201804. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-keto-L-gulonsav előállítására mikrobiológiai úton
HU 201804B (7) Keményítő: nem hidrolizálódik (8) Citrát: nem hasznosítja (9) Ammónium-sók: hasznosítja (10) Nincs pigmentképzés (11) Ureáz: képződik (12) Oxidáz: képződik (13) Ka taláz: képződik (14) A növekedés hőmérsékletintervalluma 16- 36 ‘C, optimuma 24-34 'C. A növekedés pH intervalluma 5,5-8,2 optimuma 6,0-7,5. (15) Aerob (16) Hugh-Leifson-féle OF teszt: oxidativ (17) Savat képez, de gázt nem képez a következő vegyületekből: L-arabinóz, D-xilóz, D-glükóz, D- fruktóz, D-galaktóz, D-mannóz, maltóz, szacharóz, laktóz, trehalóz és glicerin. Sem savat, sem gázt nem képez D-mannitból, D-szorbitból, inozitból és keményítőből. d) Egyéb jellemzőt (1) Etanolból gyengén ecetsavat képez. (2) Növekedéshez biotin, tiamin, riboflavin és vagy CoA, vagy pantoténsav szükséges. (3) Glicerinből dihidroxi-acetont képez. (4) ADNSguanin+citozintartalma:67 ± 1 mól% (5) 10 izoprén egységet tartalmazó ubikinon jelenléte (CoQio) (6) L-szorbózból jelentős mennyiségben képez 2- keto-L-gulonsavat (7) Sztreptomicin-rezisztens A 22-3 törzs taxonómiai tulajdonságai a következők: a) Morfológia (1) Pálcika alakú sejtek, méretük (0,3-0,5) X (0,7-1,4) pm (2) Nincs celluláris polimorfia (3) 2-4 poláris ostorral mozognak (4) Nem spóraképző (5) Gram-negatív (6) Nem saválló. b) Tenyésztési jellemzők (1) Semleges agar táptalaj: A jelentéktelen telepek nem tesznek lehetővé részletes megfigyelést. Élesztővel dúsítottsemleges agar: Kerek, egész körvonal, sima, opálos. (2) Élesztő kivonattal dúsított semleges agar táptalaj ferdére állítva: A növekedés mérsékelt és szálszerű, sima, opálos. (3) Keményítő extraktumból készült semleges tápközeg: Mérsékelt növekedés, egységes turbiditás az egész közegben. (4) Semleges zselatin szúrt tenyészet: Gyenge növekedés csak a tetején. Zselatin nem folyósodik el. (5) Lakmusz tej: Savanyodás, de koaguláció nincs c) Fiziológiai tulajdonságok (1) Nitrát redukció: pozitív (gyenge) (2) Nitrátmentesítés: negatív (3) Metilvörös (MR) teszt: pozitív (4) Voges-Proskauer (VP) teszt: negatív (5) Indoirnem képződik (6) Hidrogén-szulfid: nem képződik (7) Keményítő: nem hidrolizálódik 5 (8) Citrát: nem hasznosítja (9) Ammónium-sók: hasznosítja (10) Nincs pigmentképzés (11) Ureáz: képződik (12) Oxidáz: pozitív (13) Ka taláz: pozitív (14) A növekedés hőmérsékletintervalluma 16- 38 "C, optimuma 24-34 *C. A növekedés pH intervalluma: 5,5-8,7, optimuma 6,0-7,8. (15) Aerob (16) Hugh-Leifson-féle OF teszt: oxidativ (17) A következő vegyületekből savat igen, de gázt nem képez: L-arabinóz, D-xilóz, D-glükóz, D- fruktóz, D-galaktóz, D-mannóz, maltóz, szacharóz, laktóz, trehalóz és glicerin. A következő vegyületekből sem savat, sem gázt nem fejleszt: D-mannit, D- szorbit, inozit és keményítő. d) Egyéb jellemzőt (1) Etanolból gyengén ecetsavat képez. (2) Növekedéséhez biotin, tiamin, riboflavin és vagy CoA, vagy pantoténsav szükséges. (3) Glicerinből dihidroxi-acetont képez. (4) ADNSguanin+citozintartalma:67 ± 1 mól%. (5) 10 izoprén egységet tartalmazó ubikinon egységek jelenléte (6) Jelentős mennyiségben termel 2-kcto-L-gulonsavat L-szorbózból.(7) Sztreptomicin-rezisztens. A fenti, 5 földből származó baktérium taxonómiai tulajdonságait Bergey Manual of Determinative Bacteriology, 8. kiadás (1974) és Bergey Manual of Systematic Bacteriology, 1. kötet (1984) alapján határoztuk meg. A fentiek alapján a K591s, 12-5, 12-4 és 22-3 törzs a Pseudomonas nemzetségbe sorolható, tekintve, hogy Gram-negatívak, mozgásra képesek, és pálca formájú baktériumok, melyek poláris ostorokkal rendelkeznek. Azért, mert bizonyos növekedési feltételek szükségesek a tenyésztésükhöz, a DNS guanin + citozin tartalma 67 ± 1 mól%, és kinonrendszerük 10 izoprén egységet tartalmazó ubikinon, hasonlók a Pseudomonas diminuta-hoz és a Pseudomonas vesicularishoz, melyek ennek a nemzetségneklV. szekciójánakIV.RNS csoportjába tartoznak. Azonban az etanolból való gyenge ecetsavképzés és a glicerinből való dihidroxi-aceton képzés azok a jellemzők, amelyek ezeket a törzseket a Pseudomonas nemzetséghez tartozó baktériumoktól megkülönböztetik. A fenti tulajdonságok a Gluconobacter nemzetséghez tartozó baktériumok tulajdonságaival egyeznek meg. Mivel azonban a fenti 5 törzs az oxidáz vizsgálatban pozitív eredményt mutat, pH - 4,5-nél nem élnek meg, és élesztő extraktum vagy pepton élesztő extraktum tápközegben szénhidrátok jelenléte nélkül is növekszenek, valamint a DNS-ükben a guanin + citozin tartalom 67 ± 1 mól%, ezért a Gluconobacter nemzetségtől különböznek. ígyafenti5törzs(K591s, 12-5,12-15,12-4,22- 3) nem sorolható be egyetlen ismert nemzetségbe se, ezért egy új nemzetség képviselőinek tekinthetjük őket. ígyazK591s, 12-5,12-15,12-4 és 22-3 törzset együttesen Pseudogluconobacter saccharoketogenesnek neveztük. 6 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
