202243. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (cikloalkil-amino)-metilén-bisz(foszfonsav)-származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 202243 B 2 Vegyület Dózis (mg/kg) N Szérum Ca2+ (mmől/1) koncentráció kontroll (+PTH)-5 1,4510,02 YM-21175-1 10 p.o. 5 1,37±0,02 30 p.o. 5 1,2310,05** 100 p.o. 5 1,0510,04** (3) Idegkimetszéssel előidézett mozgáshiány okozta csontsorvadás patkányban 6 hetes, hím Wistar patkányok kar-idegkötegét kimetsszük, ezáltal bal mellső lábát nem használja az állat. Két héttel később eltávolítjuk a bal felkarcsontot. A csont körüli lágy szövetet letisztítjuk, és a csontot alkohollal, majd ezt követően acetonnal vízmentesítjük és zsírtalanítjuk. Mérjük a csont száraz tömegét. A vizsgálandó vegyületeket orálisan adagoljuk, 2 héten keresztül, naponta egy alkalommal. Az eredményeket az átlagérték ± S.E. segítségével adjuk meg. Az eredmények statisztikus szignifikanciáját egyutas ANOVA teszttel analizáljuk (*: p<0,05; **: p<0,01). A vizsgálati eredmények szerint az idegkimetszett felkarcsont száraz tömege jelentősen csökken az álműtött állatokával szemben. A bisz(foszfonát)-ok orális adagolásának hatására dózistól függő módon csökken az idegkimetszett humerus száraz tömegének csökkenése. Az YM-21175-1 kb. 30-szor hatásosabbnak bizonyult, mint az ismert APD. Az eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük. 3. táblázat: YM-21175-1 és APD hatása idegkimetszéssel előidézett mozgáshiány okozta csontsorvadásra patkányban Vegyület Dózis (mg/kg) N Száraz tömeg (mg) áloperált-6 15413** kontroll — 6 11312 APD 10 5 12613 30 5 12814* 100 6 13512** YM-21175-1 0,3 6 12612 1 6 13216** 1 0 6 15014** (4) Adjuvánssal indukált arthritisz patkányban 5 hetes, hím Lewis patkányok bal hátsó mancsába intradermálisan injektáljuk az elölt bacilusok olajos szuszpenzióját. A vizsgálandó vegyületeket orálisan 'adagoljuk, naponta, az adjuváns injektálásától kezdődően 5 héten keresztül. A bal hátsó mancs vastagságát lemérjük, és a bal combcsontot eltávolítjuk az utolsó kezelést követő napon. A csontot dehidratáljuk és zsírmentesítjük, és mérjük a száraz tömegét. Elhamvasztás után újra lemérjük a tömegét. A csont ásványianyag-tartalmát (BMC) a hamu tömege/száraz tömeg hányadossal adjuk meg. Az eredményeket az átlagos érték 1 S.E. segítségével tüntetjük fel. A statisztikus szignifikanciát egyutas ANOVA teszttel analizáljuk (**: p<0,01). Az adjuvánssal indukált arthritisz egyike a legelterjedtebben használt modelleknek az emberi reumás arthritisz vizsgálatára. Az adjuváns injektálásával arthritiszessé tett patkányokban nemcsak a láb dagad meg, hanem a BMC érték is csökken, amelynek oka feltehetően az, hogy fokozódik a csontfelszívódás és/vagy nem használják a hátsó lábukat. Az indometacin 1 mg/kg dózisban jelentősen gátolja a hátsó láb feldagadását. Ez a vegyület a BMC csökkenést is gátolja, mivel gátolja magának az arthritisznek a kifejlődését. Az YM-21175-1 csak magasabb dózisokban gátolja a lábdagadást, de 1 mg/kg dózisban csökkenti a BMC értéket. Ezért hatásmódja feltehetően eltér az indometacinétól. A fenti vizsgálatban a YM-21175-1 sokkal hatásosabb, mint az APD. Az eredményeket a 4. táblázatban ismertetjük. 4. táblázat: YM-21175-1 és APD hatása adjuvánssal indukált arthritiszre patkányban Vegyület Dózis (mg/kg) N Vastagság hamutömeg/ (mm) száraztömeg (%) normál-6 6,410,0 54,810,1** kontroll-6 13,510,1 49,510,4 indometacin 1 6 7,610,1** 52,310,2** APD 1 6 12,110,6 50,410,3 3 6 11,610,7 51,210,4** 10 6 10,810,6** 52,110,5** 30 6 12,110,3 53,310,3** 100 6 9,310,3** 56,610,3** YM-21175-1 0,3 6 12,310,6 50,710,6 1 6 11,710,1 52,110,8** 3 6 12,310,8 53,110,4** 10 6 10,510,7** 55,910,3** 30 6 9,510,2** 57,610,3** Az YM-21175-1 csontveszteséget gátló hatását az APD-ével hasonlítjuk össze. Amint az a három fajta kísérlet eredményeiből látszik, az YM-21175-1 csontporózis, reumás arthritisz és más, csontfelszivódás fokozódásával járó betegségek kezelésére alkalmazható, és az YM-21175-1 a vizsgálati eredmények szerint hatásosabb, mint az ismert APD. A fenti vizsgálati eredményekből látható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek kiváló hatással csökkentik a szérum kalciumon-koncentrációt. Ennek megfelelően megállapítható, hogy a találmány szerinti eljárással előállított vegyületek csontfelszívódást gátló hatással rendelkeznek. A csont fokozott felszívódásával járó betegségekre példaként a Paget- betegséget, a hiperkalcémiát, metasztázisos csontkarcinomát és a csonttörékenységet említhetjük. Klinikai szempontból fontos még a gyulladásos arthritist, például krónikus reumás arthritiszt követő erős csontfelszívódás. A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek a fenti betegségek gyógyítására használhatók, a csontfelszívódást gátló, a csont mennyiségének csökkenését megakadályozó, vagy a 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
