202284. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új azoxiszármazékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 202284 B 2 A találmány tárgya eljárás új azoxiszármazékok és az ezeket hatóanyagként tartalmazó, gombafertőzések kezelésére alkalmas gyógyászati készítmények előállítására. Az utóbbi években a különböző okok által előidézett felszíni és mély gombafertőzések világszerte elterjedtek. A gomba fertőzések kezelésére alkalmas ismert kemoterápiás szerek száma nem kevés, de csak négy olyan gyógyszer van, amely szisztémásán alkalmazható, nevezetesen: a griseofulvin (7-klór- 2’,4,6- trimetoxi-6’-metil-spiro[benzofuran-2(3H),r[2]ciklohexén]-3,4’-dion) egy felszíni gombafertőzés a trichophytosis kezelésére, a flucytosine (4-amino- 5-fluor-2(lH)-pirimidinon), az amphotericin B (egy 38 tagú polién antibiotikum) és a miconazole (l-[2- (2,4-diklór-fenil)-2-((2,4-diklór-fenil) -metoxi)-etil]lH-imidazol) a mély-gombafertőzések kezelésére. Mivel ezek a szisztémás szerek erős mellékhatásokkal rendelkeznek, felhasználhatóságuk korlátozott, így szükség van új, jobb, szisztémás hatású gombaellenes szerek kifejlesztésére. Az eumicétákra erősebb fungicid hatást kifejtő új gombaellenes szerek kifejlesztésének érdekében olyan anyagokat vizsgáltunk, amelyeket talajból izolált mikroorganizmusok termelnek. Vizsgálataink során azt találtuk, hogy a talajból izolált (Japán, Shimane Prefecture), a Streptomyces nemzetségbe tartozó KC- 7367 jelű törzs olyan gombaellenes anyagokat termel, amelyek eumicétákra erős fungicid hatással bírnak. Ezeket a hatóanyagokat a mikroorganizmus törzs tenyészközegéből sikerült elkülöníteni. A fenti törzs tenyésztésével nyert anyagok azoxiszármazékok, amelyek a (I) általános képlettel jellemezhetők. A képletben X jelentése -C- vagy -QH- csoport Ö OH (Krabonil- vagy hidroxi-metilén-csoport). Az (I) általános képletű azoxiszármazékok a Streptomyces nemzetségbe tartozó (KC-7367 jelű FERM BP-1277 számon letétbe helyezett törzs tenyésztésével állíthatók elő, oly módon, hogy a törzset tenyésztjük, majd a vegyületeket a tenyészközegből elkülönítjük. Az így előállított vegyületek újak minthogy fizikai, kémiai és biológiai tulajdonságaik az ismert vegyületekétől különbözőek. Az (I) általános képletű vegyületek közül azt, amelyben X jelentése -f- csoport Ó KA-7367A vegyületként, amelyben 9H X jelentése -CH- csoport KA-7367B vegyületként jelöljük. A KA-7367A és KA-7367B vegyületek termelésére képes KC-7367 jelű törzset a talajminta (lelőhelye Japán, Shimane Prefecture, Shinjyo-mura) szuszpenziójának, például steril vizes szuszpenziójának tápközegen való szélesztésével, majd 27 °C hőmérsékleten 7 napon át való tenyésztésével, és a kapott telepek összegyűjtésével nyerjük. A tápközeg pH-ja 7,0, összetétele 0,1% húskivonat, 50 pg/ml mycostatin, 0,4 pg/ml penicillin G, 2 pg/ml polimixin, 8 pg/ml nalidixinsav és 1,5% agar, amelyeket burgonyalekvárba mérünk be (a burgonyalekvár összetétele 10% burgonya, 0,5% paradicsompép és 1% zabliszt). A KC-7367 jelű törzs mikrobiológiai jellemzői a következők. A különböző tápközegkben való jellemzőket a törzsnek 27 °C hőmérsékleten 14 napon át való tenyésztésével, és a szokásos megfigyelések elvégzésével állapítjuk meg. A szín kifejezését a Color Harmony Manual, 4. kiadás (Container Corporation of America) szerinti osztályozás alapján végezzük. /. Morfológiai jellemzők A törzs különféle tápközegeken vegetatív légmicéliumokat fejleszt. A légmicéliumok monopodiálisan elágazóak, sporofórákkal bírnak. A sporofórák 10-50 spórát tartalmaznak lánconként. A spórák hengeresek, 1,1-1,3x1,3-1,5 nm méretűek, sima felületűek. A szubsztrátmicélium fragmentálódása, ostoros spóra, sporangium és szklerócium nem figyelhető meg. //. Tenyésztési jellemzők különféle tápközegeken 1. Szacharóz-nitrát agar Növekedés: jó Légmicélium: gyenge, fehér (a) Szubsztrámicélium: halvány elefántcsont-tojáshéjszín (2ca) Oldható pigment: nincs 2. Gliikóz-aszparagin agar Növekedés-azparagin agar Növekedés: gyenge Légmicélium: gyenge, fehér (a) Szubsztrátmicélium: fehér (a) Oldhatód pigment: nincs 3. Glicerin-aszparagin agar: Növekedés: mérsékelt Légmicélium: gyenge, orchidea (lOcb) Szubsztrámicélium: koloniálsárga (2ga) Oldható pigment: nincs 4. Szervetlen-só-keményító agar Növekedés: mérsékelt Légmicélium: gyenge, rezedazöld (24ig) Szubsztrátmicélium: sötét olivaszínű (1 1/2 ni) Oldható pigment: nincs 5. Tirozin-agar: Növekedés: jó Légmicélium: mérsékelt, fehér (a) - rezedazöld (24 ig) Szubsztrátmicélium: sötétbarna (3 ni) Oldható pigment: nincs 6. Táp-agar Növekedés: mérsékelt Légmicélium: gyenge, fehér (a) Szubsztrátmicélium: halványsárga (1 1/2 ea) Oldható pigment: töksárga (2 ia) 7. Élesztő extraktum - maláta extraktum agar: Növekedés: jó Légmicélium: mérsékelt, rezedazöld (24 ig) Szubsztrátmicélium: beige barna (3 ig) - halvány dinnyesárga (3 ea) Oldható pigment: töksárga (2ia) 8. Zabliszt agar Növekedés: mérsékelt Légmicélium: mérsékelt, gyöngy szürke (13dc) Szubsztrátmicélium: sötétbarna (3 ni) Oldható pigment: testszín-bama (4 gc) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
