201338. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek és azokat tartalmazó gyógyászati készítmények elöállítására
5 HU 201338 B 6 Az alábbi vizsgálat segítségével a 2. példa szerinti peptid telítettséget előidéző hatását határozzuk meg. Him patkányokat a fentiekben ismertetett etetési tréningnek vetünk alá. A 2. pél- 5 da szerinti pepiidet nátrium-klorid-oldatban oldjuk és a patkányoknak intranazálisan beadjuk. Kontrollként CCK-8 nátrium-kloridos-oldattal képezett oldatát alkalmazzuk. Az eredményeket a 2. táblázat tartalmazza. 2. táblázat Kezelés Dózis rag/kg Táplálékfelvétel, elfogyasztott g (és %) 1. etetés 2. etetés Nátrium-klorid-oldat 7.4 ± 0.5 (100) 5.6 ± 0.3 (100) 2. példa szerinti peptid 3 7.5 ± 0.8 (102) 6.1 ± 0.3 (109) 10 5.5 ± 0.6 (74) 6.3 i 0.4 (112) 30 5.8 ± 0.7 (78) 4.3 t 0.6 (76) 100 3.4 ± 0.4 (46) 4.6 ± 0.5 (82) CCK-8 1000 400 4.9 ± 0.7 (66) inaktív 6.3 ± 0.5 (112) Az alábbiakban igazoljuk, hogy a találmányunk szerinti eljárással előállitható pép- 25 tidek enzimes lebontással szemben jobban ellenállnak, mint a CCK-8. Patkány vese metallo-endopeptidázt (0,01 jug) és 5 nmól peptidet 2 umól trisz-HCl-pufferben (pH 7,6) 37 °C-on különböző időtartalmokon át inkubálunk. A 30 peptid lebomlását analitikai HPLC segítségével követjük nyomon és az eredményeket a 3. táblázatban foglaljuk össze. A bomlás mértékét CCK-8 esetében az Asp-Tyr(S03H)-Met-Gly feltételezett termelésére, míg a 2. és 3. 35 példa szerinti peptidek esetében az Ac-Tyr(S03H)-Met-Gly feltételezett termelésére alapítjuk. Peptid példa száma Inkubációs idő (perc) %-os lebomlás (magasság) Csúcsok száma 45 2. 0 0 60 19.4 120 30.3 50 240 56.4 2* 3. 0 0 60 0 120 0 240 0 0 55 CCK-8 0 0 15 6.2 30 33.2 60 69.7 4 * egy kimutatott csúcsot és egy, a szubsztrátummal együtt élűéit csúcsot jelez, amelyet aminosav analízis után a mólarányok alapján differenciálunk. 65 Az (I) általános képletü peptidek és gyógyászatiig alkalmas sóik emberen és állaton a táplálékfelvétel visszaszorítására és ezáltal a testsúly szabályozására vagy csökkentésére alkalmazható. A hatóanyagok intravénásán, szublingválisan, rektálisan, intranazálisan, bukálisan vagy transzdermálisan adagolhatok. Találmányunk tárgya továbbá eljárás humán- vagy állatgyógyászati készítmények előállitására oly módon, hogy valamely (1) általános képletü peptidet és/vagy sóját szokásos gyógyászati hordozó- és/vagy higitóanyagokkal ismert módon összekeverünk. Az injekció formában kikészített (I) általános képletü peptideket előnyösen steril por formájában hozzuk forgalomba, amelyet röviddel a beadás előtt injekciós célokra alkalmas vízben vagy más megfelelő steril hordozóanyagban felveszünk. így pl. intravénás injekció készítéséhez steril vizes izotóniás oldatokat - különösen előnyösen nátrium-klorid izotóniás vizes oldatát - alkalmazhatjuk. A steril port előnyösen liofilizálás útján nyerjük; ez esetben a hatóanyagot célszerűen inert hordozóanyaggal (laktózzal) keverjük össze. Eljárásunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátozzuk. 5
