201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201032 B a termék kikristályosodik. Az elkülönített kristályokat hideg, 1:3 térfogatarányú etanol-hexáneleggyel mossuk, majd vákuumban, 40 °C-on megszárítjuk. Az így kapott cím szerinti vegyület 149- 150 °C-on olvad. 10. példa Készítmény helyi alkalmazásra 25 Komponensek: Tömeg% Hatóanyag Zß Klucel (hidroxi-propil-cellulóz) 2^5 Diizopropil-adipát 10 Etanol 80 Propilénglikol 5 Á komponenseket a Klucel kivételével szobahőmérsékleten összekeverjük, hogy a hatóanyag feloldódjon. Ezután a Klucelt diszpergáljuk benne, és hagyjuk gélesedni egy éjszakán át. ÍZ példa Vizsgálatok mexikói szőrtelen kutyával 2,5% 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomer keverék formájában), 2,5% Klucelt, 10% diizopropil-adipátot, 80% etanolt és 5% propilénglikolt tartalmazó gélt naponta egy alkalommal és 14 napon át alkalmazunk két kutya esetében, és a mitesszerszerű elváltozás nagyobb része és sok „white-head-like lesion letisztult. A 2^% ő-jN“(bemdl-oxi-karbonil)-L-fenilalaninainido-metd]-3 -klór-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomer keverék formájában) tartalmazó hasonló gél szintén jó tisztító hatást mutatott, amikor két kutyát 14 napon át, napi egy alkalommal kezeltünk vele. Maga a gél egyik esetben sem okozott jelentős tisztulást. A 2ß% 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomerek keveréke formájában) vagy 2^% 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalattinaimdometil]-3-klór-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomer keverék formájában) vagy 2,5% 5-[N“-(benzil-oxikarbonil)-L-para-tiro2Ínamido-metil]-3-bróm-44 -dihidroizoxazolt (diasztereomer keverék formájában) és 40% dimetil-izoszorbidemet, 55% etanolt és2^% carbomer 940-t tartalmazó gélek is ígéretes eredményeket mutattak két kutya esetében. Az egyiknél részleges letisztulás mutatkozott, és a másiknál az elváltozások nagyrésze megszűnt. A gél magában nem volt hatásos. ÍZ példa Vizsgálatok rágcsálók fülén A következő, találmány szerinti vegyületeket in vivo alkalmaztuk rágcsálók fül- és hátbőrén több kísérletben: 5-[Na-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalanmami do-melil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomerek keveréke); 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninanii do-metil]-3-klór-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomerek keveréke); S-JN^Íbenzil-oxi-karbonilJ-L-para-tirozinami do-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (diasztereomerek keveréke); 5-[Not-(benzil-ojá-karbonii)-L-fenilalaninami do-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (polárosabb diasztereomer) és 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenilalaninanii do-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt (kevésbé poláros diasztereomer). A vegyületeket 5 tömeg/térfogat%-os acetonos oldat formájában alkalmaztuk. A felhámot összegyűjtöttük, és a transzglutamináz-aktivitást az irodalomban leírt, elfogadott eljárások szerint határoztuk meg (ld. De Young és Ballaron, J. of Invest. Dermatology, 22 /1982/). A kevésbé poláros diasztereomer kivételével minden vizsgálati vegyület 70-95% közötti transzglutamináz-aktivitás-gátlást mutatott. 13. példa Az (I) általános képletű vegyületek toxicitása 5-5 hím és 5-5 nőstény CDI egérből álló 3 csoport minden tagjának 10 mg/kg 5-[Na-(benzil-oxikarbonil)-L-fenilalaninamido-metU]-3-bróm-4^dihidroizoxazolt vagy 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)L-para-tirozinainido-metil]-3-klór-4,5-dihidroizo xazolt adtunk intraperitoneálisan injektálva naponta, 14 napon át. Toxikus hatásokat nem észleltünk. Más (I) általános képletű vegyület sem mutat semmilyen toxikus hatást. 14. példa Annyi 5-[Na-(benal-oxi-karbonil)-L-fenilalaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt kevertünk gél hordozóba (ld. a 13. példát), hoy 1 tömeg% legyen a koncentráció. A gélhordozó elsősorban propilénglikol volt, amelyet Carbopol 940-nel gélesítettünk. 0,05 ml, hatóanyagot tartalmazó gélt egy 1 mm mély teflon edénykébe (Durhing edényke) töltöttünk és mind az öt egyén pszoriázisos foltjára ráhelyeztük. A foltot aztán Scanpor tapasszal fedtük le. A gélt az 1., 3., 5., 8., 10., 12. és l6. napon alkalmaztuk. Minden alkalommal friss gélt, edénykét és tapaszt használtunk. Kiértékelést az 5., 10., 12., 16. és 23. napon (egy héttel a kezelés után) végeztünk. A normális megjelenésű epidermisz jelenlétét vagy hiányát 0-tól 2-ig tartó skálával értékeltük. A vizsgált vegyület pszoriázis-ellenes hatást mutatott. 15. példa Készítmény Komponensek: Tömeg% Tisztított víz U.S.P. 3 Carbopol 940 2 Propil-gallát 0,01 Dinátrium-edetát U.S.P 0,01 Propilénglikollal (U.S.P.) kiegészítve 100 ml-re ó-p^-íbenzil-oxi-karbonilJ-L- fenilalaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol A komponenseket a hatóanyag kivételével összekeverjük (placebo), aztán 19,8gplacebogélbe 0,2 g hatóanyagot bedolgozunk. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 14
