202557. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szialinsavval kapcsolt oktapeptid és ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 202557 B vegyületek hatásos gyógyszerei lehetnek a csecsemőmirigy csökkent vagy rendellenes működéséből eredő kórképeknek. A találmányt az alábbi, nem kizárólagos példákon keresztül mutatjuk be. 1. példa [(5-Acetamido-4,7,8,9-tetra-0-acetü-3,5-dide zoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozü át-metilészter)-oxiacetil]-Ala-Lys(4-Cl-Z)-Ser (Bzl)-GIy-Gln-GIy-Ser(Bzl)-Asn-ONbeIőállítása [(ül) általános képlet; 4-C1-Z - p-Cl-benziloxikarbonil-csoport, Bzl=benzil-csoport, ONb - p-nitrobenzil-csoport R « acetilcsoport, R’ - metilcsoport] 32 mg (58,24 pmól) (karboximetil-5-N-acetil- 3,5-didezoxi-4,7,8,9-tetra-0-acetil-alfa-D-glicer o-D-gaIakto-2-nonulopiranozilát)-metüésztert(II), 74 mg (58,24 pmól) Ala-Lys(4-Cl-Z)-Ser(Bzl)-Gln- Gly-Gly-Ser(Bzl)-Asn-ONb.HCl oktapeptidet, 13,4 mg (69,88 pjnól) WSC-t és 10,4 mg (58,24 pjnól) N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximidet (HONB) oldunk 1 ml vízmentes dimetilformamidban 6 mg (58,24 pmól) N-metil-morfolin hozzáadásával. Az elegyet 2 órán át jégfürdőben, majd további 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Az oldószert vákuumban ledesztüláljuk, a maradékot metilalkoholban szuszpendáljuk, a szilárd fázist szűréssel kinyerjük, metüalkohollal ismételten mossuk, majd vákuumban megszárítjuk. 25 mg poralakú terméket nyerünk: a kitermelés 23,6%. A termék fizikai jellemzői a következők: Olvadáspont: 195-200 °C. Rf-0,88 (szilikagél vékonyréteg; n-butanol:piridin:ecetsav,víz-30:20:6:24 futtatóelegy) IR (KBr, max, cm"1): 1740 (észter) JH-NMR (400 MHz, DMSO-dő, IMS): 1,68 (s, - NHCOCH3), 1,928,1,966, 2,003, 2,006 (mind s, - OCOCH3); 3,756 (s, -COOCH3); 4,481 (s, fenil- CH2-O-); 4,958, 5,218 (mind s, Cl-fenil-CH2-0-, N02-fenü-CH2-0-); 7,15-8,30 (m, fenil-H). 2. példa [(5-Acetamido-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D- galakto-2-nonulopiranozilát-metilészter)-oxiacetü]-Ala-Lys(4-Cl-Z)-Ser(Bzl)-Gln-Gly-Gly-Ser (Bzl)-Asn-ONb előállítása 30 mg (78,6 pmól) (karboximetil-5-N-acetil-3,5- didezoxi-alfa-D-gIicero-D-galakto-2-nonulopira nozilát)-metilésztert (II), 47,2 mg (37,2 pmól) Ala- Lys(4-Cl-Z)-Ser(Bzl)-Gln-Gly-Gly-Ser(Bzl)-Asn -ÓNb.HCl oktapeptidet, 9 mg (46,9 pmól) WSC-t és 9 mg (50,2 pmól) N-hidroxi-5-norbomén-2,3-dikarboximidet (HONB) oldunk 5 ml vízmentes dimetilformamidban, jégfürdőben, 3,8 mg (37,5 pmól) N-metü-morfoIin hozzáadásával. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 60 órán át, majd az oldószert vákuumban ledesztilláljuk. A maradékot 5 ml vízben felszuszpendáljuk, a szilárd fázist szűréssel kinyerjük, vízzel mossuk, majd vákuumban megszárítjuk. 38 mg fehér, poralakú terméket nyerünk' a kitermelés 74% az oktapeptidre számítva. A termék fizikai jellemzői a következők: Olvadáspont: 186-190 °C Rf -0,824 (szilikagél-vékonyréteg;n-butanol:pi-3 ridin:ecetsav:víz - 30:20:6:24 futtatóelegy) IR (KBr, max, cm" *): 1740 (észter) ^-NMR (400 MHz, DMSO-dó, TMS): 1,861 (s, -NHCOCH3); 3,714 (s, -COOCH3); 4,483 (s, fenil- CH2-O-); 4,986, 5,218 (mind s, Cl-fenü-CH2-0-, N02-fenü-CH2-0-); 7,21-7,45 (m, fenü-H). 3. példa [(5-Acetamido-4,7,8,9-tetra-0-acetil-3,5-dide zoxi-alfa-D-glicero-D-galakto-2-nonulopiranozil át-metiIészter]-oxiacetil)-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly- Gly-Ser-Asn előállítása 10 mg (5,67 pmól), az 1. példa szerint előállított vegyületet oldunk ecetsav és víz 2:1 arányú elegyének 3 ml-ében. Az oldathoz 30 mg palládium-katalizátort adunk és 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet megszűrjük, a szűrletet liofilizál juk, 5 mg színtelen amorf anyagot nyerünk: a kitermelés 68,9%. A termék fizikai jellemzői a következők: Bomláspont: 175 °C. Rf -0,24 (szilikagél vékonyréteg; n-butanol:piridin:ecetsav.Yíz - 30:20:6:24 futtatóelegy) ‘H-NMR (400 MHz, D2O, TSP): 1,966 (s, - NHCOCH3); 2,100, 2,142, 2,211, 2,245 (mind s, - OCOCH3); 3,893 (s, -COOCH3). Az NMR-analízis adataiból látható, hogy az összes benzil- és fenii-csoportból eredő elnyelési sáv eltűnt. 4. példa [(5-Acetamido-3,5-didezoxi-alfa-D-glicero-D- galakto-2-nonulopiranozilát-metilészter)-oxiacetil]-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn előállítása 22 mg (13,7 pmól), a 2. példa szerint előállított vegyületet oldunk ecetsav és víz 2:1 arányú elegyének 10 ml-ében. Az oldathoz 60 mg palládium-katalizátort adunk és 3 napon át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet kovaföld-rétegen megszűrjük, a szűrletet liofilizáljuk, majd vízben újra feloldva Sephadex G-25 oszlopon való kromatografálással megtisztítjuk és újra liofilizáljuk. 11,3 mg fehér, poralakú anyagot nyerünk: a kitermelés 87,6%. A termék fizikai jellemzői a következők: Bomláspont: 170 °C. Rf - 0,113 (szilikagél vékonyréteg; n-butanol:piridin:ecetsav:víz = 30:20:6:24 futtatóelegy) IR (KBr, max, cm'1): 1740 (észter) 1 H-NMR (500 MHz, D2O, terc-BuOH); 2,042 (s, -NHCOCH3); 3,868 (s, -COOCH3). Az NMR-analízis adataiból látható, hogy az összes benzil- és fenil-csoportból eredő elnyelési sáv eltűnt. 5. példa [(5-Acetamido-3,5-didetoxi-alfa-D-glicero-D- galakto-2-nonulopiranozilát-nátriumsó)-oxiacetil]-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Gly-Ser-Asn előállítása 20 mg (21,3 pmól), a 4. példa szerint előállított vegyületet oldunk 1 ml víz és 0,16 ml metilalkohol elegyében, majd hozzáadunk 86 pl 0,769 n nátriumhidroxidot és 2 napon át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet Sephadex G-25 oszlopon való kromatografálással tisztítjuk (oldószer: víz) és liofi-4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
