201032. lajstromszámú szabadalom • Eljárás transzglutaminázgátló izoxazolok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201032 B 5-[^-p»nzü<>xi-karbonil)-( ± )-(para-fluor-f enil)-alaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizox azol, 137-139 °C; ^•[^-(benzil-oxi-karbonity-L- fenilalanil-L-tirozinamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol, 203-205 °C; 5-[Not,N-di(benziI-oxi-karbonil)-L- (4-aminofenil)-alaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizo xazol, 201-204 °C' 5-[Not-(beiizil-oH-karbonil)-Nin- formil-L-triptofánamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol52-56 °C; ő-fN^benzil-oxi-karbonil^para -amino-fenil)-alaninamido-metil]-3-br6m-4>5-dihidroizoxa zol, 149-153 °C; 5-(Wenilalanil-L-tirozinamido-metil)-3-bróm -4,5-dihidroizoxazol-para-toluolszulfonsavas só, 193-199 #C(boml.); 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-S-benzil-L -ciszteinamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol, 75-77 °C; 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L -metioninamidometil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol) 130-133 #C; 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-0-acetil-L -tirozinamido-metil]-5-(S)-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol, 152-154 °C, [alfa]D = +35"; ő-fN^O-diíbenzil-oxi-karbonil)^ metoxi-L-tirozinamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazol, 169-172 °C; ő-jN^benzil-oxi-karbonilj^metoxi-L -tirozinamido-metil]-3-bróm-4,5-díhidroizoxazol, 144- 145 °C; S-fN^benzil-oxi-karbonil)^ ± )- (para-jód-fenil)-alaninamido-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxa zol, 154-156 °C és 5-{Na-[(2S)-(6-meíoxi-2-naftil)- propanonil]L-tirozinamido-mctil}-(5S) -3-bróm-4,5-dihidroi zoxazol. 4. példa (II. reakció vázlat — G lépés S-JN^benzil-oxi-karbonilJ-L- tirozinamidometil]-3-klór-4,5-dihidroizoxazol 2,9 g (17 mmól), a 7. előállításmód szerint készült 5-aminometil-3-4,5-dihidroizoxazol-hidrokloridot 500 ml-es, keverővei ellátott főzőpohárba helyezünk és 60 ml vízben feloldunk. 80 ml metilén-kloridot adunk hozzá, és élénk keverés közben a kétfázisú elegy pH-ját nátrium-karbonát adagolásával 9-10-re állítjuk be. Az elegyet választótölcsérbe visszük, és a metilén-kloridos fázist elválasztjuk. A vizes fázist nátrium-kloriddal telítjük és négy alkalommal, azonos térfogatú metilén-kloriddal mossuk. A szerves fázist egyesítjük és telített nátriumklorid-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, majd bepároljuk. így 2,16 g szabad amint kapunk halvány sárga, könnyen mozgó olaj formájában. Az olajat etil-acetátban oldjuk és egy száraz, 500 ml-es, szárítócsővel és hőmérővel ellátott gömblombikba öntjük, amelybe már 5,04 g (Sigma) N(benzil-oxi-karbonil)-L-triozmt mértünk. Még etilacetátot adunk az elegyhez, így a végtérfogata kb. 300 ml és só és jég keverékében 0 °C-ra hűtjük. Ezután 3,7 g l-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-karbodiimid-hidroklorid és 390 mg 4-dimetilamino-pirídin elegyét adjuk hozzá részletekben, kb. 0,5 óra alatt. Az elegyet hagyjuk lassan, néhány órán át szobahőmérsékletre melegedni. Ezután választótölcsérbe visszük és 200-200 ml 5%-os sósavval, 5%os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd magnéziumszulfáton szárítjuk. Szűrés és bepárlás után szilárd maradékot kapunk, amelyet kovasavgélen 40-60% etil-acetátot tartalmazó petroléterrel kromatográfiásan tisztítunk, így a kapcsolt amidterméket félig kristályos hab formájában kapjuk. Etil-acetátból és petroléter elegyéből kristályosítva gélszerű anyag válik ki, amelyből az oldószer nyomait el kell távolítani Újbóli átkristályosítás után a vegyület 149- 150 °C-on olvad. Hasonló módon állítjuk elő az alábbi vegyieteket is: 5-[N“-(benzil-oxi-karbonil)-L- glutaminamidometil]-3-klór-4,5-dihidroizoxazol, 54-62 °C; S-fN^para-metoxi-benzil-oxi- karbonil)-L-tirozinamido-metil]-(5S)-3-klór-4,5-dihidroizoxazo 1,148-149 °C; 5-{Na-[(2S)-(6-metoxi-2-naftil)- propanoil]-L- tirozinamido-metil}-(5S)-3-klór-4,5-dihidroizoxa zol, 215-216 #C, [alfa]D = + 33,0°; 5-[Na-(2-naftil-acetil)-Utirozinamido -metil](5S)-3-klór-4,5-dihidroizoxazol,151-157 ®C, [alfa]D= +46,1°: S-JN^Cl-naftil-aeetilJ-L-tirozinamido- metil](5S)-3-klór-4,5-dihidroizoxazol, 215-217 °C [alfa]D= +67,2°. 5. példa (III. reakcióvázlat - H lépés) droizoxazol-trifluor-acetát-só 7 g 5-[Na-(terc-butoxi-karbonil)-L-fenilalaninamÍdo-metil]-3-bróm-4,5-dihidroizoxazolt 100 ml, 20% triíluor-ecetsavat tartalmazó metilén-ldoridban feloldunk 0 °C-on és 24 órán át állni hagyjuk az elegyet. Bepárláskor olajos, habos anyagot kapunk. % NMR [80 MHz, CDCl3(H20] delta: 2,8-33 (m, 4H, -CH2-), 4,2-4,9 (m, 2H, -CH), 4,7 (s, HÓD), 73 ppm (s, 5H, Ph). á példa (III. reakcióvázlat—I lépés) 5-[Na-(terc-Butoxi-karbonil)-glicil-L- fenilalaninamido-metil]-3-bróm-4^-dihidroizoxazol 175 mg N-(terc-butoxi-karbonil)-glicin 200 ml etil-acetáttal készült oldatához 0 °C-on 400 mg 5- (L-fenilalaninamido-metil)-3-bróm-44-dihidroiz oxazol-trifluoracetát-sót, majd 0,15 ml trietilamint, 120 mg dimetilamino-piperidint és 300 mg EDLI-t adunk. A reakcióelegyet szobahőmérsékletre melegítjük, és 16 óra eltelte után vízzel, 5%-os sósavval, vízzel, 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk. Bepárlással félig szilárd anyagot kapunk, amelyet etilacetát és hexán elegyéből kristályosítunk. A termék 162-169 #C-on bomlás közben olvad. NMR (80 MHz, CDCfe) delta: 1,45 (s, 9H, terc-butil), 2,8-3,3 (m, 4H, -CH2-) 3,45 (t, 2H, - CH2-), 3,75 (d, 2H, -CH2-), 4,5-4,9 (m, 2H, -CH), 5,1 (széles t, 1H, -NH), 6,6 (széles, 2H, -NH), 73 22 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
