201038. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új gamma-amino-vajsav transzamináz inhibitorok előállítására
HU 201038 B adunk hozzá részletekben, olyan sebességgel, hogy szabályozzuk a habzást. Mikor a beadagolást befejeztük, elvesszük a hűtőfürdőt és a reakcióelegyet egy éjszakán át keverjük. Ezután a reakcióelegyet eredeti térfogatának felére koncentráljuk, majd 100 ml vízzel és 250 ml etil-acetáttal hígítjuk. Ezt az elegyet rázótölcsérbe öntjük, a fázisokat szétválasztjuk és a vizes fázist még egyszer mossuk 250 ml etil-acetáttal. Ezután 350 ml etil-acetátot teszünk a választótölcsérbe és a vizes fázist megsavanyítjuk 150 ml 1 mólos sósav hozzáadásával. A megsavanyítást úgy végezzük, hogy a savat 25 ml-es részletekben adjuk hozzá, minden részlet után összerázva az elegyet. A megsavanyított vizes fázist ezután kétszer 100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat egyszer 0,56 mólos sósavval és egyszer sós vízzel mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és egy rotációs bepárlóban olajos maradékig bepároljuk. Vákuumban tovább folytatva a bepárlást, megkapjuk a kívánt terméket, amely olajos anyag. (45,1 g, 86%). Éteres-hexánnal végzett triturálás után fehér szilárd anyagot kapunk. Olvadáspont: 74-77 °C. NMR (CDCb): 6 1,46 (s, 9H, -C(CH3)3), 1,84- 2,60 (m, 4H, -CH2-CH2), 3,67 (s, 1H, -OCH3), 4,08-4,50 (m, 1H, -CH-N), 5,10-5,47 (m, 1H, -NH), 11,00 (br s, 1H, -CO2H). Elemanalízis (C11H19NO6): számított: C: 50,57, H: 7,33, N: 5,36%, talált: C: 50,40, H: 7,69, N: 5,08%. B lépés: 4-[[(terc-butil-oxi)-karbonil]-amino]-5- hidroxi-pentánsav-metilészter 24,8 g (94,9 mmól) N-t-butoxikarbonil-L-glutaminsav-y-metilésztert argon atmoszférában 400 ml tetrahidrofuránban feloldunk és -23 °C hőmérsékletre hűtjük széntetraklorid-száraz jég fürdőn. Az oldathoz keverés közben 13,2 ml (94,9 mmól) trietil-amint adunk, majd 5 perc után 12,3 ml (94,9 mmól) izobutil-klór-formiátot fecskendezünk bele. Ezt igen erőteljes keverés közben végezzük: a beadagolás fele idejénél fehér csapadék kezd kiválni. A kapott szuszpenziót -23 °C hőmérsékleten 10 percen át keverjük, majd a keverést abbahagyjuk és a csapadékot 5 percig hagyjuk ülepedni. Ezt a szuszpenziót ezután átvezető kapilláris és argon áram segítségével átvisszük egy erőteljesen kevert vizes nátrium-bórhidrid oldatba (10,8 g, 0,28 mól nátrium-bórhidrid 250 ml vízben), amelyet előzőleg jeges fürdőn 0-5 °C hőmérsékletűre hűtöttünk. Ezt a nátrium-bórhidrid oldatot egy háromnyakú, keverővelés belső hőmérővel ellátott három literes lombikban készítjük el. A szuszpenziónak a nátriumbórhidrides oldathoz való adagolását olyan sebességgel végezzük, hogy a belső hőmérséklet az egész idő alatt 15 °C alatt maradjon. Az elegy habzik, a nátrium-bórhidrid oldathoz jeget adunk a hűtés elősegítése céljából. 