201117. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fenil-(2,3-epoxi-1-propil)-éterek sztereospecifikus előállítására
7 HU 201117 B 8 tett oldatát visszafolyó hűtő alatt 3 óra hosszat forraljuk, majd az oldószereket eldesztilléljuk. A kapott olajat 10 ml diklór-metánban oldjuk, és 10 ml 0,2 n sósavoldatba extraháljuk, amelyet utána 2 x 10 ml diklór-metánnal mosunk. A savas oldatot 3 ml 2 n nátrium-hidroxid oldattal meglúgositjuk, és a terméket 10 ml diklór-metánba extraháljuk. A diklór-metános extraktumot nátrium-szulfáton szárítjuk, és az oldószer ledesztillálásával ragacsos szilárd anyaghoz jutunk. A terméket hexánból átkristályosítva 260 mg (-)-metoprololt kapunk, amelynek olvadáspontja 42-45 °C; [oC]25d = -5,46° (c = 1,01; etanol). A kémiai úton előállított (±)-metoprolol olvadáspontja 49-51 °C, és optikailag inaktív, amint várható. A (-)-metoprolol protonmágneses rezonanciaspektruma és tömegspektruma (2. és 3. ábrák) és a (t)-metoprolol hasonló adatai (itt nem mutatjuk be külön) egyeznek a kívánt szerkezettel, és megkülönböztethetetlenek a metoprolol-tartarát kereskedelmi mintából extrahált (±)-metoprolol (olvadáspont: 48,5-50,5 °C) protonmágneses rezonanciaspektrumétól. A (-)-metoprolol optikai tisztaságát S-leucil-diasztereomer amid-származékának fordított fázisú nagyhatékonyságú folyadékkromatográfiás (HPLC) oszlopon [Lichrosorb RP8/10 *im), 25 cm x 1/4” (0,635 cm) külső átmérő, 4,9 mm belső átmérő, mozgó fázis: 40% acetonitril 3,0 pH-ja 0,1 mólos nátrium-foszfát pufferban, 2,5 ml/perc, U. V. detektálás] végzett elválasztásával határozzuk meg. A származékot úgy állítjuk elő, hogy metoprololt (terc-butoxi-karbonil)-S-leucin (BOC-S-leucin) szimmetrikus anhidridjével reagáltatunk, majd ezt követően a BOC-csoportot trifluor-ecetsavval eltávolítjuk, ahogy J. Hermansson és C. J. Von Bahr a J. Chrom., 227, 113 (1982)-ben leírják. A (t)-metoprololból készített hasonló minta analízise két egyenlő intenzitású csúcsot eredményez, amint ez racemát esetében várható. A (-)-metoprololból készített minta 97,7:2,3 intenzitásarányú két csúcsot eredményezett, ami 95,4%-os optikai tisztaságnak felel meg. 3. példa AHil-f 4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éter átalakítása (+)-glicidil-[ 4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éterré Pseudomonas aeruginosa NCIB 12036-tal, majd ezt követően ennek átalakítása (-)-metoprolollá. Pseudomonas aeruginosa NCIB 12036 szuszpenziót készítünk úgy, hogy 0,75% nétrium-laktátot és 0,05% dietoxi-metánt tartalmazó ASM ásványi sós táptalajban 24 óráig 30 °C-on tenyésztett sejteket az eredeti sejttenyészet térfogata egytizedének megfelelő ASM táptalajban reszuszpendálunk. 1100 ml ilyen sejtszuszpenziót 3,3 g allil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éterrel 30 °C-on 220 ford./perc-nél inkubálunk. A reakcióelegyet 24 óra múlva 500 ml diklór-metánnal extraháljuk, az extraktumot nátrium-szulfáton szárítjuk, és az oldószer ledesztillálása után 2,67 g olajat kapunk. Szilikagélen végzett tisztítás (lásd 1. példa) 930 mg (+)—glicidil— -l4-(2-metoxi-etil)-fenil]-étert eredményez; [oC]25d = +8,21° (c = 0,943; etanol). Az Eu(hfc)3 europium shift-reagens jelenlétében protonmágneses rezonanciaspektroszkópiával mért optikai tisztaság (lásd 1. példában) a protonmágneses rezonanciaspektrum mérések kísérleti hibáján belül 100%-nak bizonyul. 694 mg ( + )-glicidil-[4-(2-metoxi-etil)--fenil]-éterből (a 2. példában leirt módszer szerint) 579 mg (-)-metoprololt állítunk elő, amelynek olvadáspontja 44-46 °C; (oC]25u = = -5,49° (C = 1,02; etanol). Az optikai tisztaság (a 2. példában leírt módszerrel meghatározva) 98%-nak bizonyul. Az anyalúg kristályosításával 113 mg (-)-metoprololt kapunk, amelynek optikai tisztasága 96%. 4. példa Allil-[4~(2-metoxi-etil)-fenil]-éter átalakítása Pseudomonas aeruginosa NCIB 8704-gyel {+)-glicidil-l 4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éterré, majd ennek átalakítása (-)-metoprolollá. 200 ml Pseudomonas aeruginosa NCIB 8704 sejtszuszpenziót (készítés a 3. példában leírtak szerint) inkubálunk 2 g a.llil—[4—(2— -metoxi-etill-fenilj-éterrel 30 °C-on 24 óráig, majd a szuszpenziót (a 3. példában leírtak szerint) extraháljuk, és tisztítjuk. Ily módon 91 mg (+)-glicidil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-étert kapunk. Az epoxid Eu(hfc)a europium shift-reagens jelenlétében protonmágneses rezonanciaspektroszkópiával mért optikai tisztasága (lásd 1. példa) a protonmágneses rezonanciaspektroszkópiás mérések hibáin belül 100%-nak bizonyul. 76 mg (+)-glicidil-[4-(2-metoxi-etil)-fenil]-éterből (a 2. példában leírt módszer felhasználáséval) 55 mg (-(-metoprololt állítunk eiő, amelynek olvadáspontja 42-45 °C, foC]25d = -4,93° (c = 0,944; etanol), S-leucil-diasztereomer származékának (a 2. példában leírtak szerint) nagyhatékonyságú folyadékkromatográfiával meghatározott optikai tisztasága 98,8%. Az anyalúg bepárlásával 17 mg 95,2% optikai tisztaságú (-(-metoprololt kapunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
