200393. lajstromszámú szabadalom • Biokémiai reakcióedény
1 HU 200393 B 2 nélkül megindítjuk a reakcióedényben a véralvadási reakciót, ami most már nagyon gyorsan lezajlik. Előnyősnek tartjuk a 2. igénypont szerinti jellemzőt. A glikolok a találmány szerinti értelemben, reakcióképes atomcsoportokként felhasználható -OH csoportokat tartalmaznak, amelyek hidrofil karakterűek, vagyis a véralvasztási reakció céljára felhasználhatók, másfelől kívánt reakciópartnerek megkötésére, például enzimek vagy fehérjetestek megkötésére alkalmasak. A glikoloknak műanyagokban, a bevezetőben említett módon történő megkötése nem jelent problémát. Kísérleteink során különösen az etán-diol és propán-triol mutatkoztak előnyösnek. Előnyösnek tartjuk továbbá a 3. igénypont jellemzőjét. A glicerin-glikol használata a megfelelő kísérletek tanulsága szerint erősen hidrofil hatású és amiatt előnyös, hogy el nem távozó módon építhető be a műanyagba. Előnyös továbbá az 4. igénypont szerinti jellemző. Az itt megadott glicerin-glikol tömeghányad, előnyösen 0,9 % a kísérletek során optimumnak bizonyult. A tömegrésznek a megadotthoz képest körülbelül egy nagyságrenddel kisebb vagy nagyobb mennyisége csak lényegtelen mértékben rontja az eredményt. Előnyös továbbá a véralvasztási reakció kivitelezésére szolgáló reakcióedénynek az olyan kivitelezése, amelynek során a műanyaghoz ennek termoplasztikus alakadása előtt kis mennyiségben kémiailag közömbös élesszemcséjű kemény anyag porát keverjük, így a reakcióedény felületébe éles szemcséket építünk be, amelyek csiszolóhatásuk következtében növelik a roncsoló hatást. Ily módon az alvadási idő még tízszeresen lerövidíthető. Ezen belül előnyös a találmány szerinti reakcióedények olyan kivitelezése, amely szerint a kemény anyag pora szilikátliszt. Igen finom, Angström-tartományba eső méretű, vagyis igen nagy felületű szilikátliszt használható. Ez az igen finom szemcseméretű anyag azonban be van kötődve a műanyagfelületre és nem kerül szabadon a szérumba. Előnyös továbbá a szilikátliszt 1 tömeg % alatti mennyiségben való használata. Ez a tömegrész megfelelőnek bizonyult és oly alacsony, hogy a műanyag megkívánt fizikai tulajdonságait nem változtatja meg. Ily módon a véralvasztási reakció 1 percnyi időn belül lefolytatható. A következőkben először egy, a véralvasztási reakció végrehajtására előnyösen alkalmas reakcióedény kiviteli példáját írjuk le. A reakcióedény alkalmas hőre lágyuló műanyagból állhat. Ilyen műanyagként elsősorban a polisztirol, polipropilén, polietilén, polikarbonát, poliakrilát és a polietiléntereftalát jön számításba. Különösen a poliszáról, polipropilén és a polietiléntereftalát vált be, melyek az előállítási eljárástól vagy a reakcióedénnyel szemben támasztott megkívánt fizikai- mechanikai tulajdonságoktól függően tetszés szerint választhatók meg. A kiviteli példákban e két, előbb említett műanyagot tetszés szerint használtuk. A reakcióedény általában hengeres kiképzésű és előnyösen már a paciensből történő vérvételnél fecskendőhengerként használható. Ebben az edényben megy végbe a véralvadási reakció. Az edény geometriailag előnyösen olyan kiképzésű, hogy ezt követően centrifugacsőként és adott esetben azután primer mintaedényként az analizáló automata készülékben használható, úgy, hogy áttöltésre és hasonló műveletekre nincs szükség. Előnyös módon a reakcióedényt például a következő módon állítjuk elő. 25 kg kereskedelemben kapható polisztirol vagy polipropilén granulátumhoz 225 g glicerin-glikolt és 25 g szilikátlisztet adunk. Az elegyet homogénen összekeveijük, plasztifikálásig melegítjük és megfelelő szerszámban extrudáljuk. Lehűtés és szerszámból való kivétel után a reakcióedények készek. A glikolmolekulák oly módon vannak a műanyagba beépítve, hogy abból kilépni, eltávozni nem tudnak. A műanyag felületébe a glikolmolekulák oly módon vannak beágyazva, hogy szabad -OH csoportjaik vannak a műanyagfelületen szabadon, és ott a találmány értelmében reakcióképes atomcsoportokként állnak rendelkezésre. A vérszérum kinyerése előnyösen a következő módon történik: A fentiekben leírt módon előállított reakcióedénybe- előnyösen közvetlenül a vérvétel során, amennyiben a reakcióedény fecskendőhengerként van kiképezve- teljes vért viszünk be. A vérben lévő thrombocyták a műanyagba beépített glikol szabadon lévő -OH csoportjainak hidrofil hatása következtében mechanikailag bensóleg érintkeznek az edényfallal, amelybe szilikátliszt-szemcsék vannak beágyazva. A thrombocyták megsérülnek és szabaddá teszik a prothrombin indító enzimet. Ekkor lezajlik a véralvadási lánc. A leírt reakcióedényeknél a vér és az edény első érintkezésétől számítva kb. 1 percet kell várni. Ezután azonnal, illetve már a vérvétel alatt lezajlik a véralvadás. A vérminta azonnal centrifugálható, ennek során az alvadási szilárd anyagok és a sejtek leülepednek. Ezután a szérumot dekantáljuk. A találmány szerinti reakcióedény fenti kiviteli példájában a glicerin-glikolnak és szilikátlisztnek a műanyag granulátumba a plasztifikálás előtti hozzáadását ismertettük. Alternatív módon ez a termék előre összekeverve granulátum formájában is használható és ezt maga a műanyaggyártó is előállíthatja. A leírt reakcióedények különösen kitűnnek azzal is, hogy könnyen megsemmisíthetők. A használt, hőre lágyuló műanyagok megsemmisítését a találmány szerinti adalékanyagok nem zavarják. Lehetőség van tehát például veszélyesanyag-mentes elégetésükre. A jelen találmány keretében további alkalmazási területekre szolgáló reakcióedények megfelelő módon állíthatók elő. Különösen előnyösen komplexebb kémiai reakciókhoz a mintára reakciópartnerként fehérjetestek köthetők az edényfalra, éspedig a műanyagba ágyazott anyag szabadon lévő reakcióképes atomcsoportjaira. Antigén-antitest reakciók céljára például a reakcióképes atomcsoportokra sejtfragmensek köthetők. Enzimreakciók céljára azokra enzimek köthetők. Ilyen módon még élő sejtek is köthetők a műanyagfelületre és ezek teljes biokémiai aktivitásukkal rendelkezésre állnak. Biospecifikusan ható ligandok megkötése a műanyaghoz hozzáadott adalékanyag műanyagfalon elhelyezkedő aktív atomcsoportjain történhet közvetlenül vagy ismert módon ún. „specer”-eken keresztül, amennyiben ez a végzendő reakcióhoz szükséges. Szabadon maradó reakcióképes atomcsoportokkal rendelkező, a műanyaghoz adandó ilyen adalékanyag-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
