202558. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neuronotrófiás faktor kinyerésére és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmény előállítására
HU 202558B 15 16 2. táblázat BZT-érzékeny DABA-érzékeny Anyag 3H-DA felvétele 14C-GABA felvétele 15 perc alatt fmól/tál 15 perc alatt pmól/tál Albumin Albumin 29,51 ±5,78 0,56 ±0,14 +gmi Striatum 69,14 ±3,38 1,04 ±0,05 kivonat 104,68 ±7,60 2,41 ±0,27 Striatum kivonat +GMi 140,58 ±17,82 4,56 ±0,10 A középagyi sejteket (tálanként 1,10-t) szérummentes közegben tenyésztettük, amely 15 pg/cm3 albumint vagy 15 pg/cm3 striatum kivonatot tartalmazott, egymagában vagy 10"7 mól/1 GMi jelenlétében. A felvételeket aló. oldalon leírtak szerint a negyedik napon értékeltük. Az adatok háromanalízis középértékei és standard deviációi. Aszarvasmarha striatum kivonatokat a 14. oldalon leírtak szerint preparáltuk. Az emlősállati, előnyösen szarvasmarha agyvelő-szövetből származó SDNF hatóanyagot szokásos vivőanyagok és kívánt esetben gangliozidok és/vagy foszfolipidek kíséretében tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítása ismert módszerekkel történhet. Az SDNF hatóanyag kívánt mennyiségét valamely gyógyszerészeti elfogadható vivőanyaghoz adagoljuk és összekeverjük. Az alkalmas vivőanyagok és összeállításuk, beleértve más fehérjék alkalmazását is, például a Remington-féle gyógyszertani könyvben (Remington’s Pharmaceutical Scienves, Mack Publishing Co., Easton, Pa., USA 1985) megtalálhatók. Ide tartoznak az injekcióra alkalmas „üledékes készítmények" is. Ezen az alapon a gyógyszerészeti készítmények többnyire, de nem kizárólag SDNF oldatokat vagy az SDNF fagyasztva szárított porát tartalmazzák egy vagy több, gyógyszerészetileg elfogadott hordozó- vagy hígítóanyaggal kombinálva, olyan közegben, amely a megfelelő pH-ra van pufferolva és izoozmotikus a fiziológiai folyadékokkal. A készítmények lehetséges összetételeit, nem kizáró jelleggel, az alábbiakban az 1. példa illusztrálja majd. Ezek oldat formájában készülhetnek az idegrendszeri rendellenességek kezelésére. A fagyasztva szárított készítményekhez hordozó közeget, így - bár nem kizárólag - mannitolt vagy glicint, majd megfelelő térfogatú, alkalmas, pufferolt oldatokat alkalmazhatunk úgy, hogy kívánt pH- jú, megfelelően pufferolt, izotóniás oldatokat nyerjünk. Hasonló oldatokat használhatunk az SDNF molekula gyógyászati készítményeihez is, kívánt térfogatban és izotóniásan, így megfelelő koncentrációban foszfát vagy citrát pufferolt sóoldatait - de nem kizárólag ezeket -, olymódon, hogy az izotóniás gyógyászati készítmények mindenkor a kívánt pH-n, például semleges pH-n legyenek. Ugyancsak illusztrálásképpen, a 2. és 3. példa néhány lehetséges gyógyászati készítményt mutat be idegrendszeri rendellenességek kezelésére. Az ezekben a példákban szereplő gyógyászati készítmények úgy vannak kiszerelve, hogy egy dózishoz két ampulla szükséges. Az első ampulla az aktív anyagot olyan töménységben tartalmazza, hogy 5 0,01 és 50 tömeg% között legyen, olyan gyógyászatüag elfogadott hordozóanyaggal kiegészítve, mint pl. glicin vagy mannitol. A második ampulla kívánt térfogatú, foszfáttal vagy citráttal pufferolt sóoldatból készült oldószert tartalmaz. A két ampulla 10 tartalmát közvetlenül a beadás előtt keverjük össze, amikor is a fagyasztva szárított aktív anyag gyorsan feloldódik, és befecskendezhető oldatot ad. A 3. példa szubkután injekcióra alkalmas gyógyászati készítmények egy esetét is bemutatja (3B. példa). 15 Agyógyászatikészítményekmagukbanfoglalják- de nem kizárólagos joggal - a végbélkúpokat is, lipofü, mégis vízoldható, gliko-zselatint vagy mástípusú önemulgeáló hordozóanyaggal. Ezekben a készítményekben az SDNF jelenlevő mennyisége 20 0,001 és 1 tömeg% között változhat a teljes hordozóanyag mennyiségre vonatkoztatva. A végbélkúp - nem korlátozó érvénnyel - megfelelő mennyiségű acetü-szalicilátot is tartalmazhat. A 4. példa, csupán illusztrációképpen, felsorolt néhány lehetséges 25 végbélkúp készítményt idegrendszeri rendellenességek kezelésére. Ezen túlmenően az SDNF gyógyászati készítményei, mind fagyasztva szárított formában, mind oldatban, foszfolipideket vagy gangliozidokat is tar- 30 talmazhatnak, amint azt fentebb, a hatásos adagolásoknál tárgyaltuk. Az adagolás például (bár nem kizárólag) hasonló lehet, mint az embernél általában alkalmazott mennyiség az idegműködés helyreállítására van öregkori panaszok elleni kezelésre, de 35 függ a beadás módjától. Az SDNF gyógyászati készítményeinek adagolása és beadásának időzítése függ a megkívánt hatástól (amelyet klinikai kísérletekben határoznak meg) és a beadás módjától. Például az adagolás és a beadás időzítése hasonló lehet 40 (bár nem szükségképpen az) a többi neuronotrófiás faktor, így az NGF szokásosan használt alkalmazásához. 1. példa 45 Injekciós oldatként alkalmazható, gyógyászati készítmények 1. Készítmény: Egy-egy 2 cm3-es ampulla tartalma: Aktív anyag 5 p, (500 TU) 50 Nátrium-klorid 16 mg Citrát puffer, pH-7 2 cm3 pirogénmentes desztillált vízben 3 2. Készítmény: Egy-egy 2 cm -es ampulla tartalma: 55 Aktív anyag 100 p.g(10 000 TU) Nátrium-klorid 16 mg Citrát puffer, pH - 7 2 cm3 pirogénmentes desztillált vízben 60 TU - trófiás egység (definícióját 1. az 1. táblázat alatt). 2. példa 65 Gyógyászati készítmény rendszerek 9
