202493. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piperidin-származékok és a vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 202493B gyeltük az egereket, hogy mennyire mutatják a fájdalom jeleit vonaglással, kínlódással. Azt a vegyületet tekintjük szignifikáns analgetikus hatásúnak, amelynek beadása esetén a vizsgálat folyamán az egerek nem mutatják a fájdalom jeleit, így a vonaglást és kínlódást. Avegyületek narkotikus hatástól mentes voltát a következő vizsgálattal igazoltuk. Három egeret vizsgáltunk, amelyeknek a vizsgálandó vegyületet 800 mg/kg dózisban adtuk be, intraperitoneálisan. Harminc perccel később az egereket 55 *C-os forró lemezre helyeztük. Azt a vegyületet tekintjük narkotikus hatástól mentesnek, amelynek beadásakor az egerek a forró lemezre való helyezésük után 20 másodpercen belül felkapják a mancsukat a lemezről. Az analgetikus hatás kifejtéséhez szükséges hatóanyag mennyisége a konkrét vegyülettől, a beteg fájdalmának erősségétől, másik fennálló betegségtől, a beadás módjától és azon egyéb terápiás szerektől függ, amelyeket a beteg még szed. Általánosságban a vegyületek körülbelül 0,5 - körülbelül 100 mg/testtömegkg/nap dózisban mutatnak analgetikus hatást párénterálisan, míg orális beadás esetén ez a dózistartomány körülbelül 2 mg - körülbelül 200 mg/testtömegkg/nap. Mindezen farmakológiai tulajdonságok mellett az (I) általános képletű vegyületek szerotin-5HT2- antagonista hatással is rendelkeznek. Ezt a hatást az alábbi vizsgálattal bizonyítottuk. A vizsgálatban az 5HT2-receptorokra gyakorolt hatásuk tekintetében megvizsgáltuk a (3H)-spiroperidolt, amely ezen receptorokkal szemben nem mutat specifikus aktivitást, valamint a vizsgálandó vegyületeket. A (^-spiroperidol kötésében bekövetkező csökkenés jelzi a vizsgálandó vegyületnek az 5HT2-receptorral szembeni affinitását. Először egy 5HT2-receptor szuszpenziót készítettünk. Patkány agykéregszövetet homogenizáltunk 30 térfogatrész jéghideg 50 nM Tris Cl pufferben (pH - 7,7) egy politront használva (7-es helyzet, 10 másodpercig). Á homogenizátumot 40 000 g-vel 10 percig centrifugáltuk, 4 °C hőmérsékleten. A pelletet 30 térfogatrész jéghideg pufferben újraszuszpendáltuk egy Dounce homogenizátor segítségével és az előzőek szerint centrifugáltuk. Végül a pelletet 30 térfogat puff erben újraszuszpendáltuk. Az inkubációs edényekbe elhelyeztünk 0,2 ml receptor szuszpenziót, 100 pj 0,1 nM-os (^-spiroperidol oldatot és a vizsgálandó vegyület 100 pj oldatát (melynek koncentrációja a 10 -10'10 mól/1 tartományban van) és a végtérfogatot 1,0 ml-re állítottuk be puffer hozzáadásával. Az edényeket ezután 37 "C-on 15 percig inkubáltuk. Az inkubációt 5 ml jéghideg puffer hozzáadásával leállítottuk, majd a lehűtött szuszpenziót vákuumban, üvegszálas szűrőn leszűrtük A szűrőket kétszer 5 ml hideg pufferrel mostuk, majd a szűrőket szcintülációs ampullába helyeztük Ezeket ezután analizáltuk folyadékszcintillációs spektrometriával 8,0 ml Omnifluor-ban, amely 5% Protosol-t tartalmazott. A (3H)-spiroperidol specifikus kötéseit a lOpM methiothepin esetében mért üres helyekkel szembeni többletkötésekkel mérjük. Egy vizsgálandó ve-9 gyületnek akkor van affinitása az 5HT2-receptorhoz, ha a (3H)-spiroperidol helyébe legalább 15%ban beköt. A találmány szerinti vegyületek 5HT2-receptor antagonista hatását in vivo a következő kísérlettel demonstráltuk Legalább 5 egérnek beadtuk a vizsgálandó vegyületet 0,1 mg/kg - 200 mg/kg mennyiségben. Körülbelül 30 perccel később az állatoknak 30 mg/kg 5-metoxi-N,N-dimetü-triptamint (DMT) adtunk be intraperitoneálisan. Hat perccel a DMT beadása után megszámoltuk minden állatnál a fejrángások számát. A fejrángás hiánya jelezte a vizsgálandó vegyület in vivo 5HT2-receptor antagonista hatását. Az a dózistartomány, amelynél a vegyületek képesek blokkolni az 5HT2-receptoroknál a szerotonin hatását, a szóban forgó konkrét vegyülettől, a betegségtől, a beteg állapotától, egyéb meglevő betegségektől, valamint az egyéb beszedett gyógyszerektől függhet. Általánosságban a vegyületek szerotonin-5HT2-antagonista hatásukat körülbelül 0,2 mg/testtömegkg/nap - körülbelül 100 mg/testtömegkg/nap dózistartományban fejtik ki. A vegyületek szerotonin-5HT2-antagonista hatásuk következtében többféle betegség kezelésére alkalmasak. így az (I) általános képletű vegyületek jól használhatók szorongás, variant angina, anorexia nervosa, Raynaud féle jelenség, claudicatio intermittens és szívkoszorúér - vagy perifériás érszűkület esetén. Ezek az állapotok és betegségek enyhíthetők, ha a kezelendő betegnek valamely (I) általános képletű vegyületet a betegség vagy állapot kezelésére elegendő mennyiségben (azaz, anxiolitikus mennyiségben, anti-anginális mennyiségben, anti-anorexiás mennyiségben stb.) beadtunk. Ez a mennyiség azon dózistartományon belül változhat, amelynél a vegyületek kifejtik szerotonin-5HT2-antagonista tulajdonságaikat. A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók thrombolitikus megbetegedések kezelésében is. Amint az a szakember számára nyüvánvaló, sokféle körülmény okozhatja a vérlemezkék kezdeti aggregációját. Ä vérlemezkék kezdődő aggregációja szcrotonin felszabadulást eredményez, amely további vérlemezke aggregációt okoz. Ez az újabb aggregáció szintén újabb szerotonin felszabadulást von maga után, így kialakul egy körforgás, amelyben az immár vérröggé nőtt aggregátum tovább nő, s ez elzárhatja a véráramlást. A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek képesek megelőzni a vérlemezkék azon újabb aggregációját, amely a szerotonin felszabadulás következtében jön létre. így a vegyületek preventive beadhatók anti-thrombotikus mennyiségben, a véráramlást megakadályozó thrombus kialakulását megelőzendő. Ez a beadott antithromotikus mennyiség azon a dózistartományon belül van, ahol ezek a vegyületek kifejtik szerotonin-5HT2-antagonista hatásukat. A vegyületek jó alkalmazhatók atheroszlderosis és szívkoszorúér betegségek esetében, - amelyek mellkas fájdalmakkal és egyéb szokásos szimptomákkal jellemezhető átmeneti iszkémiás rohamokban nyüvánul meg, valamint olyan betegeknél, akik sztreptokináz vagy szövet plazminogén aktivátor szedése következté10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
