202271. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vegetatív mikrobasejtek tartós tenyészetének előállítására
5 HU 202271 B Kontroll tenyészet Tárolási vizsgálatok 6 Mindenben az előzőek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tenyészet előállításához közvetlenül a Lactobacillus brevis 4.109 sejt/cm3 csirakoncentrációjú fiziológiás konyhasós szuszpenzióját használjuk inokulumként. A tenyészeteket 3 héten át +5 °C-on, a 4. héten +25 °C-on, majd az 5-10. hétig ismét 5 +5 °C-on tároltuk. A tenyészetek élócsiraszámát Rogosa agaron (Oxoid Ltd., Basingstole, England PM 221), az aktivitásokat 3.10“ sejt/cm3 induló csiraszámmal Man-Rogosa-Sharpe folyékony tápta- 10 lajon (Oxoid Ltd., Basingstole, England CM 359) határoztuk meg. Az aktivitást a 38 °C-on végzett fermentációnál a 24 óra elteltével képződött tejsav mmol/liter mennyiségével jellemeztük. 15 A tárolás Aktivitás mmol/1 tejsav Élőcsiraszám/cm3 tartama hét kontroll találmány szerinti tenyészet kontr. találm. induló 48 48 3.10“ 3.10“ 1 48 48 3.10‘° 3.10“ 2 46 48 2,6.10“ 3.10“ 3 44 48 1,2.10“ 3.10“ 4 42 48 8,0.10» 3.10“ 5 38 48 4,2.10» 2,8.10“ 6 26 46 2,2.10» 2,6.10“ 7 22 45 1,2.10» 2,2.10“ 8 16 43 8,1.10* 1,8.10“ 9 12 42 2,2.10* 1,5.10“ 10 6 40 4.2.107 1,2.10“ 2. példa Pediococcus cerevisiae tartós tenyészetének előállítása Az inokulum készítése Az 1. példa szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy a Pediococcus cerevisiae 4.10* sejt/cm3 csirakoncentrációjú fiziológiás konyhasós szuszpenziójához a káliumos kezelés végett ezúttal 4.10».10*7=400 milliekvivalens káliumnak megfelelő 34,9 g/liter mennyiségű kálium-szulfátot adunk. A szuszpenziót +8 °C-ra hűtjük le, és 16 órán át tartjuk ezen a hőmérsékleten. A sejttömeg kimosása után kapott 4.10* sejt/cm3 csiraszámú sejtszuszpenzióhoz 150 g/liter polietilénglikolt (PEG 6000-et) adagolunk. 5,0 g, dikálium-hidrogénfoszfát 0,6 g, nátri- 35 um-dihidrogénfoszfát 2 g, polioxietilén-monooleát (Tween 80) 0,2 cm3, magnézium-szulfát 0,8 g és desztillált viz 1000 cm3-re. A tápkózeget beoltjuk 1 liter fenti inokulummal, és a mikroaerifil fermentációt 40 30 ®C-on 6,8 pH-n a maximális csiraszám eléréséig folytatjuk. Kontroll tenyészet 45 Mindenben az előbbiek szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a tenyészet előállításához közvetlenül a Pediococcus cerevisiae 4.10* sejt/cm3 csirakoncentrációjú fi- 50 ziológiás konyhasós szuszpenzióját használjuk inokulumként. A tartós tenyészet előállítása 80 liter tápoldatot készítünk, amelynek összetétele: peptonizált kazein 12,5 g, élesztőkivonat 7,5 g, glükóz 10 g, nátrium-klorid Tárolási vizsgálatok Mindenben az 1. példa szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a vizsgálatok induló CBiraszáma 4.10* sejt/cm3 volt és az aktivitésmérés hőmérséklete 30 °C.
