201517. lajstromszámú szabadalom • Eljárás polietilénglikol-karbaminátok és ezeket a hatóanyagokat tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására, valamint diagnosztikumok
] HU 201517 B 2 óllal készített oldatához 1,78 g (11 mmól) 1,1’-karbonil-bisz-lH-imidazolt adunk, majd ezt 70 '-on egy órán át keverjük, ezután lehűtjük. A feldolgozást az 1. példában leírtak szerint végezzük. Az így kapott cím szerinti vegyület az 1. példa termékével azonos. 4. példa N-[a>-Metoxi-(dodekakisz-etilén-oxi)-karbonil-amino-szulfonilj-deferrioxamin B, ahol dodekakisz-etilén-oxi-olyan -(CH2-CH2-0)n- általános képletű csoportot jelent, ahol n átlagos értéke: 12. A 3. példában leírt módon és az ott leírt anyagmennyiségekkel elvégezzük a deferrioxamin B-metánszulfonát szililezését, ami után ezt a következőkben ismertetett módon készített acilezőszerrel reagáltatjuk: 5,5 g (10 mmól) polietiiénglikol-monometil-éter (átlagos molekulatömege: kb. 560, az Union Carbide cég Carbowax MPEG 550 elnevezésű terméke, amely átlagosan 12 -CH2-CH2-O- képletű egységet tartalmaz) 50 ml toluollal készített oldatához 0,95 ml (II mmól) klór-szulfonil-izocianátot adunk és ezt az elegyet 1 órán át 70°-on tartva keverjük, majd lehűtjük. 2000 ml metanol hozzáadása után a reakcióelegyet szárazra pároljuk. A maradékot, amely még jelentős mennyiségű piridint tartalmaz, kb. 5Ó0 ml metilén-diklorid és 1000 ml dietil-éter elegyéből kristályosítjuk és ezt követően 16 órán át igen nagy vákuumban szántjuk. Az anyag további tisztítását golyócskák formájában levő, hidroxipropilezett dextrángélen (Sephadex R LH-20) végzett kromatografálással végezhetjük. Nagyteljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC): retenciós idő (RT)= 10,25 perc. 5. példa Szárazon ampullázott készítményt állítunk elő, amely ampullánként 0.25 g hatóanyagot tartalmaz és ezekből steril vízzel 10 ill. 5 vegyesszázalékos (tömeg/térfogat, G/V) injekciós oldatokat lehet készíteni. Úgy járunk el, hogy 2.5 ml 10 vegyesszázalékos (G/V) hatóanyag-oldatot 2.5 ml-es, illetve 5 ml-es ampullákba töltünk, majd ezeket a szokásos módon liofilizáljuk. Analóg módon állíthatunk elő 0,5 g hatóanyagot tartalmazó száraz ampullákat, melyek 5,0 ml 10 vegyesszázalékos (G/V) vagy 2,5 ml 20 vegyesszázalékos (G/V) vizes oldat készítésére alkalmasak. Ebben az esetben a 10 vegyesszázalékos oldatot 5 ml-es, ill. 2.5 ml-es ampullákba töltjük le és ezeket Iiofilizáljuk. A liofilizálásra kerülő oldatok pl. még 8 % vegyesszázaléknyi (G/V) mannitot is tartalmazhatnak, ez ampullánként 0,2 g, illetve 0,4 g mannitnak felel meg. Az alkalmazott „hatóanyag” az előző vagy alábbi példában leírt bármelyik N-acilezett deferroixaminvegyület lehet. 6. példa N-[cű-Metoxi-(undekakisz-etilén-oxi)-karbonil]-deferrioxamin B. ahol az undekakisz-etilén-oxi-csoport egy olyan -(CH2-CH2-0)n- általános képletű csoportot jelent, melyben n átlagos értéke: 11. 446.0 g deferrioxamin B-metánszulfonátot 4000 ml tetrahidrofurán és 1000 ml desztillált víz elegyében 35-40 °-ra melegítünk, amikor is kissé zavaros oldatot kapunk, melyhez 72,0 g nátrium-karbonátot adunk és ezt követően az elegyet 10 percig keverjük. 