201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201032 B kező 7 és 8 általános képletű 3-halogén-4,5-dihidro-izoxazol-intermedierek származékait (amidjait, peptidjeit) standard módszerekkel állítjuk elő, amelyeket a „The Paptides: Analysis, Synthesis and Biology (1. kötet, 1979, Gross and Meienhofer, Ed.) és a „Chemistry of the Amino Acids (2. kötet, 1961, Greenstein and Winitz, Ed. John Wilex and Sons) kézikönyvekben megtalálhatunk. N-Védett peptid- vagy N-védett alfa-aminosavolefin-amidját ügy állítjuk elő, hogy az N-védett pepiidet vagy N-védett alfa-aminosavat és az olefin-amint izobutil-klór-formiáttal N-metil-piperidinben (ld. „The Peptides..., fentebb) vagy EDCI- vel dimetil-amino-piperidinben (Id. M.K. Dhaon, R. K. Olsen és K. Ramasamy, J. Org. Chem., 1982, 47,1962) kapcsoljuk. A kapott telítetlen amidot ezután minimális mennyiségű vizet és feleslegben vett nátrium-hidrogén-karbonátot tartalmazó etil-acetálban oldjuk, és részletekben dibróm-formamidoximot adunk hozzá Vyas és munkatársai módszerének megfelelően. A feldolgozás és kovasavgélen való tisztítás után a kívánt 3-bróm-4,5-dihidro-izoxazol-származékot kapjuk. A klór-analógok esetében az általános eljárás azzal bővül, hogy az álként és a diklór-formaldoximot tartalmazó tetrahidrofurános oldathoz kb. 60 és kb. 65 °C közötti hőmérsékleten kis részletekben ezüst-nitrátot adunk. A Wade és munkatársai által leírt standard feldolgozással a kívánt 3-kIór-4,5-dihidroizoxazol-származékot kapjuk. A klór-analógokat halogéncserével is, azaz a 3-bróm-4,5-dihidroizoxazolok hidrogén-kloriddal telített éterrel való kezelésével is előállíthatjuk (Id. K. C. Kelly, I. Schietter, S. J. Stein, W. Wierenga, J. Am. Chem. Soc. 1979,101,1054). Az ismertetett vegyületek és közbenső termékek elkülönítését és tisztítását kívánt esetben bármely elválasztási vagy tisztítási módszerrel elvégezhetjük, ilyen módszer például a szűrés, extrakció, kristályosítás, oszlopkromatografálás, vékonyrétegkromatográfiás vagy vastagréteg-kromatográfiás módszer, valamint ezen eljárások kombinációi. A speciális elválasztási és elkülönítési eljárásokat a Példákban mutatjuk be. Azonban természetesen más, ekvivalens elválasztási vagy elkülönítési módszer is használható. A sókat is hagyományos módon különítjük el. Például a reakcióelegyet szárazra pároljuk, és a sókat szokásos módszerekkel tisztítjuk tovább. A szabad bázis formájú (I) általános képletű vegyületeket a megfelelő szerves vagy szervetlen sav, például foszforsav, piroszőlősav, sósav vagy kénsav és hasonlók sztöchiometriai feleslegével kezelve savaddíciós sókká alakítjuk. Általában a szabad bázist poláros szerves oldószerben, így etanolban vagy metanolban oldjuk, és a savat hozzáadjuk. A hőmérsékletet kb. 0 és 100 °C között tartjuk. A kapott savaddídós só spontán kiválik, vagy kevésbé poláros oldószer hozzáadásával kicsapható. Az (I) általános képletű vegyületek savaddídós sóit a megfelelő szabad bázissá bonthatjuk oly módon, hogy általában vizes oldószer jelenlétében, kb. 0 és 100 °C közötti hőmérsékleten kálium-karbonát vagy nátrium-hidroxid sztödometriai feleslegével kezeljük a sót. A szabad bázist szokásos módon, például szerves oldószerrel extrahálva különítjük 9 el. Az (I) általános képletű vegyületek sóit a savak eltérő oldhatósága, Ulékonysága vagy savassága alapján a megfelelően töltött ioncserélő gyantával való kezeléssel egymásba alakíthatjuk. Például az (I) általános képletű vegyület sójának egy, a só savkomponensénél alacsonyabb pKa értékű sav csekély sztöchiometriai feleslegével való kezelésével az átalakítás megoldható. Ezt az átalakítást kb. 0 és az eljárás közegéül választott oldószer forráspontja közötti hőmérsékleten végezzük. A találmány szerinti vegyületeket optikailag aktív formában vagy racemátok vagy diasztereomer elegyek formájában állíthatjuk elő. Ha a leírásban másként nem határozzuk meg, a vegyületek racém vagy két diasztereomer elegyének formájában vannak jelen. Kivétel a m-tirozm-analóg, mivel ez az aminosav a kereskedelemben D,L-formában könnyen hozzáférhető, és így ebből kiindulva négy izomert kapunk. Azonban a találmány terjedelme nincs semmiképpen az izomerkeverékekre korlátozva, hanem magábafoglalja a vegyületek egyes optikai izomeijeit is. A legtöbb esetben az (I) általános képletű izomereket kovasavgélen, fél-preparatív HPLC technikával (amelyhez etil-acetát és hexán vagy más alkalmas oldószerek elegyét használjuk eluálószerként), vagy frakdonált kristályosítással választjuk el. Más esetben a 2 és S általános képletű közbenső temékeket királis rezolválószerekkel, például mandulasavval rezolválhatjuk, így a tiszta izomereket kapjuk. Minden reakdóvázlatra vonatkozóan R , R és R3 jelentése azonos az igénypontokban megadottal. R2X’ olyan reagens, amellyel az R-nek megfelelő amino-védőcsoportot az aminocsoportra felvihetjük. Az X’ kilépőcsoport, például halogénatom. A megfelelő ilyen reagenseket és védőcsoportokat a szakemberek jól ismerik. Az I. reakcióvázlaton a 2 általános képletű kiindulási anyag előnyösen egy N-védett alfa-aminosav, amely a kereskedelemben a Sigma Chemical Company-től vagy más cégtől beszerezhető, vagy az 1 általános képletű szabad aminosavból az I. reakcióvázlat A) lépésének megfelelően az aminocsoport átalakításával előállítható. Az I. reakcióvázlat A) lépése az alfa-amino-csoport helyettesítésére vonatkozik. Ez a lépés az aminosav-kémiában széles körben ismert standard művelet. Például ha 1 általános képletű alfa-aminosavat BOC-ON-nal /2-(terc.butoxi-karbonil-oxi-imino)-2-fenil-acetonitril/, benzil-klór-formiáttal (mindkettő beszerezhető az Aldrich Chemical Co.től), mezil-kloriddal vagy tozil-kloriddal kondenzáltatunk, akkor olyan 2 általános képletű vegyületet kapunk, amelyben R2 terc-butoxi-karbonil-, benzil-oxi-karbonil-, mezil- vagy tozilcsoport. A 2 képletű allil-amin a kereskedelemben kapható. A 4 általános képletű olefinamid (B lépés) a 2 általános képletű vegyület aktivált származékából képződik. Ez a lépés az aminosav- vagy peptid-kémiában széles körben ismert standard művelet (ld. „The Peptides ...). A 2 általános képletű vegyület karboxilcsoportját DCC-vel, EDCI-vel, N,N’-kar-10 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
