200451. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1,2-ditiol-3-tion-származékot és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
5 HU 200451 B 6 5-[4-(4-dimetil-amino~fenil)~l,3-butadienil]-l,2-ditiol-3-tion (4. számú vegyület) KüIbö: sötétzöld kristályok. Hozam: 5,3%; olvadáspontja 133-134 °C. 5-[4-(p-toluol)-l,3-butadienil]-l,2-ditiol-3-tion (5. számú vegyület) KülsA: sötétzöld kristályok. Hozam: 26,7X; olvadáspontja 144-145 °C. NMR (CDCb, (9H, m) & ppm) 2,44 (3H, s) 6,50-7,50 Elemanalizi8 C14H12S3 összegképletre: CX HX SX számított: 60.83 4.38 34.79 talált: 60.73 4.11 35.05 5-[4-(o-klór-fenil)-l,3-butadienil]-l,2-ditiol-3-tion (6. számú vegyület) Külső: sötétvőrös kristályok. Hozam: 11,OX; olvadáspontja 161-162 °C. NMR (DMSO-de, 6 ppm) 7,87 (1H, s) 6,84-7,70 (8H, m) 5-f4-(m-metil-fenil)-l,3-butadienil]-l,2-ditiol-3-tion (7. számú vegyület) Külső: sötétvőrös kristályok. Hozam: 23,IX; olvadáspontja 143,5-144,5 °C. NMR (DMSO-de, 6 ppm) 2,36 (3H, s) 6,95-7,51 (9H, m). A farmakológiai vizsgálatok eredményeit az alábbiakban foglaljuk össze. 1, Vizsgálat DNS szintézis csökkenésének vizsgálata egér lép-sejteken A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeknek DNS szintézist csökkentő hatását vizsgáltuk egér lép-sejtekben; a DNS szintézist Concanavalin A (a továbbiakban ConA) segítségével idéztük elő. 10 hetes, nőstény BALB/C egerektől vett 1-105 lép-sejtet 2 jug/ml ConA-t és 10"®, 10'5 vagy 10”* mól vizsgálati anyagot tartalmazó oldatban inkubálunk; az inkubálást 5% CO2 tartalmú légtérben 48 óra hosszat végezzük. Ezt követően 3H-timidint adunk a tápközeghez, majd az inkubálást további 18 óra hoszszat folytatjuk. Az inkubált sejteket elkülönítjük, majd a sejtek 3H-timidin felvételét szcintillációs számlálóval határozzuk meg. ■ Az eredményeket az 1. táblázat foglalja össze. Az összehasonlítási anyag hatását 100- -nak véve állapítjuk meg a vizsgálati vegyületek relatív hatását. 1. táblázat Vizsgálat száma Vizsgált vegyület Koncentráció (mól) Hatás 1 Kontroll-100 1. vegyület 10-« 250 10-s 281 10*4 196 3. vegyület 10-6 175 10-5 338 IO*4 291 Liponsav 10-« 142 IO*3 146 10-* 234 2 Kontroll-100 5. vegyület 10-« 130 10-5 228 Liponsav 10-« 95 10-5 159 2. Vizsgálat I Antitest termelést elősegítő hatás A találmány szerinti eljárással előállított vegyületeknek az antitest termelésre kifejtett hatását vizsgáljuk egereken juh vörös vérsejtekkel (a továbbiakban SRBC) szemben. 7 hetes, nőstény ICR egerek farok vénájában (4 egér csoportonként) 5-107 SRBC-t injektálunk, ily módon az egereket immunizáljuk. Az immunizáció napján és az azt követő napon az egereknek orálisan kétszer adagoljuk a vizsgálati vegyületek 0,5X-os metil-cellulózzal készült oldatát. 3 nappal az immunizációt követően ellenőrizzük az anti-SRBC antitestek termelő lépsejtek számát (PFC szám); a vizsgálatot Jerne módszere szerint végezzük [Science 140 405, (1963)]. A vizsgálati eredményeket a 2. táblázat foglalja össze. 2. táblázat Vizsgált vegyület Beadott dózis . (rag/kg) Hatás Kontroll _ 100 1. vegyület 0.4 258 2.0 149 3. vegyület 0.4 117 2.0 186 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
