201762. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3-pirrolidinil-tio-1-azabiciklo [3.2.0] hept-2-én-2-karbonsav-származékok előállítására
11 HU 201762 B 12 hetjük, melyet mindenkor a lehasítani kívánt merkapto-védócsoport természetétől függően választunk meg. Abban az esetben, ha védőcsoportként valamely aril-(rövidszénláncú)-alkil-csoporttal azt előnyösen például valamely ezüst-vegyülettel, például ezüst-nitráttal, ezüst-karbonáttal, stb. történő kezeléssel hasítjuk le. Az ezüst-vegyülettel végzett reakciót előnyösen valamely szerves bázis, például piridin, stb. jelenlétében végezzük. A (III) általános képletü vegyület így keletkezett ezüstsóját szükség esetén alkálifém-sójává alakíthatjuk, például valamely alkálifém-halogeniddel, például nátrium- jodiddal, kálium-jodiddal, stb. végzett reakcióval. Amennyiben védócsoportként valamely acilcsoportot alkalmazunk, azt általában szolvolizissel, például savas vagy bázikus hidrolízissel, bázikus alkoholizissel és hasonló eljárásokkal hasitjuk le. Ezekben a reakciókban alkalmazható alkalmas savak és bázisok ugyanazok, melyeket a 2. eljárásban ismertetett hidrolízis-módszernél megadtunk. A hidrolízist általában hagyományos oldószerben végezzük, mely nem befolyásolja hátrányosan a reakciót. Ilyen oldószer például a viz, alkoholok, például metanol, etanol, stb., piridin, N,N-dimetil-formamid, stb., vagy ezek elegyei, és abban az esetben, ha az alkalmazandó bázis vagy sav folyékony, azt egyben oldószerként is alkalmazhatjuk. Az alkoholizist általában valamely önmagában ismert alkoholban, például metanolban, etanolban, és hasonlókban végezhetjük. A reakció hőmérséklete nem kritikus, és azt általában hűtés közben, szobahőmérsékleten és melegítés közben egyaránt végezhetjük. Az (I), (lb), (Id), (If), (lg), valamint (III) és (Illa) általános képletü vegyületeket, melyeket az 1-5., illetve A- és B-eljárások szerint állítottunk elő, önmagukban ismert módszerekkel izolálhatjuk és tisztíthatjuk, például extrakcióval, kicsapással, frakcionált kristályosítással, átkristályositással, kroniatográfiával és hasonlókkal. Az (I) általános képletü vegyületek körén belül a különösen hatékony mikrobaellenes hatással rendelkező vegyületek az U’) általános képletü vegyulettel jellemezhetők, ahol R*b, R3 és A az előzőekben megadott, és R4a ureido-(l-4 szénatomos)-alkil-csoport. E vegyületek körébe tartoznak azoknak gyógyászatiig elfogadható sói is. Az (I) általános képletü vegyületek közül a leghatékonyabb vegyületek az (I”) általános képlettel jellemezhetők, ahol R4a és A a fent megadott. Ugyancsak hatékonyak e vegyületek gyógyászatiig elfogadható sói is. Az (I) általános képletü vegyületek és gyógyászatiig elfogadható sóik erős mikrobaellenes hatást mutatnak, és gátolják számos patogén mikroorganizmus, így Gram-pozitiv és Gram-neguLív mikroorganizmus növekedését. Különösen kiemelendő mikrobaellenes hatásuk Gram-negatív baktériumok, például P. aeruginosa ellen. Az (I) általános képletü vegyületek és gyógyászatiig elfogadható sóik igen stabilak dehidro-peptidáz hatásával szemben, és jó kiválasztódási értéket mutatnak; ezért igen hatékonyan alkalmazhatók különböző fertőzéses megbetegedések, különösen a veserendszer fertőző megbetegedéseinek kezelésére. Az alábbiakban az (I) általános képletü vegyületek egyes képviselőinek mikrobaellenes hatását ismertetjük. IN VITRO MIKROBAKbLKNES HATÁS Vizsgálati módszer: A találmány szerinti vegyületek in vitro mikrobaellenes hatását kétszeres-agar-lemez hígitásos módszerrel vizsgáltuk. A vizsgálandó mikroorganizmus törzs egyéjszakás Mueller-Hinton táptalajon (Difco) készitett, egy éjszakás tenyészetének 100- -szoros hígításából (körülbelül 106 élő sejt/ml) egy kacsnyi mennyiséget Mueller-Hinton-agarra (H. influenza esetén a táptalajhoz 5% lóvér-csokoládé-agart is adtunk) cseppentettünk, mely a vizsgálandó vegyület növekvő koncentrációját tartalmazta, és a minimális gátló koncentrációt (MIC) tig/iul egységekben fejeztük ki, 20 órás, 37 °C hőmérsékleten történő inkubálás után. Vizsgált vegyületek: (1) (4R,5S,6S)-6-[ (lR)-l-hidroxi-etil]-4-me-til-7-oxo- 3-( (2S,4S)-2- ureido-metil-pirrolidin-4-il ]-t io- l-azabiciklo[3.2.0]hept-2- -én-2-karbonsav (EP-A-0 182 213 szerinti vegyület, a továbbiakban: kontrollvegyület); (2) (4R,5S,6S )—6— ((lR)-l-hidroxi-etil]-4-metil-7-oxo-3-[ (2S,4S)-2-(/2-ureido-etil/-oxi-metil)-pirrolidin-4-il]-tio-l-azabiciklo[3,2.0]hept-2-én-2-karbonsav (a 7., 8., 9. vagy 10. példák szerinti vegyület, a továbbiakban: találmány szerinti vegyület). Kísérleti eredmények: MIC (ug/ml) Vizsgált mikroorganizmus Kontrollvegyület Találmány szerinti vegyület S. aureus 1,56 0,05 P. aeruginosa 3036 1,56 0,39 E. cloacae 3013 0,1 £0,025 11. influenzae 58 0,78 0,1 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