40 perccel a beadagolás befejezése után a reakcióelegyet 500 ml metilén-kloridot és 300 ml vizet tartalmazó választótölcsérbe öntjük. A fázisokat elválasztjuk, és a lúgos vizes fázist kétszer 250 ml diklór-metánnal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 400 ml, 6:1:1 arányú sós víz:l mólos sósav:víz eleggyel mossuk, 7 magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük, és egy rotációs bepárlóval olajos maradékig koncentráljuk. A kívánt vegyületet víztiszta olaj alakjában gyors folyadékkromatográfiával kapjuk meg. Ehhez egy 6x15 cm oszlopot, eluensként először 1 liter 30%-os etil-acetátos hexánt, majd 70%-os etil-acetátos hexánt használunk. Termelés: 19,3 g, 82%. NMR (CDCI3): 8 1,41 (s, 9H, -C(CH3)3), 1,55- 2,08 (m, 2H, -CH2-), 2,41 (t, 2H, J = 7,5Hz, - CH2CO2), 3,48-3,79 (m, 3H, -CH-N és -CH2-O), 3.63 (s, 3H, -OCH3), 5,06-5,33 (m, 1H, -NH). Elemanalízis (C11H21NO5): számított: C: 53,43, H: 8,56, N: 5,66%, talált: C: 53,51, H: 8,49, N: 5,49%. C lépés: 4-[[(terc-butil-oxi)-karbonil]-amino]-5- [[(l,l-dimetil-etil)-dimetil-szilil]-oxi]-pentánsavmetilészter Az alkoholt (19,25 g, 77,8 mmól) 200 ml diklórmetánban oldjuk és az oldatot jeges fürdőn lehűtjük. 11,38 g (75,5 mmól) t-butil-dimetil-szilil-kloridot, 670 mg (5,5 mmól) 4-dimetil-amino-piridint és 14,1 ml (0,10 mól) trietilamint adunk hozzá ebben a sorrendben, keverés közben. Ezután a hűtőfürdőt eltávolítjuk, a reakcióelegyet pedig egy éjszakán át keverjük szobahőmérsékleten. Ezt követően a reakcióelegyet rázótölcsérbe öntjük, amely 200 ml diklór-metánt és 150 ml vizet tartalmaz. A fázisokat elválasztjuk és a szerves fázist kétszer 150 ml 0,5 mólos sósavval, egyszer pedig sós vízzel mossuk. A szerves fázist ezután magnézium-szulfát felett szárítjuk, szűrjük és rotációs bepárlóban barna olajig bepároljuk. A kívánt terméket víztiszta olaj formájában gyors folyadékkromatográfiával kapjuk meg (7x15 cm-es oszlop, eluens: 12%-os etil-acetátos hexán). Termelés: 21,8 g, 80%. NMR (CDCI3): 8 0,03 (s, 6H, -Si(CH3)2), 0,89 (s, 9H, -SiC(CH3)3), 1,42 (s, 9H, -OC(CH3)3), 1,67-2,00 (m, 2H, -CH2-) 2,39 (t, 2H, J = 7,5Hz, -CH2CO2), 3,48-3,77 (m, 3H, -CH-N és -CH2-O), 3.63 (s, 3H, -OCH3), 4,42-4,78 (m, 1H, -NH). Elemanalízis (C17H35NSÍO5): számított: C: 56,47, H: 9,76, N: 3,87%, talált: C: 56,52, H: 9,61, N: 4,14%. D lépés: l,l-dimetil-etil-[l-[[(l,l-dimetil-etil)szilil]-oxi]-metil]-4-metoxi-4-[[(trimetil-szilil)-oxi] -3-butenil]-karbamát 19,44 ml (0,14 mól) diizopropil-amint 150 ml tetrahidrofuránban feloldunk és -78 °C hőmérsékletre hűtjük argon atmoszférában. 74,5 ml (0,13 mól, 1,78 mólos hexános oldat) n-butil-lítiumot fecskendezünk bele és az oldatot 15 percig keverjük. Az előző lépésben kapott 21,8 g (60,29 mmól) észtert 30 ml tetrahirofuránban feloldjuk és -78 °C hőmérsékletre lehűtjük és ezt a lehűtött oldatot 8-10 perc alatt hozzáadjuk az előző oldathoz átvezető kapilláris és argon áram alkalmazásával. A kapott oldatot 5 percig keverjük, majd 3-5 perc alatt 23,0 ml (0,18 mól) trimetil-szilil-kloridot fecskendezünk hozzá. A reakcióelegyet 1-1,5 órás időtartam alatt lassan hagyjuk szobahőmérsékletűre felmelegedni. A fehér szuszpenziót szobahőmérsékle-8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
