202271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegetatív mikrobasejtek tartós tenyészetének előállítására
7 HU 202271 B 8 A tárolás Aktivitás mmol/1 tejsav Élócsíraszám/cm3 tartama kontroll találmány szerint kontroll talál m. hét induló 10,8 10,8 4.10» 4.10» 1 10,8 10,8 4.10» 4.10» 2 10,6 10,8 3.10» 3,8.10» 3 10,2 10,8 2,6.10* 3,6.10» 4 9,8 10,4 8,0.10® 3,2.10» 5 8,4 10,0 7,2.10® 2,8.10» 6 7,5 9,8 4,1.10® 2,2.10» 7 5,8 9,6 1,2.10® 1,8.10» 8 4,2 9,2 8.10’ 1,4.10» 9 2,1 8,8 3.107 1,2.10» 10 0,8 8,6 8.10® 1,0.10» 3. példa Saccharomyces cerevisiae tartós tenyészetének előállítása 20 Az inokulum készítése Mindenben az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a Saccharomy- 25 ces cerevisiae fiziológiás konyhasós szuszpenziójához - melynek csiraszáma 5.10® sejt/cm3 - 5.10®xl0~7=50 milliekvivalens káliumnak megfelelő 6,84 g/liter kálium-dihidrogénfoszfátot adagolunk, a szuszpenziót -10 12 °C-on 16 óra hosszat termosztáljuk, majd a mosott, 5.10® sejt/cm3 csíraszámú sejtszuszpenzióhoz 250 g/liter búzakeményítőt adagolunk. A tartós tenyészet előállítása 50 liter alábbi tápoldatot készítünk: glükóz 50 g, nátrium-dihidrogénfoezfát 0,5 g, 40 ammónium-szulfát 6,5 g, élesztőkivonat 0,5 g, desztillált víz 1 literre, pH 6,2. A tápközeget beoltjuk 1 liter fenti inokulummal, és az aerob fermentációt 30 °C-on a maximális csiraszám eléréséig (4.10® sejt/cm3) folytatjuk. 45 Kontroll tenyészet Mindenben az előzőek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tenyészet előállításához közvetlenül a Saccharomyces cerevisiae 5.10® Bejt/cm3 csirakoncentrációjú fiziológiás konyhasós szuszpenzióját használjuk inokulumként. Tárolási vizsgálatok A tenyészeteket 3 héten át +5 °C-on, a 4. héten +25 °C-on, majd az 5-10. hétig ismét 5 °C-on tároltuk. A tenyészetek élőcsiraszámát Sabouraud dextróz agaron (Oxoid Ltd, BaBingstole, England CM 41) szélesztéses eljárással határoztuk meg. A tenyészetek aktivitását úgy határoztuk meg, hogy anaerob körülmények között mennyi idő szükséges 101 325 N/m2 nyomáson 15 cm3 CO2 képződéséhez 30 °C-on, folyékony Sabouraud dextróz táptalajon (Oxoid Ltd, Basingstole, England CM 147). A tárolás tartama Aktivitás óra 15 cm3 CO2 képződéséhez Élócsíraszám/cm3 hét kontroll találmány sz. kontroll találmány induló 6 6 4.10« 4.10® 1 6 6 4.10» 4.10« 2 6,4 6 2,0.10® 4.10« 3 6,8 6 1,0.10« 4.10« 4 8,2 6 8,6.107 3,8.10® 6 10,2 6,2 6,4.107 3,6.10® 6 12,2 6.4 4,6.107 3,2.10® 7 18,4 6,7 1,6.107 3,0.10® 8 26,5 7,0 9,2.10® 2,6.10« 9 39 7,2 5,4.10® 2,2.10« 10 56 7,5 2,8.10« 2,0.10« 6
