201672. lajstromszámú szabadalom • Eljárás podofillotoxint tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
3 HU 201 672 B 4 1. táblázat Tesztállat Adagolás módja Akut toxieitás LDso mg/kg Patkány i.v. 10 Egér i.v. 20 Egér p.o. 100 Patkány bőrön 500 Nyúl bőrön 200 Malária elleni hatás A malária elleni hatást klinikai kísérletekben számos olyan betegen határoztuk meg, akik malária parazitával, 15 Plasmodium falciparum-mal voltak fertőzve. A podofillotoxint két különböző dózisban adagoltuk, és a betegekben a paraziták számát naponta határoztuk meg, és feljegyeztük a vérben található aszexuális paraziták számát mm3-enként. Az eredményeket a 2. táblázat mutatja. 20 Immunreakciók és kilöködési reakciók elleni hatás Birka eritrociták szuszpenziójának injekciózás egérben specifikus antitestképződést indít meg ezzel az antigénnel szemben. Ez a reakció normálisan igen erős, és 25 megkívánja a különböző típusú sejtek, lényegében a makrofágok, T és B limfociták együttműködését, és egyszerűen detektálható a tesztállat lépjében. Ez a reakció meggátolható podofillotoxin napi, dózistól függő injektálásával az eritrociták adagolás után. 30 Genetikailag eltérő egerekben bőr átültetése normális esetben 10 napon belül kilökődést okoz. Úgy találtuk, hogy sok esetben lényegesen meghosszabbodik a túlélési idő 15 napra vagy hosszabb időre, ha a tesztállatokat a találmány szerinti eljárással előállított vegyületekkel 35 kezeljük. In vitro kísérletekben szintén úgy találtuk, hogy a podofillotoxin gátolja a sejtek szaporodását, amit mitogenetikus lectinekkel váltottunk ki vagy olyan sejtek szaporodását, amelyek nem rokon egyedből szármáz- 40 nak, és a citotoxikus sejtek fejlődését szintén gátolja, ez 2. tábl, a hatás már ismert volt. Lényegesen alacsonyabb dózisoknál ez a hatás azonban növekszik. Más kísérletek azt mutatták, hogy az olyan sejtek, amelyeket podofillotoxinnal kezeltünk, az ilyen ingerekre adott reakcióképességükben 24 órán belül az eredetire visszaállnak. Psoriasis elleni hatás Klinikai kísérleteket végeztünk 152 betegen, akik életkora 19 és 71 év között volt (átlagérték 46,1 év), és akik psoriasis vulgaris-ban szenvedtek. A betegeket 50, 51, illetve 51 fős csoportokra osztottuk, és 0,1, 0,25, illetve 0,5% podofillotoxint tartalmazó krémmel kezeltük. A betegeket a testüknek csak egy kiválasztott területén kezeltük, míg a többi beteg terület összehasonlítási alapul szolgált. A betegség súlyosságát meghatároztuk a kezelés kezdetekor, majd azután 2,4,8,12és 16héUcl, az utolsó 4 hétben nem végeztünk kezelést. A kísérletet kétszeres vak technikával végeztük, és az eredményeket statisztikusan értékeltük ki. Mind a három dózis esetén statisztikusan szignifikáns javulás (p < 0,001) volt megfigyelhető a kezelt területek betegségének és a kapcsolódó tüneteknek a súlyosságában. A kezelés után már két héttel szignifikáns különbség volt (p < 0,001) a kezelt és kezeletlen területek között, és ez a különbség fokozódott a kezelés során. Az ötödik ellenőrzéskor a betegek 70-75%-a tünetmentes volt, vagy csak enyhe tüneteket mutatott, míg csak két beteg mutatta a kezeletlen területekhez képest enyhébb javulást Az azutáni időben, a 13-16. héten nem következett be rosszabbodás sem a tünetek sem a beteg területek súlyosságában. Csak 11 beteg számolt be mellékhatásról, például kiütésről, ezek a mellékhatások megszűntek a kezelés megszakításával. A három csoportban a mellékhatások száma nem volt szignifikáns (p ~ 0,50). Reumás ízületi gyulladás kezelése CPH86 jelű készítménnyel CPH86: tiszta podofillotoxint tartalmazó orális készítmény 12, reumás ízületi gyulladásban szenvedő beteget kezeltünk 12 hétig CPH86 készítménnyel, a követ-Napi Beteg • Nap dózis szám 0 1 2 3 4 5 6 7 Megjegyzések í 660 180 0 0 180 270 270 270 Paraziták lényeges csökkenése kezdetkor - a beteg később chloroquin-nal kezelve. 1,5 mg 2 13 710 3000 120 0 0 0 0 0 Meggyógyult (ü.d.) 4 1410 360 0 0 60 60 60 60 Paraziták a 2. napon eltűntek, de újra megjelentek. 5 960 90 0 0 0 0 0 0 Meggyógyult 6 13 080 510 0 0 0 0 0 0 Meggyógyult 7 4 380 1560 180 660 1400 ' Betegek lettek - chloroquin kezelést kaptak. 3 2 880 2520 60 540 600 600 0 0 Meggyógyult 3,0 mg 8 2 060 1600 60 0 0 0 0 0 Meggyógyult 9 6 080 2000 0 0 0 0 0 0 Meggyógyult (Li.d.) 10 320 60 0 0 0 0 0 0 Meggyógyult 3
