202390. lajstromszámú szabadalom • Füstölő cigaretta utánzat
1 HU 202390 B 2 hosszúságát azonban 5 mm-re növeltük, és a szubsztrátumon át 1,02 mm átmérőjű 32 tengelymenti járatot készítettünk. Ezek a cigarettautánzatok nem tartalmaztak cellulóz-acetát/polipropilén csövet. A szubsztrátumot 42 mg propilénglikol-glicerin-keverékkel töltöttük fel; továbbá két, Burley 28 dohányból álló tömböt alkalmaztunk, amelyek tömege egyenként 150 mg volt. Az első 28 dohány a 30 szubsztrátum száj felőli végén, a második 28 dohányt a 34 szűrő előtt helyeztük el. C) Négy toávbbi cigarettautánzatot szerkesztettünk lényegében a 3A. példa szerint, azzal az eltéréssel, hogy a Burley 28 dohányból álló tömb helyett 100 mg tömegű, hővel fermentált, 6 tömeg% diammónium-monohidrogén-foszfátot tartalmazó 28 dohányt alkalmaztunk. D) A 3A-3C. példákban leírt fütölő cigarettautánzatokat az Ames- féle vizsgálati módszerrel vizsgáltuk [lásd: Ames és munkatársai: Mut. Res. 31, 347 (1975); módosították Nagas és munkatársai: Mut. Res. 42, 335 (1977); és ugyanott 113, 173 (1983)]. A 3A. és 3C. példák szerint készült cigarettautánzatok egy szokásos cigarettázó berendezésben füstöltettük 35 ml szippantási térfogattal, 2 másodperces szippantási időtartammal és 30 másodperces szippantási frekvenciával, összesen 10 szippantásig. A 3B. példában leírt cigarettautánzatot ugyanilyen módon füstöltettük, azzal az eltéréssel, hogy 60 másodperces szippantási frekvenciát alkalmaztunk. A cigarettautánzatok minden egyes csoportjában csak egy szűrőblokkot alkalmaztunk. Ennek eredményeként a cigarettautánzatok csoportjaiban a következő összes tömegű nedves szemcsékből álló anyagot kaptuk („WTPM-érték”): 3A. példa 63,4 mg 3B. példa 50,6 mg 3C. példa 69,2 mg A fenti példák mindegyikének esetében az öszszegyűjtött, szemcsés anyagot tartalmazó szűrőblokkot 30 percig dimetil-szulfoxidban rázattak a szemcsés anyag kioldása végett. A mintát ezután 1 mg/ml koncentrációra hígítottuk, és ebben az állapotában használtuk fel az Ames-féle vizsgálathoz Nagas és munkatársai eljárása szerint [Mut. Res. 42, 335 (1977)]: az 1 mg/ml koncentrációban vett szemcsés anyagot a fenti irodalmi helyen ismertetett módon előállított S-9 aktiváló rendszerre! kevertük, és a standard Ames-féle baktériumsejteket hozzáadtuk, majd 37 'C hőmérsékleten 20 percig inkubáltuk. E vizsgálat során a Salmonella typhimurium TA 98 baktériumtörzset alkalmaztuk [Purchase és munkatársai: Nature 264, 624 (1976)]. Ezután az elegyhez agar-agart adtunk, és lemezeket készítettünk. Az agaragar lemezeket 2 napig 37 °C-on inkubáltuk, és az így kapott tenyészeteket számlálásnak vetettük alá. Minden egyes hígításra négy lemezt használtunk, és a baktériumtelepek standard deviációt tiszta dimetilszulfoxiddal készült kontrolltenyészettel hasolítottuk össze. Amint a III. táblázat mutatja, a „WTPM”termék (az összes, nedves szemcsés anyag) egyik füstölő cigarettautánzat esetében sem mutatott mutagén hatást. Ezt alátámasztottuk azzal, hogy összehasonlítottuk a revertánsok lemezkénti átlagos számát a kontroliból [0 pg WTPM/lemez) kapott revertánsok átlagos számával. Mutagén hatású minták estében a revertánsok lemezenkénti átlagos száma a dózis emelésének függvényében növekszik. III. táblázat 3A. példa Dózis (WTPMRevertánsok-összes, nedves átlagos S.D.* szemcsékből álló száma anyag lemezenként lemezenként Kontroll 0 49,3 3,4 33 51,3 9,1 66 50,5 7,0 99 50,8 5,2 132 51,5 5,3 165 53,8 10,1 198 48,3 4,6 3B. példa Dózis (WTPMRevertánsok-összes, nedves átlagos S.D.* szemcsékből álló száma anyag lemezenként lemezenként Kontroll 0 56 10,5 31,5 40 7,8 63 48,3 6,3 94,5 54,0 8,4 126 39 4,7 157,5 42,5 9,3 189 43 9,1 ♦Standard deviáció 3C. példa Dózis (WTPM= Revertánsok -összes, nedves átlagos S.D.* szemcsékből álló száma anyag lemezenként lemezenként Kontroll 0 48,3 5,7 36 50,3 9,9 72 49,0 3,9 108 55,3 4,5 144 43,0 6,4 180 42,3 8,8 216 44,3 7,8 ♦Standard deviáció 4. példa A 2. ábrán bemutatott módon öt füstölő cigarettautánzatot szerkesztettünk. Minden egyes cigarettautánzat a 3A. példában leírt, 10 mm hosszúságú, préselt szénből álló 10 üzemanyagegységet tartalmaz-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
