200942. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dipiridamolt, illetve dipiridamolt és interferont tartalmazó, daganatok kezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására
HU 200942 B do[5,4/d]-pirimidinnel (Mopidamol). Gastpar (laryng. Rhinol., Otol. 62 (1983) 578- 525) vizsgálatai szerint a mopidamol fokozza az interferonok antimiototikus hatását és a jól ismert, az úgynevezett „killer sejteket aktiváló tulajdonságát. A szerzó a fenti közleményben arról is beszámol, hogy a „mopidamolnak humán promielocitaleukémiás sejtvonal tenyészetéhez történő hozzáadása elősegíti a malignus sejtek normál sejtekké történő, fordított irányú transzformációját, ami állandó fenotipiás változásnak bizonyul. Kimutatható továbbá, hogy a mopidamol szignifikánsan csökkenti a spontán tüdő-metasztázisokat patkányok veleszületett Wilmstumorában (nefroblasztoma), egerek C1300 típusú neuroblasztomájában és patkányok HM-Kim típusú emlőkarcinomájában. A mopidamolnak a fent leírt kísérletekben történt alkalmazása azon a képességen alapult, hogy a szer növeli a cAMP szinteket, ennek következtéken pedig gátolni képes a 3H-timidinnek a daganatsejtekbe történő beépülését (inkorporációját), továbbá közvetlenül gátolja a mitózis sebességét. A cAMP-szintekre gyakorolt hatás azon alapszik, hogy a mopidamol gátolja a foszfodieszteráz (PDE) által indukált cAMP lebontását, továbbá fokozhatja a prosztaciklin szintézisét és/vagy az érfalból történő leadását (release-ét), ami viszont aktiválja a cAMP szintézisben szerepet játszó adenilát-cikláz enzimet. A dipiridamol azonban sokkal gyengébb PDE gátló, mint a mopidamol. Meg kell azonban állapítanunk azt is, hogy a mopidamolnak interferonokkal való kombinációira vonatkozó irodalmi adatok nem egységesek. Míg például J.L. Ambrus és munkatársai szerint (Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 23,183 (1982) a mopidamol fokozza a leukocita- és fibroblaszt-interferonok daganatellenes hatását szövettenyészetben, továbbá a Proc. Sec. Exp. Biol. Med. [177, 487-490 (1984)] közleménye szerint a mopidamol fokozza a humán fibroblaszt-eredetű béta-interferon proliferációt gátló hatását, Wolf és munkatársainak közelménye szerint azonban (J. Med. 15,15-21 (1984) - ellentétben a humán fibroblaszt-inteferonnal együtt kifejtett hatásával -, nem volt megfigyelhető szinergista gátló hatás a mopidamol és számos alfa- és gamma-interferon között; végül Ambrus és munkatársai (Proc. Am. Assoc Cancer Res. 24, 309 (1983) - ellentétben néhány korábbi közléssel -, azt találják, hogy nincs szinergizmus az interferon és a mopidamol között. A dipiridamollal e kutatási területen végzett további vizsgálatot Galabov, munkatársaival együtt (Acta Virol. 1982 26/3/137-147). Galabov vizsgálatain alapul a 0.084.953 számú európai szabadalmi leírás, Galabov és munkatársai szerint a dipiridamol interferon-termelést képes kiváltani in vitro körülmények között, a szervezetből kivett - egerek peritoneumából nyert - leukocitákban és más sejtekben. A szerző arról is beszámol, hogy a dipiridamol interferon-termelést váltott ki egerekben, intravénás alkamazást követően. E vizsgálatokat azonban más kutatócsoportok még nem erősítették meg. Az irodalmi ismertetések és ajánlások értelmében a dipiridamolnak valamilyen interferonnal tör3 ténő kombinációja a daganatok kezelésére alkalmas eljárásnak tűnik, illetve az irodalmi adatok alapján várható, hogy az ilyenfajta kombinált kezelés jelentős eredményre vezethet. A jelen találmány feltalálói azt tapasztalták, hogy a dipiridamol - egy olyan vegyület, melynek nincsenek DNS-t károsító tulajdonságai -, illetve annak valamely, gyógyszerészetileg elfogadható sója meglepő módon növeli az alfa-, béta vagy gamma-interferonok csoportjából választott valamely interferon daganatellenes hatékonyságát. Ennek megfelelően, a találmány alapján egyfelől a daganatos betegek kezelése végezhető el, melynek során dipiridamolt, vagy annak valamilyen sóját adagoljuk a betegnek olyan mennyiségben, mely elegendő ahhoz, hogy fokozza a betegnek szintén beadott interferon daganatellenes hatékonyságát. A találmány alapján olyan daganatos betegek kezelésére vonatkozó eljárás is alkalmazható, melynek során az adott betegnek valamilyen interferont és dipiridamolt, vagy annak valamely, gyógyszerészetileg elfogadható sóját adagoljuk olyan mennyiségben, mely fokozza az interferon daganatellenes hatékonyságát. A találmány tárgya tehát olyan gyógyszerkészítmény előállítására vonatkozó eljárás, mely dipiridamolt vagy annak valamely, gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazza, és amely fokozni képes az interferon daganatellenes hatékonyságát, amennyiben a készítményt daganatban szenvedő, interferonnal kezelt betegnek adagoljuk. A találmány tárgyát képezi olyan gyógyszerkészítmény előállítására vonatkozó eljárás is, mely valamilyen interferont, valamint dipiridamolt vagy annak valamely, gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazza, hagyományos gyógyászerészeti adalékanyagokkal együtt. A találmány leírása során az interferon elnevezézését használjuk a leukocita-(a), fibroblaszt-(p), illetve az immun-(y) interferonok esetében egyaránt. A különböző interferonok aminosav-sorrendjét (aminosav-szekvenciáját), rekombinációs eljárással történő előállításukat, valamint az őket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására vonatkozó eljárást a szakirodalom ismerteti. Például a HuIFNcoa aminosav-szekvenciáját és rekombinált készítményeiket a 0.043.980 közzétételi számú európai szabadalmi bejelentés tartalmazza; a HuIFNocb-t a 0.032.134 közzétételi számú európai szabadalmi bejelentés a HuIFNoűc-t pedig a 0.115.613 számú közzétételi európai szabadalmi bejelentés ismerteti. Hasonlóképpen a 0.028.033 közzétételi számú európai szabadalmi bejelentés a HuIFN-ß aminosav-szekvenciáját és rekombinációs eljárással történő előállítását ismerteti. A Hu- IFN-y amiosav-szekvenciáját és rekombinációs készítményét a 0.051.873 közzétételi számú európai szabadalmi bejelentés közli. A dipiridamolt, illetve annak sóját, valamint az interferont oly módon kell adagolni, hogy azok egyszerrel legyenek jelen a daganatos területen. Előnyös tehát, ha adagolásuk párhuzamosan, vagy lényegében párhuzaosan történik. Jelenleg a daganatellenes kezelés szempontjá4 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
