201302. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piridazodiazepinek és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201302 B 11 12 fid, borán/N,N-dietil-anilin)végezhetjük el. A redukciót előnyösen inert szerves oldószerben, szobahőmérsékleten vagy szobahőmérsékletnél alacsonyabb hőmérsékleten hajthatjuk végre. így pl. birán/tetrahidrofurán komplex felhasználása esetén tetrahidrofuránban, kb- 0-20 °C-os hőmérsékleten dolgozhatunk. Az alkanoilcsoportot a korábbiakban elírt módszerekkel hasíthatjuk le. Az X1 helyén oxigénatomot és R30 helyén fenilalkil-csoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületeket oly módon állíthatjuk elő, hogy a megfelelő, X1 helyén oxigénatomot és R30^ helyén alkilcsoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet szabad karbonsavvá alakítjuk és ezt a vegyületet észterezzük. Az X1 helyén oxigénatomot és R30 helyén alkilcsoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet pl. bázissal vagy- tercier butil-észter esetében - savas kezeléssel alakíthatjuk a szabad karbonsavvá (R30 jelentése hidrogénatom). Bázisként pl. alkálifém-hidroxidokat (pl. nátrium-hidroxidot, kálium-hidroxidot) vagy ammónium-hidroxidot alkalmazhatunk és a bázikus kezelést szobahőmérséklet és a reakcióelegy forráspontja közötti hőmérsékleten hajthatjuk végre; előnyösen szobahőmérsékleten dolgozhatunk. Az R30 helyén tercier butilcsoportot tartalmazó észereket előnyösen vízmentes trifluor-ecetsawal, szobahőmérsékleten végzett kezeléssel alakíthatjuk a megfelelő szabad karbonsavakká. A kapott karbonsavat önmagukban ismert módszerekkel észterezhetjük; így pl. a megfelelő alkohollal (pl. benzil-alkohollal stb.) ásványi sav (pl. sósav) jelenlétében kezelhetjük vagy a megfelelő diazolalkánnal (pl. fenil-diazzometánnal) reagáltathatjuk. Az fii) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált, X1 helyén -NH-csoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületek ismertek. Az (ii) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált (V) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. Az (iii) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált (VI) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. Az R3 helyén alkilcsoportot tartalmazó vegyületek a (Via) általános képletnek felelnek meg. Az R3 helyén hidrogénatomot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületeket a (Via) általános képletű vegyületekből önmagában ismert módon, bízással történő kezeléssel vagy - R31 helyén tercier butilcsoportot tartalmazó (Via) általános képletű vegyületek esetében - vízmentes trifluor-ecetsawal állíthatjuk elő. Az R3helyén fenil-alkil-csoportot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületeket a megfelelő, R3 helyén hidrogénatomot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületekből önmagában ismert módon végzett észterezéssel állíthatjuk elő. Az észterezést a megfelelő alkohollal (pl. benzilalkohollal stb.) ásványi sav (pl. sósav stb.) jelenlétében vagy a megfelelő diazo-alkánnal (pl fenildiazometánnal) hajthatjuk végre. Az (iii) eljárásnál felhasznált (VII) általános képletű kiindulási anyagok ismert vegyületek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. Az (I) általános képletű vegyületek és gyógyászatilag alkalmas sóik antihipertenzív hatással ren-» delkeznek. Ezek a vegyületek gátolják az arígiotenzin I-t angiotenzin-II-é átalakító angiotenzin-átala- 5 kító enzim (ACE) működését és ezért angiotenzinnel összefüggő hipertenzió csökkentésére vagy enyhítésére alkalmazhatók. Az (I) általános képletű vegyületek angiotenzinátalakító enzim gátló hatását az alábbi in vitro teszt- 10 tel igazoljuk: Az alkalmazott teszt-módszer Cushman és Cheung módszerén alapul (Biochem. Pharmacol. 20, 1637-1648) és tartalmazza a Hayakari és tsai (Anal. Biochem. 84,361-369) által bevezetett módosításo- 15 kát. A szubsztrátumot (hippuril-hisztidil-leucin, 2 millimól) angiotenzm-átalakító enzimmel inkubáljuk különböző koncentrációkban jelenlevő tesztvegyület jelenlétében vagy anélkül. A teszt-vegyületet 300 millimól nátrium-kloridot tartalmazó ká- 20 lium-foszfát-pufferben (pH 8,3; 100 millimól) alkalmazzuk. Az inkubálást 37 °C-on 24 percen át végezzük (összérték 500 pj). (Amennyiben tesztvegyületként egy észtert alkalmazunk, ezt a teszt elvégzése előtt célszerűen lehasítjuk, sertésmáj- 25 észteráz segítségével.) A reakciót 3 ml kálium-foszfát-puffer (pH 8,3; 200 millimól) 0 °C-on való hozzáadásával leállítjuk. Az elegyhez 2,4,6-triklór-sztriazin (3%) 1,5 ml dioxánnal képezett oldatát adjuk és a sárga kromofor teljes kialakulásáig kever- 30 jük. A mintákat a képződő csapadék eltávolítása céljából centrifugáljuk. A 2,4,6-triklór-sz-triazin és szabad hippursav reakciójakor képződő sárga kromofort spektrofotometriásán 382 nm mellett mérjük. IC50 értéknek a teszt-vegyület azon koncentrá- 35 cióját tekintjük, amely a hippuril-hisztidil-leucinnak az angiotenzin-átalakító enzim által a fenti körülmények között bekövetkező hasítását 50%-kal csökkenti. A kapott eredményeket az I. táblázatban foglal- 40 juk össze. I. táblázat Teszt-vegyület IC50 (nM) A-vegyület 9,6 B-vegyület 5,0 C-vegyület 2,4 D-vegyület 14,0 fia alábbi teszt-vegyületeket alkalmazzuk: A-vegyület = oktahidro-9(S)-foszfono-metil)- 10-oxo-6H-piridazo[l,2-a][l,2]diazepin-l(S)-kar bonsav, 55 B-vegyület = 9(S)-{[hidroxi-(fenetil)-foszfinil]amino}-oktahidro-10-oxo-6H-piridazo[l,2-a][l,2 ]diazepin-l(S)-karbonsav-dinátriumsó; C-vegyület = 9(S)-[hidroxi-(4-fenil-butil)-foszfinil]-oktahidro-10-oxo-6H-piridazo[l,2-a][l,2]di 60 azepin-l(S)-karbonsav-dikáiliumsó; D-vegyület = 9(S)-{[hidroxi-[4-(l-imino-etilamino)-fenetil]-foszfinil-metil}-6,10-dioxi-6H-pir idazo[l,2-a][l,2]diazepin-l(S)-karbonsav. Az (I) általános képletű vegyületeket és gyógyá- 65 szatilag alkalmas sóikat a gyógyászatban a ható-7
