201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
bonil-diimidazollal, izobutil-klór-formiáttal N-metil-piperidinben vagy N-metil-morfolinban stb. aktiváljuk. Az előnyös módszer a vegyes anhidrides kapcsolás, amelyhez izobutil-klór-formiátot és N- metil-piperidint használunk. A kapott származékot a 2 képletű olefm-aminnal reagáltatva a 4 általános képletű vegyületet kapjuk. A C lépés a nitril-oxid-reagens és a 4 általános képletű olefín-szubsztrát (2+3) cikloaddíciós reakciója. Bróm-nitril-oxidot például dibróm-formaldoximból és nátríum-hidrogén-karbonátból in situ állítunk elő. A dibróm-formaldoximot glioxilsavból, hidronl-aminból és brómból készíthetünk egylombikos eljárással Vyas és munkatársai módszere szerint. A dkloaddídót szerves oldószerben, előnyösen etil-acetátban kb. 10 és kb. 30 °C közötti hőmérsékleten, de előnyösen 23 °C-on 5-10 ekvivalens, előnyösen 6 ekvivalens nátrium-hidrogén-karbonáttal végezzük, amely kb. 2-5% vizet tartalmai. A dibróm-formaldoximot kis részletekben, 10-60 perc alatt, előnyösen kb. 30 perc alatt adagoljuk a reakcióelegyhez. Általában kb. 2-4 ekvivalens szükséges a kiindulási vegyület (I) általános képletű termékké való teljes átalakításához. Az (I) általános képletű vegyület elkülönítésére és tisztítására a reakciótermék feldolgozásakor kerül sor. így a szerves fázist vízzel, 5%-os nátriumhidrogén-karbonát-oldattal, telített vizes nátriumklorid-oldattal mossuk és a magnézium-szulfáton szárítjuk. Szűrés, bepárlás és eül-acetát és hexán vagy kloroform és hexán elegyéből való kristályosítás után kristályos terméket kapunk. Más esetben a kristályosítási lépést megelőzően szükséges lehet a termék kovasavgélen (SÍO2) végzett kromatográfiás tisztítása. A 3-bróm-4,5-dihidro-izoxazolok brómatomját más csoportokkal helyettesíthetjük. A (2+3) cikloaddíciós reakcióban elvilag más nitril-oxid-reagenst is használhatunk. így például a 3-feniIszulfonil-4,5-dihidro-izoxazolt benzol-szulfonil-karbonitril-oxid és olefin-szubsztrátok reakciójával állíthatjuk elő (ld. PA. Wade, H. K. Yeu, S. A. Hardinger, M. K. Pillay, N. V. Amin, P. D. Vail és S. D. Morrow, J. Org. Chem. 1983.48,1976 és P. A. Wade és H. R. Hinney, J. Amer. Chem. Soc., 1979,101, 1320). Az -S(0)2R csoportokat a 3-alkil-tio-4,5-dihidroizoxazol meta-klór-perbenzoesawal vagy kálium-permanganáttal való oxidációjával is kialakíthatjuk. Amennyiben X klóratomot jelent, a cikloaddíciós reakciót előnyösen tetrahidrofuránban kb. 50 és 70 °C közötti hőmérsékleten, előnyösen 60 °C-on végezzük oly módon, hogy Wade és munkatársai módszerének megfelelően kb. 4-6 ekvivalens ezüstnitrátot adunk kis részletekben az alkén-szubsztráthoz és a diklór-formaldonm-reagenshez. A kiindulási alkén teljes átalakulása után metilén-kloridot adunk az elegyhez, majd celiten szűrjük és bepároljuk. A termék elkülönítése és tisztítása a fentiek szerint történik. AII. reakcióvázlat az (I) általános képletű termékek egy másik előállítási módját szemlélteti. A D lépésben az olefin amint az aminocsoport átalakítására R’X’ általános képletű vegyülettel — a í B képletben R’ jelentése azonos az R* jelenté-^ í > . X’ kilépőcsoport, például klóratom—reagáitaej Ezt a reakciót az I. reakcióvázlat A lépéséhez 'z sonló módon végezzük. Ebben az esetben a di(terc butil)-dikarbonát az előnyös reagens, amelynek egy ekvivalensét adjuk a 2 képletű aminhoz szerves oldószerben, előnyösen éteben vagy metilén-kloridban, szobahőmérsékleten. A reakcióelegy bepárlása után 6 általános képletű vegyületet kapunk. Az E lépés a (2+3) cikloaddíciós reakció, amely pontosan úgy megy végbe, ahogy azt fentebb leírtuk. Az X helyettesítőt ennél a lépésnél célszerű más csoporttal, így pL etil-tio-csoporttal lecserélni, (ha a 2 általános képletű vegyületben X=Br) oh módon, hogya2általános képletű vegyületeta meg felelő etil-tioláttal stb. előnyösen tetrahidrofuránban vagy metanolban kb. 20 és 50 °C-on reagáltatjuk. Az F lépésben a 2 általános képletű vegyületből az amino-védőcsoportot, azaz az R’ csoportot eltá volítjuk. Ha R2 Boc csoport, az eltávolítására több lehetőség kínálkozik; a vegyületet 20%-os metilén kloridos trifluor-ecetsawal, hangyasavval, éterben vagy etil-acetátban toluolszulfonsawal vagy éter ben, tetrahidrofuránban vagy etil-acetátban sósav val kezeljük. Ha R2 Cbz-csoport, a reakciót előnyösen anizolban trifluor-ecetsawal végezzük (Id. R.B. Silverman, M. W. Holladay, J. Am. Chem. Soc. 1981,1Q2» 7357). R’ eltávolítására más, a szakirodalomban ismert módszert, például hidrogénezés hidrogén-fluoridos kezelést stb. is használhatunk A S általános képletű amint ebben a szakaszban például mandulásawal rezolválhatjuk. Kívánt esetben a 2 és S általános képletű közben ső terméket szokásos rezolválási módszerekké tiszta sztereoizomeijeire bonthatjuk például oly módon, hogy ezen vegvületek optikailag aktív savval képezett diasztereomer sóit (például frakd nált kristályosítással) elválasztjuk. Ilyen optikailag aktív savak például a kámfor-10-szulfonsav, 2- bróm-kámfor-pi-szulfonsav, kámforsav, metoxi ecetsav, borkősav, almasav, mandulasav, diacetiíborkősav, pirrolidin-5-karbonsav és hasonlók optí kailag aktív formái. A G lépésben a 8 általános képletű amint N-vf - dett alfa-aminosawal vagy pepiiddel kondenzáljuk, előnyösen a fentebb leüt vegyes anhidrides módszerrel, így (I) általános képletű vegyületet kapunk. A reakciót megfelelő poláros szerves oldószerben, kb. 0 és -20 °C közötti hőmérsékleten végezhetjük Például N-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninho2 metilén kloridban -20 °C-on N-metil-piperidh' vagy N-metil-morfolint, majd izobutil-klór-formiátot adunk. A 8 általános képletű metilén-kioridbia adjuk ezután a fenti elegyhez és hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni A feldolgozást úgy végezzük, hogy a szerves fázist vízzel, 5%-os sósavval 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldatta! mos suk, majd szárítjuk, így a kívánt kapcsolt terméket kapjuk. Áz (I) általános képletű vegyülcteket a ül. re ik cióvázlat szerint is előállíthatjuk. Eszerint az (F) általános képletű vegyületet a védőcsoport eltávolítására például 20%-os trifluor-ecetsawal kezeljük szerves oldószerben, például metilén-kloridbas, ö 12 20103: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