2000 ml tetrahidrofuránban lévő 448,0 g polietilénglikol-monometil-éterhez (átlagos molekulatömege kb. 516, az Union Carbide cég Carbowax MPEG 550 nevű terméke, mimellett az alkalmazott sarzs az 1. példa szerintitől különbözik és a polietilénglikol átlagosan 11 egység -CH2-CH2-O- képletű csoportot tartalmaz) hozzáadunk 142,4 g l.l’-karbonil-bisz-lH-imidazolt. Ezután az elegyet 200 ml tetrahidrofuránnal hígítjuk és 16 óra hosszat keverjük. Az így kapott tiszta oldatot 30 perc leforgása alatt hozzácsepegtetjük a deferrioxamin-tartalmú elegyhez, majd 2 óra múlva 1000 ml vízzel hígítjuk, amikor is tiszta oldat keletkezik. Ebben 5 óra múlva nagynyomású folyadékkromatográfiás módszerrel (HPLC) deferrioxamin jelenlétét már nem lehet kimutatni. Az elegyet még 16 órán át 0 ° hőmérsékleten tovább keverjük, ezután a szerves oldószert elpárologtatjuk és a vizes részt liofilizáljuk. A kapott liofilizátumot 40° hőmérsékleten felvesszük 3000 ml metanolba, majd ezt az elegyet 10 percig tartó keverés után szűrjük és metanollal utánamossuk. Ezután 75 perc alatt és 20° hőmérsékleten a tiszta szűrletet 6000 ml diizopropil-éterrel elegyítjük, a keletkezett csapadékot szűrjük, majd a szűrési maradékot 2200 ml diizopropil-éter- metanol (2:1) elegybe felvesszük és 45 percig keverjük. Az így kapott szuszpenziót a továbbiakban már nem lehet szűrni, hanem azt bepároljuk és a maradékot 50-60°-on 2800 ml metanolba felvesszük, még forrón szűrjük és 6000 ml diizopropil-étert adunk a szűrlethez. 10°-ra történő lehűtés után újból szűrést végzünk és a szűrési maradékot 1000 ml 2:1 arányú diizopropil-éter - metanol eleggyel mossuk, ezután szárítjuk és megőröljük. Az anyagot ezután polisztirol-típusú adszorpciós gyantán (Amberlite R XAD-1180) végzett kromatografálással sómentesítjük, ennek során a terméket vízben visszük fel és az eluálást 4:1 - 1:1 arányú víz-izopropanol elegyekkel végezzük. Liofilizálás után egy fehér színű amorf port kapunk, amely fél mól vizet tartalmaz. Elemanalízise a C49H94N6O21 x 0,5 mól H2O bruttó képlet alapján az alábbi eredményt hozta: talált: C=52,87 %; H=8,55 %; N=7,79 %. számított: C=52,91 %; H=8.61 %; N=7,56 %. A termék vízben 25 %-ig, dimetil-szulfoxidban 40 %-ig és metanolban 10 %-ig oldható. HPLC, RT= 10,00 perc. 7. példa N-[(ö-Metoxi-(undekakisz-etilén-oxi)-karbonill-deferrioxamin B, ahol az undekakisz-etilén-oxi-csoport egy olyan -(CH2-CH2-OV általános képletű csoportot jelent, melyben n átlagos értéke: 11. 500,0 g deferrioxamin B-metánszulfonátot 2500 ml desztillált vízben keverünk, amikor is 10 perces keverés után egy tiszta oldatot kapunk. Ezt lehűtjük 10°-ra, majd 5 perc leforgása alatt 500 ml vízben oldva 80 g nátrium-karbonátot adunk hozzá. Szabad állapotban levő deferrioxamin B-vel végzett beoltással egy sűrűn folyó tejes szuszpenziót kapunk, melyet szűrünk. A szűrési maradékot 500 ml vízzel, ezután 500 ml 1:1 arányú víz-aceton eleggyel. végül részletekben összesen 2000 ml acetonnal mossuk, majd ezen műveletek után előbb 16 órán át 40 '-on kb. 20 mmHg (26.4 kPa) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
