202247. lajstromszámú szabadalom • Eljárás nukleotidok és nukleozidok foszforilezésére
1 HU 202247 B 2 A találmány tárgya eljárás foszforsav, tiofoszforsav és szelenofoszforsav nukleotidokkal vagy nukleozidokkal képzett észtereinek előállítására foszforossavdiészter-dialkil-amiddal történő reakcióval, a keletkező foszforossav-triészter megfelelő ötértékű foszfort tartalmazó vegyületté történő oxidációjával és a foszforilezési reakcióból származó alkoholos, illetve fenolos csoportok bázissal történő lehasításával. A találmány tárgya közelebbről eljárás (I) általános képletű vegyületek előállítására, oly módon, hogy (II) általános képletű vegyületet (l-50)xn mól (III) általános képletű foszforilező reagenssel reagáltatunk, a keletkezett (IV) általános képletű vegyületet oxidáljuk és az (V) általános képletű oxidált vegyületből bázissal felszabadítjuk az (I) általános képletű vegyületet. Az általános képletek értelmezése:- R jelentése nukleotid vagy nukleozid,- Z jelentése oxigénatom,- X jelentése oxigénatom, kénatom vagy szelénatom,- Kát jelentése nitrogént tartalmazó kation,- R1 jelentése (Illa) vagy (Illb) általános képletű csoport,- R5, R6 és R7 jelentése azonos vagy különböző és lehet hidrogénatom vagy metilcsoport,- R8 jelentése (lile), (Ilid) vagy (lile) általános képletű csoport, valamint cianocsoport vagy Ar csoport,- R10 jelentése rövidszénláncú alkilcsoport vagy Ar csoport,- G jelentése azonos vagy különböző, és lehet CH-csoport vagy nitrogénatom, amikor is legalább egy G nitrogénatomot jelent,- Ar jelentése fenilcsoport, amely 1-5 azonos vagy különböző szubsztituenssel, így klóratommal vagy fluoratommal, nitrocsoporttal vagy cianocsoporttal, valamint az elektronszívó szubsztituens mellett egy vagy két lipofil csoporttal szubsztituálva lehet,- n értéke 1-25,- y értéket 0, 1 vagy 2,- R9 jelentése (Illf) vagy (ülg) képletű csoport,- Y jelentése azonos vagy különböző, és lehet klóratom, brómatom vagy jódatom,- R2 jelentése lehet azonos R1 jelentésével, amikor is R2 és R1 azonos vagy különböző, valamint rövidszénlácú alkilcsoport, (Illh) általános képletű csoport vagy Ar csoport, ha ez lúggal könnyebben lehasítható, mint R‘,- R5 és R8 jelentése együttesen (Ilii) képletű csoport, és R1 jelentése metilcsoport, ha R2 jelentése szintén metilcsoport. Az R3 és R4 csoportok tulajdonságai nem meghatározóak, ha az -NR3R4 csoport a (II) általános képletű vegyülettel végzett reakció közben lehasad. R3 és R4 jelentése azonos vagy különböző, és lehet 1-8 szénatomos alkilcsoport, 5-12 szénatomos, előnyösen legfeljebb 8 szénatomos cikloalkilcsoport, benzilcsoport vagy fenilcsoport, vagy a kapcsolódó nitrogénatommal együttesen telített vagy telítetlen heterociklusos gyűrűt képeznek, amely adott esetben további heteroatomokat és szubsztituenseket tartalmazhat. Előnyös jelentések a következők:- RA R° és R7 jelentése hidrogénatom,- R8 jelentése cianocsoport, fenilcsoport vagy nitro-fenil-csoport, előnyösen mononitro-fenil-csoport, így p-nitro-fenil-csoport vagy dinitro-fenil-csoport, így 2,5-dinitro-fenil-csoport, továbbá klórozott fenilcsoport, előnyösen mono-, di- vagy triklór-fenil-csoport vagy 2-klór-4-nitro-fenil-csoport, valamint egy vagy két szénhidrogéncsoporttal, előnyösen 6-24 szénatomos, elsősorban 12—18 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált nitro-fenil-csoport,- R9 jelentése előnyösen (Illf) általános képletű csoport, amelyben Y jelentése előnyösen klóratom,- R2 jelentése rövidszénláncú alkilcsoport, előnyösen metilcsoport, vagy jelentése azonos R1 jelentésével,- R3 és R4 jelentése 1-6 szénatomos alkilcsoport, előnyösen rövidszénláncú alkilcsoport, ciklohexilcsoport, benzilcsoport vagy fenilcsoport, vagy a nitrogénatommal együtt pirrolidilcsoportot, piperidilcsoportot, morfolilcsoportot, triazolocsoportot, benzotriazolocsoportot vagy tetrazolocsoportot képeznek, amikor is az aromás csoportok klóratommal, fluoratommal, nitrocsoporttal vagy cianocsoporttal szubsztituálva lehetnek,- X és Z jelentése előnyösen oxigénatom,- n értéke 1-6, előnyösen 1 vagy 2, elsősorban 1. A rövidszénláncú kifejezés legfeljebb 4 szénatomos szénláncot jelent. Az R1 helyén metilcsoporttól eltérő csoportot jelentő (III) általános képletű vegyületek, valamint a (VI) általános képletű vegyületek újak. F. Himmelsbach és munkatársai [Tetrahedron Letters, 23, 4793-4796 (1982)] olyan (V) általános képletű vegyületeket ismertetnek, amelyekben R1 és R- jelentése 2-(4-nitroé-fenil)-etil-csoport, X és Z jelentése oxigénatom és R jelentése timidilcsoport. Ezek a vegyületek előállíthatok timidin és bisz(p-nitro-fenil-etil)-foszforo-monokloridát reakciójával, amelynek során lényegében az 5’-helyzetű hidroxilcsopotok acileződtek. Ez a foszforilező reagens meglehetősen labilis és sem magas vákuumban nem lehet desztillálni, sem szilárd formában nem lehet előállítani. Az (V) általános képletű vegyület előállításához az ismert úton - foszfor-triklorid átalakítását nem tekintve - négy reakciólépésre van szükség, majd a kapott vegyületet oligonukleotidokká alakítva és ezekből l,5-diazo-biciklo(5.4.0)undecén-5 (DBU) segítségével a p-nitro-fenil-etil-csoportot lehasítva (I) általános képletű vegyülethez hat reakciólépésben jutnak el, míg a találmány szerinti eljárásnál ehhez három reakciólépés szükséges. A (III) általános képletű vegyületek önmagában ismert módon foszfor-trikloridból, R*-OH vagy R2- OH általános képletű hidroxi-vegyületekből és HNR3R4 általános képletű szekunder-aminokkal előállíthatók. A szabad szekunder amin helyett alkalmazhatjuk a megfelelő szilil-vegyületeket is. A foszfortrikloridban lévő klóratomok kicserélésének sorrendje a hidroxil-, illetve amino-vegyületek reaktivitásától függ. így például a (VI) képletű vegyület a következő úton nyerhető: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
