202271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegetatív mikrobasejtek tartós tenyészetének előállítására
9 HU 202271 B 4. példa A tartós tenyészet előállítása 10 Candida utilis tartós tenyészetének előállítása Az inokulum készítése Mindenben az 1. példában leírtak szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a Candida utilis fiziológiás konyhasós, 8. • 107 sejt/cm3 csirakoncentrációjú szuszpenziójához 8.107xl0_7=8 milliekvivalensnek megfelelő 1,1 g/liter kálium-dihidrogénfoszfátot adagolunk literenként. A szuszpenziót 24 óra hosszat +5 °C-on termosztáljuk, majd a mo- 15 sott, 8.107 sejt/cm3 csiraszámú szuszpenzióhoz literenként 2 g gyöngy kovaföldet (Diaperi SÍ, gyártják az Országos Érc- és Ásványbányák Hegyaljai Művei, Mád) adagolunk. 60 liter alábbi összetételű tápközeget készítünk: 5 glükóz 10 g, karboxi-metil-cellulóz 7,5 g, dinátrium-hidrogén-foszfát 2 g, nátrium-dihidrogén-foszfát 1,5 g, ammónium-szulfát 3 g, húskivonat 1 g, élesztökivonat 1 g, desztillált viz 1 literre, pH 6,5. Beoltjuk 1 10 liter fenti inokulummal és aerob szaporítással 37 °C-on szaporítjuk a sejteket a maximális csiraszám eléréséig. (9.107 sejt/cm3). Kontroll tenyészet Mindenben az előzőek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tenyészet előállításához inokulumként közvetlenül a Candida 20 utilis 8.107 sejt/cm3 csirakoncentrációjú fiziológiás konyhasós szuszpenzióját használjuk. Tárolási vizsgálatok 25 Mindenben a 3. példában leírtak szerint jártunk el, azzal a különbséggel, hogy a vizsgálatok induló csiraszáma 9.107 sejt/cm3 és az aktivitásmérésnél az inkubációs hómér- 30 séklet 37 °C volt. A tárolás Aktivitás óra 15 cm3 CO2 Élőcsiraszám/cm3 tartama képződéséhez hét kontroll találmány sz. kontroll találmány induló 10 10 9.107 9.107 1 10 10 9.107 9.107 2 10,4 10 8,6.107 9.107 3 10,8 10 8.2.107 9.107 4 13,2 10,4 6,6.106 8,6.107 5 20,6 10,6 3,4.10s 8,2.107 6 24,4 10,9 1.2.106 8,0.107 7 30,2 11,2 9.105 7,8.107 8 38,8 11,4 6.105 7,4.107 9 65,9 11,6 2.105 7.0.107 10 78,2 11,8 0,5.106 6,8.107 7