 g nátrium-szulfit: 0,5 g Polymixin B- szulfát: 0,01 g, nátrium-szulfadiazin: 0,11 g, agar. 13,9 g literenként előírás szerint táptalajt készítünk: Clostridium Perfringens Agár 4,0 g Desztillált víz ad 100,0 ml A keveréket feloldás után vékony csövekbe fejtjük, majd sterilizáljuk 40 percig 115 “C-on. B) Azonos baktériumtörzsek részére készített találmány szerinti táptalajt a következőképpen állítjuk össze: A szabadalom szerinti steril alaptáptalaj (pH 7,1) 95,0 ml Vas (Ill)-citrát 0,05 g Nátrium-szulfit 0,05 g Polymixin B-szulfát 0,001 g Nátrium-szulfadiazin 0,011 g Oxoid agar No 2. 1,4 g Feloldás után a táptalajt vékony csövekbe fejtjük, majd 15 percig 121 "C-on sterilizáljuk. Mindkét táptalajban Cl. perfringens törzs levestenyészetét 10-es léptékben hígítjuk (kb-1010) három ismétlésben, majd a beoltott táptalajokat 24 óráig inkubáljuk 37 “C-on, majd a csövekben megszámoljuk a baktérium telepeket. Merck-féle táptalajban a telepformáló egység 6,0« 107 volt, míg a találmány szerinti táptalajban 5,8*108 volt. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 3
